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利用带有促溶标签SUMO和纯化标签6×His的原核表达载体,构建了调控北柴胡皂苷生物合成的转录因子基因BcAP2-13的原核表达载体p13-SUMO-His6。载体热激转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)后,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导培养,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明,28℃和37℃不同温度诱导条件下均得到了融合蛋白13-SUMO-His 6。以Ni-NTA柱纯化的融合蛋白为抗原,免疫成年兔4次以制备多克隆抗体。间接酶联免疫法检测结果表明,所得抗体效价较高。提取北柴胡毛状根及BcAP2-13超表达毛状根的总蛋白,免疫印迹检测结果表明,在2种毛状根蛋白样品中均能检测到与预计13-SUMO-His6蛋白分子量大小一致的条带,BcAP2-13过表达毛状根总蛋白样品的条带强于普通毛状根总蛋白样品的条带,与预期一致。成功制备了北柴胡BcAP2-13的多克隆抗体,为进一步研究北柴胡转录因子BcAP2-13的确切作用位点和调控机制奠定了基础。 相似文献
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沥青混凝土是工程施工过程中常用的材料,其最大特点是拥有很强的防水防渗性能。沥青混凝土坝防渗心墙的设计简单,施工速度快,工程量较小,防渗性强,因此被越来越多地用于各种工程建设,尤其是水利工程建设中。本文以实际工程为例介绍了碾压式沥青混凝土坝防渗心墙的现场施工技术,为实际工程施工提供建议和参考。 相似文献
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初花后土壤碱解氮浓度对棉花生物量和氮素累积特征的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
试验于2009—2010年分别在江苏省棉花科技示范基地东台市(120°19'' E, 32°52'' N)和大丰市(120°28'' E,33°12'' N)进行。设置6个水平(0、150、300、375、450和600 kg hm–2)施氮量,研究土壤碱解氮浓度变化特征及对棉花生物量和氮素累积特征的影响。结果表明,棉花初花后土壤碱解氮浓度的动态变化可用三次函数方程模拟,棉花生物量、氮素累积动态可用Logistic方程拟合;土壤碱解氮浓度快速下降期的平均速率、持续时间分别与棉株生物量、氮素快速累积期的最大相对累积速率、持续时间有较高的相关性;在375 kg hm–2施氮量下,土壤碱解氮浓度快速下降期具最佳平均速率和持续时间,棉株生物量和氮素快速累积期有最优的累积特征值,棉花具有最优的生物量、氮素累积特征值,棉花产量最高、综合品质最优。高施氮量和低施氮量皆不利于棉花生物量和氮素的累积。因此,适宜的施氮量及施氮运筹可调节棉花初花后土壤碱解氮浓度的动态变化,优化棉花生物量和氮素的累积以及产量和品质。 相似文献
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[目的]分析家蚕卵形指数对孵化率的影响规律,以及孵化酶基因(BmHE I和BmHE II)、几丁质酶基因(Chitinase)和周期蛋白基因(Period)在不同卵形间的表达规律,为阐明家蚕卵形指数与孵化率的相关性及其分子机理打下基础.[方法]调查家蚕Nistari品种野生型正常形品种(Nistari+)及其新突变体纺锤形品种(Nistari-)的卵形指数、孵化率、受精率和转青死卵率,分析其卵形指数与孵化率的相关性;并通过实时荧光定量PCR检测蚕卵胚胎发育后期孵化相关基因的表达情况.[结果]Nistari+蚕卵的平均卵形指数为1.26,极显著低于Nistari-蚕卵(1.73)(P<0.01,下同);孵化率为96.22%,极显著高于Nistari-蚕卵(51.33%).当Nistari+蚕卵的卵形指数为1.24~1.25时,其孵化率(97.39%)和受精率(98.84%)均最高,转青死卵率最低(2.61%);而Nistari-蚕卵的卵形指数为1.77~1.81时,其孵化率(56.52%)和受精率(74.87%)均最高,转青死卵率最低(43.48%).相关分析结果表明,Nistari蚕卵孵化率、受精率和转青死卵率与卵形指数存在一定的相关性,且受卵形指数影响.在蚕卵胚胎发育后期(孵化前),Nistari+蚕卵的BmHE I、BmHE II、Chitinase和Period基因大量表达,对应的相对表达量显著(P<0.05)或极显著高于NISTAR-蚕卵.[结论]家蚕Nistari品种的卵形指数与孵化率存在一定相关性,而BmHE I、BmHE II、Chitinase和Period基因的表达差异是导致Nistari-蚕卵与Nistari+蚕卵孵化率差异的分子基础. 相似文献
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研究苦参、白鲜皮和土荆皮提取物在石膏样小孢子菌、犬小孢子菌、须癣毛癣菌3株皮肤癣菌体外联合药敏试验中的相互作用,为临床用药提供参考依据。采用棋盘微量稀释法测量3种中药提取物对皮肤癣菌的联合抑菌指数(fractional in-hibitory concentration index,FICI)对其联用效果进行评价。结果发现,苦参醇提物与白鲜皮醇提物两者联合应用,对3株皮肤癣菌FICI值分别为1,0.75,1,FICI值均≤1,对3株真菌的抑制效果呈相加作用;土荆皮醇提物与苦参醇提物、白鲜皮醇提物联合应用,FICI值均≥2,对3株真菌的抑制效果呈无关或拮抗作用。 相似文献
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猪传染性胸膜肺炎(PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起的一种高度传染性呼吸道病,又称为坏死性胸膜肺炎,以呼吸道急性出血和慢性纤维素性胸膜肺炎为主要特征,急性者病死率高,慢性者常能耐过。本人在2007年4—5月对某猪场的一起疑似猪传染性胸膜肺炎,进行了发病率、临床症状、死亡率、病理解剖的调查与临床诊治的效果观察。现将诊治情况报告如下。 相似文献
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奶牛乳房水肿是奶牛养殖场高产奶牛围产期的一种营养代谢紊乱性疾病,在高产奶牛群和头胎奶牛群中发病率为20%~50%,头胎奶牛群中甚至高达96.0%,是同产期奶牛最常发生的疾病。 相似文献
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瓜果腐霉毒素对多年生黑麦草的致病作用机理初步研究 总被引:2,自引:1,他引:1
为了明确瓜果腐霉毒素对多年生黑麦草的致病作用机制,本试验对瓜果腐霉毒素处理后多年生黑麦草的叶绿素、β-胡萝卜素、光合系统Ⅱ、丙二醛、超氧自由基、希尔反应活力、根系活力以及叶片含水量进行了测定。结果发现,毒素处理后的多年生黑麦草叶绿素、β-胡萝卜素遭到了破坏,Fν/Fm,Fm随剂量增加而降低,新速ⅡF0几乎不变,而英斯派F0随剂量的增大而增大,丙二醛含量随除草毒素剂量的增大而增大,超氧自由基含量随除草毒素剂量的增大而增大,同时发现2种多年生黑麦草的希尔反应活力、叶片含水量、根系活力也受到了不同程度的影响。 相似文献