柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法的建立及应用

以柑橘溃疡病菌特异性高的假定蛋白基因（登录号：AE008923.1）为靶标，设计并筛选4条引物来特异性识别靶标序列中的6个独立区域，建立柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法。该方法利用实时浊度仪检测反应过程中产生的焦磷酸镁白色沉淀，实现对LAMP整个反应过程的实时监控。从镁离子浓度、甜菜碱浓度、dNTPs浓度、引物浓度和反应温度5个变量参数对 LAMP检测体系进行优化，并对方法的特异性、灵敏度、稳定性及实际样品检测效果进行评价。结果显示，该体系经优化后稳定性良好，可在66 ℃ 恒温条件下，60 min内完成检测；DNA检测下限可达0.02 ng/μL，灵敏度与荧光定量PCR方法相同，比常规PCR方法高1个数量级；能快速、准确地对田间疑似样品进行检测，与荧光定量PCR方法的检出情况一致，没有漏检。结果说明柑橘溃疡病菌实时浊度LAMP检测方法操作简便、所需时间短，特异性与灵敏度高，为柑橘溃疡病菌的快速筛查提供较好的途径。     

基于ITS2条形码的人参属物种鉴定研究

人参属植物种类繁多,多数具有重要的生物学及药用价值。采用植物DNA条形码候选序列之一的ITS2片段鉴定人参属药用植物。结果表明,ITS2基因区通用性强,序列在人参属物种间差异较大,属内变异位点为41个,保守位点189个,种内遗传距离为0~0.004,种间遗传距离为0.006~0.098,平均遗传距离为0.044。基于K2P模型构建的系统发育树(NJ树)显示,同一物种均聚为一类。因此,ITS2作为DNA条形码能够有效地区别人参属物种,为人参属药材及其伪混品的鉴定提供基础。     

喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立

为寻求喀斯特炭疽菌的快速检测方法,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以喀斯特炭疽菌基因组中的ACT基因为靶序列设计并筛选特异性引物探针,通过特异性、灵敏度、重复性试验建立喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明:建立方法的特异性较强、灵敏度较高、重复性稳定性较好,最低检测限为0.2pg DNA/反应,标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.998。该方法操作简便,可用于进出境口岸喀斯特炭疽菌的检疫。     

氨基寡糖素对番茄青枯病防治作用

用氨基寡糖素对番茄青枯病进行防治试验,结果表明在NA平板上,氨基寡糖素400倍及以下的浓度能够完全抑制番茄青枯菌的生长;测定其对番茄青枯菌的最小抑制浓度为500倍。温室控病试验表明,用灌根、浸根后喷雾和灌根并喷雾3种方法处理时,灌根并喷雾的防治方法比其他2种的防效好。利用该方法,氨基寡糖素200倍溶液防治番茄青枯病21d时的相对防效仍能达到51．72％。     

氨基寡糖素对番茄青枯病防治作用

用氨基寡糖素对番茄青枯病进行防治试验,结果表明在NA平板上,氨基寡糖素400倍及以下的浓度能够完全抑制番茄青枯菌的生长;测定其对番茄青枯菌的最小抑制浓度为500倍.温室控病试验表明,用灌根、浸根后喷雾和灌根并喷雾3种方法处理时,灌根并喷雾的防治方法比其他2种的防效好.利用该方法,氨基寡糖素200倍溶液防治番茄青枯病21 d时的相对防效仍能达到51.72%.     

警惕危险害虫庭园象甲入侵我国

庭园象甲(Phlyctinus callosus)是一种能对水果、观赏植物造成严重危害的害虫,原产南非,现已传播到新西兰和澳大利亚等地,我国尚无分布记录。庭院象甲寄主广,适应性强,为害具有较高的隐蔽性,有较大的入侵风险。本文对庭园象甲的分类地位、寄主、分布、形态特征、为害特点、生物学特性、防控措施等进行了详细介绍,为口岸检疫及防控提供参考。     

番茄主要病害的识别与无公害防治

番茄(Lycopersicon esculentum Mill)分类上归茄科、番茄属,以其果实供食,是我国最主要的蔬菜之一,也是"南菜北运"的主要菜种.近年来,随着农业产业结构调整,"菜篮子"工程的实施,全国番茄的种植面积不断增加,番茄病害给生产造成的损失也不断增加.由于农药使用的不规范,局部产区农药的残留严重超标,已影响到番茄产业的健康可持续发展.为此,农业部从2001年起在全国开展了"无公害食品行动计划",其中无公害蔬菜的生产是一项重要内容.     

几种苋属杂草的鉴定与分析

重庆口岸近3年截获数据及当地调查显示,长芒苋等苋属超级农田杂草已在重庆几个重要口岸出现。基于此,对为害较严重的长芒苋、糙果苋、皱果苋等进行形态鉴定,并初步探索苋属杂草DNA条形码分子鉴定方法。     

五倍子蜂蜜TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立

为五倍子蜂蜜的鉴定检测提供技术支撑,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以五倍子树基因组中ITS基因为靶序列,设计并筛选出特异性引物探针,通过特异性、灵敏度和重复性等试验,建立五倍子蜂蜜TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明:建立的方法特异性良好,生成的标准曲线有良好的线性关系,相关系数(R2)为0.998,最低检测限为0.2pg DNA/反应。该方法特异性强、灵敏度高、结果可靠。     

锈赤扁谷盗触角感器的扫描电镜观察

利用扫描电镜对锈赤扁谷盗触角感器进行观察,发现其触角由柄节、梗节和鞭节组成,鞭节分9个亚节。雄虫触角各节均显著长于雌虫,而直径除鞭节5、7、8、9四节外,其余各节均显著大于雌虫。成虫触角感器主要有刺形感器、毛形感器和Bhm氏鬃毛3种主要类型。其中,刺形感器具有4种形态,主要分布于鞭节第7、8、9节,毛形感器有2种形态,毛形感器Ⅰ各节都有分布,毛形感器Ⅱ仅有1根,位于柄节腹面,Bhm氏鬃毛主要分布于柄节与梗节连接处。雌、雄虫感器的类型、分布无明显差异,雄虫感器密度略大于雌虫。结合感受器的形态、分布和已报道的触角电位反应数据,对各感受器的功能进行了推测。