白细胞介素-1α调节仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的机制

本实验利用体外培养的２～３周龄仔猪睾丸间质细胞，研究了ＩＬ１α调节间质细胞睾酮分泌的机制。结果表明，ＩＬ１α能抑制ｈＣＧ刺激间质细胞分泌睾酮，其睾酮产生量随ＩＬ１α剂量增大（０～１００μ／ｍｌ）及刺激时间延长（０～４８ｈ）而下降。用２０μ／ｍｌ和５０μ／ｍｌ的ＩＬ１α刺激４８ｈ，可分别抑制６０％和６５％的睾酮产生。ＩＬ１α同样抑制ｃＡＭＰ（３μｍｏｌ／ｍｌ）诱导的间质细胞睾酮的分泌，但不影响ｈＣＧ与间质细胞膜受体的结合量及ｈＣＧ诱导的第二信使ｃＡＭＰ的增加。说明ＩＬ１α抑制ｈＣＧ促睾酮分泌的作用，其抑制点不在ｈＣＧ与受体的结合及第二信使ｃＡＭＰ的聚集上，而在ｃＡＭＰ产生之后的某个环节。     

新生仔猪不同阶段睾丸间质细胞增殖数量及其超微结构变化

对１～４周龄仔猪睾丸间质细胞的形态学发育过程进行了光镜和电镜观察。结果：（１）随仔猪年龄增长，间质细胞总数明显增多，３周龄时达到高峰，４周龄时出现下降趋势，间质细胞密度随细胞总数增多而逐渐增加。周围曲细精管逐渐发育成形，至３周龄时与间质组织界限已渐明确；（２）随仔猪日龄的增长，间质细胞内线粒体、滑面内质网、粗面内质网、高尔基复合体和胞浆内膜性分泌小泡的数量显著增多，至３周龄时细胞内出现黑色内噬体。生后３周内，间质细胞核由梭状变为圆形，由小变大，核膜平展，核内质饱满；核仁着色加深，体积增大，显示了较强的基因转录和蛋白质合成的功能。结果表明，仔猪出生后体内雄激素的水平会出现一个新的高峰，其性分化的过程大约需要３周时间。     

小鼠胚胎卵巢体外无血清培养体系的建立

调节原始卵泡形成、起始生长的信号目前仍知之甚少.一个重要的原因就是缺乏一个良好的研究模型.我们以妊娠13 d昆明白小鼠胚胎卵巢为研究对象,在5 d的贴壁培养后分别用FBS培养液和ITS培养液继续培养共计21 d,探讨在不同培养条件下胚胎卵巢卵泡发育和内分泌功能的差异.结果发现在以ITS、BSA和胎球蛋白为血清替代物的无血清培养体系中小鼠胚胎卵巢卵泡发育要优于其在含2 % FBS的培养体系中的发育状况.两种培养条件下胚胎卵巢睾酮的分泌水平相当(P>0.05),但在FBS处理组培养液中可以检测到少量雌二醇,而ITS处理组培养液中检测不到雌二醇.结果提示:①妊娠13 d的小鼠胚胎卵巢体外培养至一定阶段即具备了合成睾酮的能力,并且在血清中存在的某些未知刺激因素的作用下胚胎卵巢可以获得将睾酮转化成雌二醇的能力;②所建立的以ITS、BSA和胎球蛋白为血清替代物的无血清培养体系更适于小鼠胚胎卵巢卵泡的体外生长、发育.这为日后进一步研究促性腺激素、生长因子、细胞因子等对胚胎卵巢卵泡发育和类固醇激素发生的精确作用提供了一个良好的研究模型.     

测定多种动物血清中LH生物活性RRA法的应用

利用已建立的可测定多种动物血清中促黄体激素 ( LH)生物学活性的 LH-RRA法 ,检测了不同生理状态下的 LH分泌量 ,进一步分析了该 RRA法在实践应用中的可靠性。通过用特异性刺激 LH分泌的 LRH-A3注射动物和诱导体外培养的垂体细胞分泌 LH的试验表明 ,该方法具有很高的特异性和可靠性。结果显示 ,雄兔对于 LRH-A3刺激有特异性反应。 2只兔前后、不同兔同时的对照试验表明 ,该 RRA法可以特异性地检测出 LRH-A3引起的 LH特异性变化。对母猪发情至早期妊娠阶段血清中 LH检测结果表明 ,此 RRA法可有效地测定出猪血清中 LH的动态变化。利用绵羊垂体细胞体外培养模型 ,分别用不同剂量的 LRH-A3( 0、1、1 0、1 0 0、1 0 0 0 ng/孔 )诱导垂体细胞合成和分泌 LH,RRA测定结果表明 ,试验组 LH含量分别比对照组增加 1 .77、1 .78、2 .0 3和 1 .4 6倍 ( P <0 .0 1 ) ,呈现剂量依赖关系。以上结果表明 ,建立的 LH-h CG的 RRA可以替代 RIA和体外生物测定法     

雌二醇和孕酮对山羊子宫雌二醇受体的调节

将１２只卵巢摘除山羊随机分为４组，用孕酮（Ｐ＿４）和雌二醇（Ｅ＿２）按２×２因子实验进行发情周期的人工模拟，然后测定子宫内膜胞浆中的Ｅ＿２受体（ＲＥ＿２），Ｐ４组、空白组、Ｐ＿４＋Ｅ＿２组和Ｅ＿２组的ＲＥ＿２水平分别为８．９，１８．３，３３．８和６７．９ｆｍｏｌ·ｍｇ￣（－１）．除空白组与Ｐ＿４＋Ｅ＿２组之间ＲＥ＿２水平的差异显著外（Ｐ＜０．０５），其余组之间均为极显著（Ｐ＜０．０１）。结果表明，山羊子宫内膜胞浆ＲＥ＿２水平处于Ｐ＿４和Ｅ＿２的共同调节之中，Ｐ＿４具有极显著的降调节作用，而Ｅ＿２则具有极显著的升调节作用。     

PGL3-insulin Luciferase质粒的构建与功能鉴定

糖尿病是一种由于胰岛素分泌绝对或相对不足而导致的以高血糖为特征的全球性疾病。近年来随着基因重组和基因转移技术的迅速发展,基因研究成为研究糖尿病发病机理的一条新途径。用质粒PGL3-Basic作为载体,将胰岛素2启动子(insulinⅡpromoter)插入其中,构建带有荧光素酶报告基因的质粒,转染入胰岛β细胞MIN6中进行葡萄糖诱导试验,以利用双荧光素酶报告基因系统检测胰岛素分泌情况。结果表明,葡萄糖浓度依赖性的诱导胰岛素报告基因的表达。该灵敏的胰岛素报告基因载体的成功构建,为研究胰岛素的分泌提供了一个有力的工具,有利于糖尿病等疾病的研究和治疗。     

促减数分裂甾醇(MAS)在附助生殖生物学中的作用及应用前景

促减数分裂甾醇（Ｍｅｉｏｓｉｓ－ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ Ｓｔｅｒｏｌｓ,ＭＡＳ）是近年来新发现的能够促进哺乳动物生殖细胞减数分裂恢复的物质。其中,来自人卵泡液的ＦＦ－ＭＡＳ和来自牛睾丸组织Ｔ－ＭＡＳ能诱导体外培养的小鼠卵母细胞减数分裂的恢复,可能在促性腺激素调控配子的成熟过程中扮演重要的生理性角色。本文结合我们的研究结果,就ＭＡＳ在性腺的合成及分布、与卵母细胞减数分裂恢复及精子形成的关系以及ＭＡＳ在     

白细胞介素—1与不育

在造成人和动物不育的诸多因素中，免疫因素较为突出，ＩＬ－１是介导机体免疫功能的主要细胞因子，在感染，发热，肿瘤，组织修复等病理过程中，浓度特异性升高，促进分泌免疫活性淋巴因子，发挥重要的作用。同时它还是一种生殖关联性蛋白，与两种受体及受体拮抗剂组成ＩＬ－１作用系统，广泛存在于垂体，子宫，睾丸，卵巢等生殖器官。体内外研究表明，正常和异常状态下，ＩＬ－１对促性腺激素的调控，配子的产生，受精，早期胚胎的