菌丝霉素分泌型丁酸梭菌防治罗非鱼链球菌病的应用研究

为解决罗非鱼链球菌感染难题,本研究在抗菌肽菌丝霉素分泌型丁酸梭菌制剂的基础上,对其进行了抑菌活性、稳定性和罗非鱼养殖应用研究。结果发现:表达产物菌丝霉素对常见致病菌如大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌和猪链球菌均有较好的抑菌活性。选用米糠作为菌丝霉素分泌型丁酸梭菌的保护剂载体,此制剂可在常温保存一年。通过上述的应用基础试验,初步建立一套菌丝霉素分泌型丁酸梭菌制剂养殖应用方案,此方案可显著降低罗非鱼链球菌病发病率58.6%以上。本研究为丁酸梭菌制剂在防治罗非鱼链球菌病应用方面提供了参考,此制剂有望替代抗生素,促进罗非鱼养殖业的持续健康发展。     

猪PR39 真核表达载体构建

为构建猪源抗菌肽PR39的高效表达真核载体pVAX1-PR39,通过猪股骨骨髓组织基因组RNA合成c DNA,根据PR39基因全长序列,设计高效表达启动子,利用PCR扩增获得PR39全长基因,连接到真核载体pVAX1,构建重组载体pVAX1-PR39。转化大肠杆菌DH5α后进行菌落PCR鉴定和测序,测序结果与NCBI网站上猪源抗菌肽PR39基因序列完全一致,表明已成功构建了猪PR39的真核表达载体,理论上所构建的PR39表达载体能够提高猪的免疫能力。     

人工合成免疫刺激CpG DNA联合鸡新城疫疫苗对SPF鸡免疫应答的影响

以鸡新城疫病毒为模式病毒，分别以不同浓度人工合成的免疫刺激序列CpG DNA联合鸡新城疫低毒力活疫苗免疫SPF新生小鸡，通过ELISA法检测鸡血清中抗-NDV抗体水平，并用MTT法检测淋巴细胞白介素-2诱生活性以及淋巴细胞增殖指数（SI），结果显示：不同浓度的CpGDNA均能显著提高仔鸡的特异性抗体滴度、淋巴细胞白介素-2诱生活性以及淋巴细胞增殖反应，证明CpGDNA能显著增强鸡对常规疫苗的免疫应答能力。     

CpG序列对猪伪狂犬疫苗免疫效果的影响

将CpG DNA同猪伪狂犬疫苗联合免疫接种初生仔猪,检测仔猪的体液及细胞免疫反应,试验结果表明,CpG DNA与猪伪狂犬疫苗共同免疫的仔猪,其特异性抗体滴度、淋巴细胞白介素-2诱生活性以及淋巴细胞增殖反应均显著高于伪狂犬疫苗免疫组和对照组,证明CpG DNA能显著增强仔猪对常规疫苗的细胞和体液免疫反应.     

木霉的空间诱变效应

本文对产纤维素酶的木霉菌孢子和斜面培养菌体搭载中国第18颗返回式卫星后,菌落形态和产酶能力的变化进行了研究。实验结果表明,搭载菌株的菌落形态发生变异,菌株的生长周期出现了缩短或延长的现象。对搭载的木霉菌株进行筛选,获得3株产酶能力大幅度提高的优良突变菌株,产酶能力提高了50%以上,且性状遗传稳定。     

CpG-ODN不同免疫途径对仔猪免疫增强效果的研究

以不同途径进行CpG-ODN免疫仔猪后,再以活的肠毒素大肠杆菌为模式病毒对仔猪进行攻毒,观察各组新生仔猪的腹泻情况,并测定血液中特异性抗体的含量、肠道中大肠杆菌数量的变化。结果表明,100μg/kg CpG-ODN+20%苦杏仁苷酶(Em)通过滴鼻免疫后,血液中特异性抗体含量约为对照组的3倍,肠道大肠杆菌数量显著下降,与对照组差异显著,同时腹泻症状明显减轻,仔猪体重增加明显。这显示了CpG-ODN通过滴鼻免疫能够显著提高新生仔猪对肠道病原细菌感染的抵抗能力。     

猪SIRT1基因的克隆、表达及多克隆抗体制备

根据GenBank中猪SIRT1mRNA序列设计引物,使用杜大长商品猪大脑RNA经RT-PCR扩增得到猪SIRT1基因全长表达序列,通过Ω-PCR将SIRT1蛋白末端抗原表位序列插入载体pET-28a(+),在大肠杆菌中表达并纯化得到45ku大小的蛋白,以其免疫新西兰大白兔并制备出抗体滴度达212的多克隆抗体。结果表明,成功制备出可以特异性识别猪SIRT1蛋白的抗体。     

国产多粘菌素对雏鸡人工感染大肠杆菌的保护

多粘菌素是由日本在20世纪50年代分离培养获得，因其对G－菌的强大抑菌作用而受到重视。我国山东鲁抗医药集团公司于本世纪初也成功生产该抗生素，填补了国内空白，本研究旨在验证国产多粘菌素人工感染对大肠杆菌的保护和治疗效率。     

复合型微生态制剂对断奶仔猪肠道有害菌的抑制作用

复合型微生态制剂对断奶仔猪肠道内有害菌 (大肠埃希菌和沙门氏菌 )的抑制作用试验结果表明 ,饲养 12h后 ,试验组 (基础日粮添加 0 .1%复合型微生态制剂 )断奶仔猪肠道大肠埃希菌和沙门氏菌的繁殖开始受到抑制 ;饲养48h后 ,试验组断奶仔猪肠道大肠埃希菌和沙门氏菌的数量分别只有对照组的 0 .85 %和 0 .2 5 % ,均达到了极显著差异水平。     

复合微生物制剂在改善水产养殖微生态环境中的应用

应用复合微生物制剂对养殖水体进行处理,结果表明：它能有效降解有机淤泥,抑制有害微生物和有害藻类的繁殖,平衡养殖水体的微生态环境,促进养殖生物健康生长,是目前水产养殖中水处理的一种较为理想的办法。