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1.
草鱼病原菌AvX005的分离鉴定及其拮抗菌筛选研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
2016年4—7月,湖南望城乔口渔场爆发了较大范围的草鱼疾病,自爆发病的草鱼病变组织中进行细菌分离与培养,分离得到一株优势菌,回复感染试验测定,该菌株具有较强的致病性。经菌落形态观察、冷场扫描电镜观察、生理生化试验及16SrDNA基因序列同源性分析,鉴定为维氏气单胞菌,编号为AvX005(GenBank登录号:KU64116.1),在此基础上以维氏气单胞菌AvX005为指示菌,通过点种法和纸片扩散法筛选拮抗菌,拮抗试验发现新筛选的解淀粉芽孢杆菌对维氏气单胞菌AvX005有较好的拮抗效果,采用酸沉淀、C18反相柱色谱分离到抑菌活性物,LC-MS/MS鉴定分子量为1045.29。根据抑菌活性物的理化性质,初步确定解淀粉芽孢杆菌产生的抑菌活性物可能为脂肽类化合物。该研究不仅可为快捷、准确检测由维氏气单胞菌引起的鱼类疾病提供参考及填补国内维氏气单胞菌拮抗菌在分类地位、生物学特性等方面的不足,而且也为我国草鱼维氏气单胞菌病的生物防治提供科学资料。  相似文献   
2.
聚磷酸激酶基因(Polyphosphate kinase gene,ppk)是放线霉菌中的一种影响抗生素合成的全局性负调控因子,阻断该基因能显著提高其次级代谢产物产量。本文利用PCR扩增了刺糖多孢菌中的ppk基因中间片段,经酶切连接技术将其克隆到大肠杆菌-链霉菌穿梭载体pOJ260上,构建阻断型载体pOJ260-ppk;通过接合转移将该功能质粒导入刺糖多孢菌中,获得了遗传性能稳定的重组菌株S.sp-△ppk。对工程菌株的PCR检测结果显示,ppk基因片段已整合到刺糖多孢菌染色体上并成功阻断了该基因的表达。摇瓶发酵结果显示,工程菌株多杀菌素产量较原始菌株提高了122%。阻断聚磷酸激酶基因的表达对刺糖多孢菌的菌丝形态及生长发育产生了影响,并有效地促进该菌多杀菌素的生物合成。  相似文献   
3.
4.
为研究黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1, AFB1)对黄颡鱼幼鱼生长、肠道消化酶及肝脏功能的影响,用添加不同梯度黄曲霉毒素B1(AFB1)(0、50、100和200μg/kg)的4种等氮等脂配合饲料饲喂初始体质量为(6.00±0.10) g的黄颡鱼幼鱼8周。结果显示:(1)饲料中添加AFB1对黄颡鱼幼鱼的存活率、饲料系数和特定生长率等均无显著影响,但使胰蛋白酶活性显著提高,而高含量AFB1(100和200μg/kg)显著降低肠道淀粉酶和脂肪酶活性;(2)随着AFB1添加量的上升,血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性及葡萄糖、甘油三酯、总胆汁酸和总胆固醇含量显著升高,肝脏中谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性显著下降;(3) AFB1添加组的肝脏过氧化氢酶活性和丙二醛含量显著高于对照组,100和200μg/kg AFB1组超氧化物歧化酶活性显著高于对照组,其余各组无显著差异;(4) AFB1添加组肝脏sod基因及炎性因子il-1β基因的相对表达量显著上调,200μg/kg AFB1组cat基因及炎性因子il-8、il-10相对表达量显著上调;(5)通过组织学观察,AFB1会引起部分肝细胞出现轻微萎缩、肝细胞核移位、细胞界限模糊和肝细胞内空泡化的现象。研究表明,在本实验条件下,饲料中AFB1含量低于200μg/kg不影响黄颡鱼幼鱼生长性能,但饲料中AFB1≥50μg/kg时会影响黄颡鱼幼鱼肠道的消化吸收功能,同时引起肝脏氧化应激及炎性反应,造成肝脏功能损伤。  相似文献   
5.
我国微生物农药的研究应用现状与前景   总被引:3,自引:0,他引:3       下载免费PDF全文
近年来我国高度重视安全型生物农药的研究和应用,生物农药年产值不断攀升,应用范围越来越广,创造了巨大的经济效益和社会效益.微生物农药是生物农药的主要组成部分,也是生物农药研究应用的主要方向.安全型生物农药代替有残留化学农药,高效的基因工程产品代替天然生物制剂将是未来农药市场发展的趋势.  相似文献   
6.
增产菌是从蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus),中分离筛的能促进作物增产的益苗。本项研究通过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G—75凝胶过滤和DE—52柱层折,对增产菌83—10菌株的超氧化物歧化酶(SOD)进行了纯化,经电泳检测、原子含量测定和抑制性试验鉴定,获得了达到均一程度的Fe—SOD,其比活为2251.5U/mg。该酶在紫外光区的吸收峰为280nm,测得该酶的亚基分子量和分子量为20500和41000道尔顿,並分析了该酶亚基的氨基酸组成。文中讨论了增产菌SOD对作物的保健作用。  相似文献   
7.
8.
苏云金杆菌高毒力菌株4.0718的快速选育   总被引:16,自引:0,他引:16  
从湖南省不同生态区域的旱作地,果园和稻园采集的858份土样中,分离筛选出苏云金杆菌30株。选取一株具典型苏云金杆菌菌落特征和较高杀虫毒力的菌株701^2c为出发菌株,经紫外线和两次亚硝基胍的交替复合诱变,显微涂片染色镜检,发现菌体的伴孢晶体的形状、大小、数量及芽孢与伴孢晶体的比例与杀虫菌株4.0718。该突变株杀虫毒力与原始菌株相比提高了7.5倍,在6、12和24h内供试小菜蛾三龄幼虫死亡率分别高达20%、97%和100%。此菌株的高效速效杀虫毒力经连续10代培养能稳定遗传。  相似文献   
9.
苏云金芽孢杆菌对多种昆虫具有特异毒杀作用,虽然对其作用机理有了一定的了解,但对昆虫随之出现的抗性研究还很不深入。利用秀丽隐杆线虫这种模式动物并结合基因芯片技术和基因组学研究,为详细了解苏云金芽孢杆菌毒素的作用机理、昆虫对毒素的抗性机理和研究更加高效的生物杀虫制剂提供了新的思路。  相似文献   
10.
苏云金芽孢杆菌4.0718菌株晶体毒素性质的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
以苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)4.0718菌株伴孢晶体65kD原毒素为材料,比较了几种染色-脱色方法对电洗脱回收蛋白的影响。蛋白纯化的步骤包括SDS-PAGE分离、采用自制蛋白回收装置电洗脱回收杀虫晶体蛋白及抗胰蛋白酶核心多肽、超滤法脱盐、冷丙酮沉淀法除去考马斯亮蓝及SDS。经SDS—PAGE检测,呈现出均一的蛋白带,回收蛋白达到了电泳纯。以双向凝胶电泳(2-DE)技术分析了苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种HD—1和4.0718菌株伴孢晶体内的蛋白质组分。结果表明,两者相互匹配的蛋白点有54个,HD—1菌株的130kD亚基有2个点,其等电点在5.25~5.75之间,65kD亚基在等电点3.4~8.3之间具有广泛的分布,130与65kD之间的亚基的等电点集中在3.5~4.2之间,65kD以下亚基的等电点集中在3.5~6.2之间;4.0718菌株的130kD亚基仅有1个点,65kD亚基的蛋白点比HD-1菌株更多,130与65kD之间的亚基、65kD以下的亚基蛋白点均比HD-1菌株多且等电点分布范围更广。  相似文献   
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