虾肝肠胞虫水通道蛋白基因 EHP00_492 的克隆与表达特征分析

【目的】克隆虾肝肠胞虫（Enterocytozoon hepatopenaei,EHP）水通道蛋白编码基因 EHP00_492,分析其在 EHP 成熟孢子中的表达特征,为研究 EHP 水通道蛋白的功能提供理论基础。【方法】以虾肝肠胞虫为材料,克隆获得完整的 EHP00_492 基因,对其进行序列特征分析,构建 pCold-TF-EHP00_492 重组表达载体,转化至大肠杆菌中异源表达重组蛋白,制备兔多克隆抗体。利用蛋白免疫印迹实验和间接免疫荧光实验分析 EHP00_492 在 EHP 成熟孢子中的表达定位特征。 【结果】 EHP00_492 的编码基因全长 729 bp,由 242 个氨基酸组成,富含亮氨酸,预测分子量为 25 kD,无信号肽,含有 6 个跨膜结构域,具有 MIP 蛋白家族结构域和 2 个水通道蛋白保守的 NPA/G 基序。此外,EHP00_492 与其他微孢子虫水通道蛋白序列同源性较高,系统进化树分析结果显示,EHP00_492 与毕氏肠胞虫 EBI_27080 蛋白亲缘关系最近。AlphaFold 分析发现,EHP00_492与已鉴定的家蚕微孢子虫水通道蛋白 NbAQP 和兔脑炎微孢子虫水通道蛋白 EcAQP 的蛋白质三维结构高度相似,推测 EHP00_492 是一个潜在的水通道蛋白。蛋白免疫印迹结果显示,EHP00_492 蛋白在 EHP 成熟孢子中有表达,分子量为 21 kD。亚细胞定位分析结果显示,EHP00_492 蛋白定位于 EHP 成熟孢子的孢壁上。【结论】初步明确了 EHP00_492 蛋白的序列特征、结构特征及其与其他微孢子虫水通道蛋白的亲缘关系,以及其在 EHP 成熟孢子中的表达定位特征,可为进一步研究 EHP 水通道蛋白的功能提供基础。     

连作障碍原因分析及防治途径研究

阐述作物连作障碍的定义,从有害微生物增加、土传病害加重和土壤盐类积聚及酸化、植物自毒作用等方面综合分析了连作的主要障碍原因,并在此基础上提出了连作障碍的防治措施。     

空间诱变灵芝的研究

１９９６年１０月利用我国发射的“９６１０２０”返地式卫星搭载的灵芝菌种,经过栽培、形态、生化、发酵、药效等方面的研究,从而筛选出优质高产新菌株卫星灵芝２号,该菌株比对照菌株子实体产量提高７５３％,优级品率达到８８９％,发酵收率平均达到２５７％,纤维素酶活力提高３３％,抑瘤作用差异显著,１６种氨基酸含量均有显著提高。     

食用菌液体菌种在生产和使用中应注意的问题

与固体菌种相比 ,液体菌种具有菌种制作程序简单、生产周期短、发菌快、菌龄整齐、接种方便等优点 ,是食用菌生产发展的方向。本文主要介绍了液体菌种生产的特点、应用领域及存在的问题。     

北方地区温室立体栽培姬菇技术研究

本文利用温室姬菇与蔬菜、葡萄、草莓等立体栽培形式,在常规栽培技术的基础上,提出：立体形式、改变菇畦宽度、切割料体、提早放风等四项技术关键,摸索出一整套适合北方地区规范化高产栽培模式,生物学效率高达２００％～２５０％,经济效益是单一生产蔬菜的４～６倍。     

阿魏酸钠对人大肠癌Moser细胞和乳腺癌MCT7细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究大肠癌 Moser 细胞和乳腺癌 MCF7细胞对市售4种中药制剂(斑蟊酸钠、苦参素、华蟾素和阿魏酸钠)的敏感性,以及阿魏酸钠影响大肠癌细胞增殖的可能机理。方法:采用 MTT 法测定药物对细胞增殖的抑制率和药物间的协同抑制作用;酶联免疫法检测 CEA 表达水平;流式细胞法测定细胞周期。结果:4种中药对乳腺癌 MCF7细胞的增殖均有不同程度的抑制作用,但只有阿魏酸钠可明显抑制大肠癌Moser 细胞的增殖;阿魏酸钠与5种化疗药物联合对 Moser 细胞有协同作用;阿魏酸钠对 Moser 细胞表达CEA 没有影响;阿魏酸钠可诱导 Moser 细胞凋亡。结论:斑蟊酸钠、苦参素和华蟾素对不同肿瘤细胞的抑制效果差异很大;阿魏酸钠不仅有抑制肿瘤细胞增殖的作用,还与化疗药物有协同效果;阿魏酸钠抑制 Moser 细胞增殖的机理似与转化生长因子信号传导途径无关。