粉末活性炭联合柱层析法纯化藻蓝蛋白的研究

以巢湖新鲜蓝藻藻泥为原料，通过冻融破壁的方法获得藻蓝蛋白粗提液，采用粉末活性炭法-羟基磷灰石柱层析法纯化藻蓝蛋白。在粉状活性炭法的研究中，通过单因素试验研究了粒径、添加量、藻蓝蛋白浓度和时间对藻蓝蛋白的提纯效果，并与羟基磷灰石柱层析法联用以优化高纯度藻蓝蛋白的提取纯化工艺组合。结果表明，粉末活性炭法纯化藻蓝蛋白的最优条件是粒径400~500目，藻蓝蛋白浓度1.0 mg·mL^-1，添加量100 g·L^-1和吸附时间15 min，经羟基磷灰石柱层析法纯化后，藻蓝蛋白纯度可达4.51，回收率为36%。     

不同冻融条件对破壁提取巢湖水华新鲜蓝藻中藻蓝蛋白的影响

[目的]研究不同冻融条件对破壁提取巢湖水华新鲜蓝藻中藻蓝蛋白的影响,为后续提取纯化试剂级藻蓝蛋白提供支持。[方法]在各种条件下,冻融破壁后,利用粗提液中藻蓝蛋白即PC纯度和得率为评价指标,研究不同冻融次数、不同含水率和不同冻融介质对藻蓝蛋白提取效果的影响。[结果]粗提液中PC纯度随着冻融次数的增加而依次减小,PC得率随着冻融次数的增加呈现下降的趋势;PC纯度和得率随着含水量的增大呈现先持平后降低的趋势;在不同冻融介质的试验中,通过比较得出最优的冻融介质为浓度0．0025mol／L的PBS缓冲溶液。[结论]对于冻融储存时间较长的巢湖新鲜蓝藻,最优的试验条件是选用浓度为0．0025mol／L的PBS缓冲液作为冻融介质,在含水率为96．O％～97．5％区间冻融次数仅需1次,即可得到最优的PC的纯度和得率。     

不同试验条件对藻蓝蛋白提取效率的影响

以实验室培养的水华蓝藻单种[铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa,M.A)、水华微囊藻(Microcystis flos-aquae,M.F)、惠氏微囊藻(Microcystis wesenbergii,M.W)、鱼腥藻(Anabaena sp,A.s)]以及野外新鲜水华蓝藻为研究对象,通过设置不同细胞破碎方法和提取剂种类,筛选并优化藻蓝蛋白荧光分析法的前处理技术。结果表明,冻融试验中,冷冻温度与提取剂添加顺序对蓝藻细胞破碎率无显著影响;以去离子水为提取剂时,冻融2次即可达到最佳破壁条件;在冻干试验中,蓝藻真空抽滤在滤膜上能提高蓝藻细胞的破碎率;综合比较冻融和冻干,后者对蓝藻细胞的破碎效率高于前者;对比3种提取剂对藻蓝蛋白的提取效率,去离子水对藻蓝蛋白的提取效率最高。     

光催化氧化与内电解法降解有机染料废水的研究

[目的]考察光催化氧化与内电解法降解有机染料废水的综合处理效果。[方法]以活性艳蓝X．BR染料废水为研究材料,探讨以CuSO4、FeCl4、KMnO4、NaClO为光催化剂时影响均相光催化处理染料废水的作用机制,寻求最佳催化剂,然后将其与铁屑内电解联用。确定最佳试验条件。[结果]采用均相光催化与内电解法联合处理活性艳蓝染料废水,对CODC4的去除率能达到83％以上,脱色率能达到85％以上。最佳试验条件确定为：最佳催化剂为CuSO4,催化剂最佳用量为50ml染料废水中投加0．0233g硫酸铜,光催化时间为5h。溶液初始最佳pH值为5．1～5．6,内电解最佳时间为3h。[结论]光催化氧化对CODCr的去除率较高,而内电解法对色度的去除率比较好,两种方法联用处理有机染料废水效果最佳。     

正交实验法优化粉煤灰处理生活污水的实验条件初探

[目的]优化改性粉煤灰处理生活污水的实验条件。[方法]用正交实验法对用改性粉煤灰处理生活污水的实验条件进行优化选择,研究在最佳条件下,此絮凝剂对生活污水中COD、总磷与总氮的去除情况。[结果]在粉煤灰与磁介质的比例,pH值,粉煤灰投加量,搅拌时间4个因素中,粉煤灰投加量对COD去除率的影响极显著,粉煤灰与磁介质比例的影响显著,而搅拌时间和pH值的影响不显著。当粉煤灰与磁介质的比例为1∶1,pH=7,投加量为300 mg/L,搅拌时间3 min时,对COD的去除率最高。在此最佳实验条件下,生活污水COD、总磷与总氮的去除率分别为85%、45%和80%。[结论]该研究为生活污水的处理提供了依据。     

分段盐析联合两步柱层析纯化巢湖蓝藻藻蓝蛋白

以巢湖打捞的新鲜蓝藻藻泥为处理对象,利用冻融破壁的方式获得藻蓝蛋白(phycocyanin,PC)粗提液。采取两步盐析初步纯化粗提液获得PC,再用纤维素(Cellufine A-500)阴离子交换树脂中度纯化PC,最后用羟基磷灰石(HA)柱高度纯化PC。结果表明,在室温25℃下,两步盐析(NH_4)_2SO_4的最佳摩尔浓度分别为1.0mol·L~(-1)和1.8 mol·L~(-1),PC纯度(A_(620)/A_(280))达到2.168,PC回收率可达37.5%。再经Cellufine A-500和HA两步柱层析纯化,PC纯度(A_(620)/A_(280))分别达到3.211和4.133,回收率分别为20.3%和7.2%,纯度达到试剂级纯度要求。