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布鲁氏菌M5-90△WboA基因缺失株的构建及免疫效果的初步评价 总被引:2,自引:1,他引:1
为获得毒力较弱并能区分自然感染和疫苗免疫的布鲁氏菌候选疫苗株,本研究用PCR方法扩增WboA基因的上下游同源臂序列,构建重组质粒pGEM-7zf-△WboA-Sac,电转化布鲁氏菌M5-90感受态细胞,筛选布鲁氏菌疫苗株M5-90的WboA基因缺失株,并对获得的M5-90△WboA遗传稳定性、毒力、免疫保护性、抗体水平等指标进行检测.实验结果表明M5-90△WboA株的毒力比M5-90株明显减弱,差异极显著(p<0.01),体液免疫和细胞免疫结果表明M5-90△WboA株与亲本M5-90株相比差异不显著(p<0.05),M5-90△WboA株和亲本株的保护率分别为10%和20%,表明M5-90△WboA株与M5-90株具有相似的保护性.凝集试验和western blot试验显示M5-90△WboA株免疫小鼠的血清反应结果为阴性.本研究构建的布鲁氏菌基因缺失株M5-90△WboA具有较好的遗传稳定性,毒力比亲本株更弱,免疫保护性与亲本株相当,并能以血清学检测方法区分野毒株感染和缺失疫苗株免疫的动物. 相似文献
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2011年10月,国家林业局在广西壮族自治区北海市和南宁市召开了全国林下经济现场会,会议学习传达了中央领导同志关于发展林下经济的重要指示和批示,国家林业局局长贾治邦在会上做了题为《壮大林下经济实现兴林富民全面推动集体林权制度改革深入发展》的讲话,指出要深刻认识发展林下经济的重要意义,加快发展林下经济产业。为了全面贯彻落实2011年全国林下经济现场会精神,国家林业局于今年8月召开全国林下经济现场会暨深化集体林 相似文献
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菜阳河自然保护区两栖爬行动物调查报告 总被引:3,自引:0,他引:3
2 0 0 0年 5 6月对云南省思茅菜阳河省级自然保护区两栖爬行动物多样性进行了调查。调查结果表明 :菜阳河自然保护区共有两栖爬行动物 89种。其中 ,两栖类 39种 ,隶属于 2目 6科 18属 ;爬行类 5 0种 ,隶属于 3目17科 41属。属于国家Ⅰ级重点保护的种类有 2种 ;Ⅱ级重点保护的种类有 5种 ;云南省省级保护动物 3种 ;列入云南省“三有”动物的 10种。结合调查结果 ,对菜阳河自然保护区提出了进行功能区划 ,分区管理 ,以及严格管理农药的使用等两方面的建议。 相似文献
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率先对江西的野生侧耳属真菌进行了系统的分子和形态学研究。采集到江西野生侧耳标本4份,经鉴定,代表了3个物种,分别为糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)、巨大革耳(P. giganteus)和美味侧耳(P. sapidus),其中巨大革耳为江西新记录种。从野生子实体中分离得到4个菌株并进行了驯化栽培试验,确定了出菇的基本条件。其中,美味侧耳(JAUCC 0916)属于低温种,头茬菇生物学效率为112.8%;糙皮侧耳(JAUCC 0733和JAUCC0917)为广温种,生物学效率为126.62%;巨大革耳(JAUCC 0730)为广温种且覆土栽培产量较高。对江西省报道的共6种侧耳属真菌做了系统的分类学综述,并编制分种检索表。 相似文献
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为切实猪O型口蹄疫抗体的免疫情况,科学评估免疫的质量,采用间接ELISA方法定点对17个规模猪场育肥猪108份、保育猪117份、哺乳仔猪121份、母猪60份、公猪104份(春、秋季各510份),共计1 020份猪O型口蹄疫免疫抗体血清进行检测,结果显示,春季阳性414份,平均免疫合格率为81.83%,大于农业部规定的标准(≥70.00%),免疫合格率较低的为65.00%和68.33%,未达到农业部规定的标准,不同类型猪的阳性水平春季平均阳性率74.10%,公猪阳性率94.23%,阳性率最高,其次是母猪77.78%,依次是育肥猪72.22%、保育猪70.08%、哺乳仔猪56.20%。秋季平均免疫合格率为85.00%,大于农业部规定的标准,免疫合格率最高96.67%,最低合格率70.00%,不同类型猪阳性水平,平均阳性率81.70%,母猪阳性率95.56%,阳性率最高,其次是育肥猪89.81%,然后依次是公猪88.46%、保育猪74.35%、哺乳仔猪60.33%。综合:2015年两次监测猪O型口蹄疫抗体中,春、秋季各地区猪O型口蹄疫抗体水平差异较大,大部地区免疫合格率均大于农业部规定的标准,部分地区抗体水平有待提高,哺乳仔猪的免疫水平较低。 相似文献
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布鲁氏菌外膜蛋白BP26细胞毒性作用的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】布鲁氏菌外膜蛋白BP26是布鲁氏菌的重要毒力因子,本研究采用bp26基因缺失株和BP26蛋白分别与胚胎滋养层细胞(HPT-8)作用,探讨布鲁氏菌bp26基因的生物学功能。【方法】采用Ni柱亲和层析法纯化BP26蛋白,overlap技术构建布鲁氏菌bp26基因缺失株,用BP26蛋白和bp26基因缺失株分别侵染HPT-8细胞,观察细胞形态变化,ELISA检测上清中的细胞因子。【结果】 从布鲁氏菌疫苗株M5-90克隆出bp26基因并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中成功表达,获得纯化的BP26蛋白,经SDS-PAGE验证正确,Western-Blot鉴定具有免疫原性。将目的片段bp26基因的上下臂插入到自杀载体pGEM-7zf中,电转至布鲁氏菌疫苗株M5-90感受态细胞中,成功筛选出了具有遗传稳定性的bp26基因缺失株。用BP26蛋白与bp26基因缺失株分别侵染HPT-8层细胞,BP26蛋白使细胞变形且贴壁不牢,缺失株导致细胞大量脱落溶解,ELISA检测蛋白侵染HPT-8细胞诱导产生的细胞因子IL-6、TNF-α和LDH均高于PBS对照组,差异极显著(P<0.01), 而细胞因子IL-10的分泌下降。缺失株侵染HPT-8细胞诱导产生的细胞因子IL-6、TNF-α均高于M5-90对照组,LDH和IL-10均低于M5-90对照组,差异显著(P<0.05)。【结论】成功获得了布鲁氏菌BP26蛋白和M5-90Δbp26缺失株,BP26蛋白可以引起HPT-8细胞的炎性反应,有细胞毒性作用,bp26基因缺失株对HPT-8细胞有损伤作用,bp26基因在布鲁氏菌侵染宿主细胞过程中起重要作用。 相似文献
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