思茅松毛虫2龄幼虫肠道好氧细菌的筛选及毒力测定

[目的]筛选思茅松毛虫（Dendrolimu.kikuchii Matsumura）2龄幼虫肠道好氧细菌并测定其毒力。[方法]将思茅松毛虫2龄幼虫中肠样品倍比稀释后涂布平板分离菌株,共分离得到5株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,用细菌16S rDNA通用引物（27f和1492r）对模板扩增,并用4种限制性内切酶Hae Ⅲ和Hind Ⅲ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。[结果]聚类图谱分析发现,5株好氧细菌在95%的相似水平上聚成2个不同分类操作单元（OTU）,表明思茅松毛虫2龄幼虫肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。室内毒力试验表明,肠道细菌杀虫死亡高峰期在4～10d,菌株4杀虫效果最佳,12d时校正死亡率达到53.57%。[结论]为防治思茅松毛虫提供了参考。     

高强高耐水土体固结剂在生态建设中的应用研究

高强高耐水土体固结剂具有应用范围广、早期强度高、水稳定性与耐久性好、湿胀与干缩变形小等特点。长阳县对运用该固结剂修筑梯田土坎、土质晒场和道路的效果进行了实验。结果表明 ,运用该固结剂修筑的梯田土坎、土质晒场和道路均能满足设计强度要求 ,施工工艺简单 ,在无砂石料和运输困难的地方使用固结剂修筑土坎、晒场和道路 ,可节约工程投资 10 %以上     

思茅松毛虫6龄幼虫肠道细菌的ARDRA分析与鉴定

从自然种群的思茅松毛虫(Dendrolimus kikuchii Matsumura)6龄幼虫肠道环境中分离、纯化、培养获得了6株细菌.以细菌基因组DNA为模板进行PCR扩增,用2种双酶组合Hae Ⅲ和Hin d Ⅲ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR产物进行核糖体DNA扩增片段限制性内切酶分析(ARDRA),得到了3个操作分类单元(OTUs).对每个操作分类单元(OTU)的代表菌株进行16 S rDNA序列测定,序列分析结果表明,分离到的6株肠道细菌中,6N01、6N02、6N03、6N04和6N05属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.),6N06属于克雷伯氏杆菌属(Klebsiella sp.).     

兰坪铅锌尾矿区根瘤菌对铅锌响应研究

以从兰坪铅锌尾矿区已分离纯化的10株豆科植物根瘤菌为研究对象,用含50～1 500 mg/L的铅、200～2 000 mg/L的锌的单盐YMA培养基和双盐培养基进行培养,观察根瘤菌的生长情况,筛选出3株耐(抗)铅锌菌株,分别为菌株14.2.9、18.2.17、3.2.3。结合生理生化指标的测定结果,发现耐性强的菌株对各种糖利用特征与其他菌有所不同,能产酸而不产气;分解利用油脂、淀粉、明胶等物质的能力高于耐性弱的根瘤菌。说明在兰坪尾矿区根瘤菌存在多种生理类型,很可能通过改变代谢途径适应重金属污染的环境。     

思茅松毛虫7龄幼虫肠道好氧细菌的筛选及毒力测定

将思茅松毛虫7龄幼虫中肠样品倍比稀释后涂布平板分离菌株,共分离得到14株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,用细菌16S rDNA通用引物(27f,1492r)对模板扩增,并用2种限制性内切酶HaeⅢ和HindⅢ对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。对聚类图谱的分析结果发现,14株好氧细菌在86%的相似水平上聚成4个不同分类操作单元(OTU),表明思茅松毛虫7龄幼虫肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。室内毒力试验表明,肠道细菌杀虫死亡高峰期在4～8 d,菌株7I-5杀虫效果最佳,12 d时校正死亡率达到64.29%。     

疣蝗肠道好氧细菌的分离及ARDRA多态性分析

将疣蝗中肠样品倍比稀释后涂布平板分离菌株,共分离得到11株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,用细菌16SrDNA通用引物（27f,1492r）对模板扩增,并用4种限制性内切酶HaeⅢ和HindⅢ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。对聚类图谱的分析结果发现,11株好氧细菌在82%的水平上聚成3个不同分类操作单元（OTU）,表明疣蝗肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。