益生菌发酵乳无菌提取物对空肠弯曲杆菌flaA σ28启动子的抑制作用（英文）

为了研究益生菌发酵乳无菌提取物对食源性有害微生物(空肠弯曲杆菌)有毒基因表达的抑制作用,以利用空肠弯曲杆菌的有毒基因flaA σ28启动子和无启动子的质粒pRYluxCDABE联结构建的生物冷光转基因模型为试验材料,通过检测生物发光特性的方法,研究了空肠弯曲杆菌有毒基因flaA表达与益生菌(5种双岐杆菌,6种乳酸杆菌)发酵乳无菌提取物之间的关系。结果表明,益生菌发酵乳无菌提取物对空肠弯曲杆菌flaA σ28启动子的活性有显著的抑制作用(P<0.05),并可显著抑制空肠弯曲杆菌有害基因flaA的表达。     

热处理对轻度加工葡萄细胞壁组分及相关酶活性的影响

以红地球葡萄为试材，研究了热水与热空气处理对轻度加工葡萄细胞壁水解酶活性的影响。结果表明，热处理可极显著地抑制轻度加工葡萄PG活性的上升，可显著地抑制贮藏后期（60～90天）PE活性；热处理轻度加工葡萄的硬度与PE活性呈显著负相关性，相关系数达到-0．7573，但与PG活性无相关性；轻度加工葡萄在贮藏过程中Cx活性缓慢上升，热处理显著地抑制了Cx活性的上升；热处理葡萄硬度的变化与Cx活性呈极显著负相关，相关系数r达到-0．9289；热处理对果胶含量的影响与对照比较差异不显著。     

基于磁珠和双抗夹心免疫分析的Bt Cry1Ac毒素单链抗体筛选与鉴定

【目的】通过设计并优化生物素-亲和素标记磁珠筛选策略,建立针对Cry1Ac毒素的新型双抗夹心ELISA检测方法,为研究灵敏、快速的Bt毒素的检测方法建立一种新的检测模式。【方法】采用磁珠液相正负筛选方法,经过4轮筛选后,对每轮筛选后抗Cry1Ac毒素特异性结合噬菌体抗体的富集效果进行鉴定,通过单克隆ELISA方法从第4轮筛选得到的次级库中获得特异性结合Cry1Ac的阳性克隆,并对其进行PCR鉴定和DNA测序,确定有完整插入的scFv片段后进行后期相关试验。将相对结合活性最好的阳性克隆scFv-A12替换宿主菌HB2151中进行可溶性诱导表达并纯化。利用纯化后的scFv-A12作为“捕获抗体”,Anti-Cry1Ac兔多克隆抗体作为“检测抗体”,建立针对Cry1Ac的双抗夹心ELISA检测方法。【结果】以生物素化的Cry1Ac蛋白为包被原,利用噬菌体抗体库对其进行了4轮液相筛选。结果显示,相对产出率随着筛选轮数的增加而提高,第4轮较第1轮提高了42倍;单克隆噬菌体ELISA鉴定抗Cry1Ac噬菌体抗体,以试验孔OD450/阴性孔 OD450大于2.1为阳性标准,从第4轮筛选后的培养皿中随机挑选了300个菌落,经单克隆ELISA鉴定出6个阳性克隆,分别命名为hsCry1Ac-C5、hsCry1Ac-D8、hsCry1Ac-C12、hsCry1Ac-A12、hsCry1Ac-F9和hsCry1Ac-F4。其中,hsCry1Ac-A12具有相对较高的亲和力。对上述6个阳性克隆进行菌液PCR检测发现,在935 bp处均有明显的目的条带,通过对其进行测序和氨基酸序列比对,最终得到4株不同氨基酸序列的阳性克隆。hsCry1Ac-A12在成功替换宿主菌HB2151后,经1 mmol•L-1 IPTG诱导表达,于30℃条件下培养过夜。其表达产物经His Trap HP镍亲和柱纯化后SDS-PAGE检测,hsCry1Ac-A12蛋白分子量约为30 kD。通过方阵滴定对抗体浓度进行优化后,利用单链抗体为“捕获抗体”,多抗为“检测抗体”,建立了Cry1Ac双抗夹心ELISA检测方法。在1.25—2.43 μg•mL-1线性检测范围内,线性回归方程为Y=0.2522X+1.2832(R2=0.9564),检测限为1.08 ng•mL-1。【结论】利用磁珠液相筛选方法,建立了针对Cry1Ac毒素的双抗夹心ELISA检测方法,为快速、准确检测转基因食品中Cry1Ac提供了一种新的检测模式。     

采后热处理技术在果蔬贮藏保鲜上的应用

概述了热处理在果蔬贮藏保鲜研究和实践中的应用。研究涉及热处理对果蔬硬度、风味、颜色和失重等贮藏品质的影响,以及对果蔬呼吸强度、乙烯及相关酶、保护酶和蛋白质合成等生理生化的影响,果蔬贮藏保鲜中热处理可以控制果蔬虫害、果蔬采后病害以及减轻果蔬的冷害,提出了热处理在果蔬贮藏保鲜方面的应用前景。     

热水处理对鲜切石榴籽粒贮藏品质、抗氧化能力及微生物变化的影响

以石榴为试材,采用热处理法,研究了不同处理条件对保鲜期间鲜切石榴籽粒贮藏品质、抗氧化能力及微生物变化的影响。结果表明:鲜切石榴籽粒经过40℃10min、45℃6min、50℃4min的热处理,其中50℃4min的热处理能够提高石榴籽粒可溶性固形物含量,减轻石榴籽粒贮藏期间的质量损失,提高石榴籽粒的抗氧化活性,抑制霉菌酵母的生长繁殖,使得石榴籽粒保持较好的感官品质,延缓石榴籽粒的衰老进程。     

石榴采后腐烂病病原菌的分子鉴定

 按照柯赫氏法则对石榴采后腐烂病病原菌进行了分离, 应用PCR技术对分离菌rDNA的内转录间隔区( ITS区) 基因克隆后测序, 并将所测序列提交到欧洲分子生物学实验室核酸数据库( EuropeanMolecular Biology Laboratory Genbank) , 通过Blast程序将该序列与数据库已有的序列进行分析比较, 发现与葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea) 的同源性达到了99%以上, 因此认为石榴腐烂的病原菌是葡萄座腔菌。该菌引起的石榴腐烂病害特征与以往报道的石榴干腐病相似。对葡萄座腔菌的部分生物学特性和侵染循环规律进行了描述。     

短波紫外线处理对“玫瑰香”葡萄采后褐变及相关酶活性的影响

以"玫瑰香"葡萄为试材,研究了在10℃条件下,不同强度短波紫外线(UV-C)照射不同时间对"玫瑰香"葡萄贮藏过程中腐烂率、褐变度、总酚和相关酶活性(PPO、POD)的影响。结果表明:UV-C处理在较低光照强度(0.5×102、1.0×102μW/cm2)下,能够较好地抑制贮藏期葡萄的腐烂和褐变,延缓总酚含量和抗氧化能力的下降;其中光照剂量为1.2kJ/m2(光照强度1.0×102μW/cm2、照射20min)时效果最佳。     

黄瓜采后外源褪黑素处理提高品质和延缓衰老的研究

以采后‘博耐35’黄瓜为试材,研究外源褪黑素浸泡处理对其10℃贮藏期间品质的影响及其机理。结果表明:外源褪黑素处理减缓了黄瓜贮藏过程中叶绿素、维生素C、可滴定酸、可溶性蛋白含量的下降速度,使黄瓜保持了更好的品质。进一步研究得出,外源褪黑素处理降低了黄瓜果实的相对电导率、丙二醛含量、活性氧含量及抗氧化酶(SOD、CAT、POD、APX)活性,降低了对细胞的氧化伤害,并抑制了呼吸速率和乙烯释放量,使细胞保持了更完整的结构,抑制了线粒体和叶绿体的形变。100μmol·L~(-1)的外源褪黑素处理可使黄瓜保持更好的品质,最大程度降低对细胞的氧化伤害,延缓了衰老,达到延长货架期的目的。     

热处理对轻度加工葡萄膜脂过氧化作用的影响

为探索热处理对轻度加工葡萄衰老软化及贮藏保鲜效果的影响，以红地球葡萄为试验材料,研究了50℃ 10 min、50℃ 15 min、 55℃ 5 min、55℃ 10 min热空气处理对其衰老过程中膜脂过氧化作用及贮藏效果的影响。结果表明，55℃ 5 min和10 min处理与对照相比，能抑制过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的下降，降低丙二醛(MDA)含量的积累和果肉组织的相对电导率，从而抑制轻度加工葡萄的衰老软化。而50℃ 10 min和15 min热处理对延缓轻度加工葡萄衰老软化无明显作用。