NO合酶抑制剂 L-NAME和NO前体L-Arg对小鼠体内卵母细胞成熟的影响

摘要: 采用腹腔单独注射L-NAME(左旋硝基精氨酸甲基酯)或联合注射L-NAME和L-Arg, 取出卵母细胞体外观察，研究了NO对小鼠卵母细胞体内成熟的影响。结果表明,（1）单独注射5、10、20 mg / kg体重L-NAME均能显著抑制卵母细胞第一极体的释放(P <0.01)，尤以10 mg / kg 体重L-NAME组作用最为明显, 各剂量组对生发泡的破裂均无影响(P >0.05)；（2）10 mg / kg 体重L-NAME对卵母细胞成熟的抑制作用能被同时注射的100 mg / kg 或200 mg /kg 体重L-Arg逆转，其中以200 mg / kg体重作用最为明显;（3）L-NAME对卵母细胞畸形率的影响和培养时间有关，而对卵母细胞的存活率没有统计学影响。实验结果证明NO参与了小鼠卵母细胞的体内成熟调控。     

cGMP参与NO对小鼠胚泡黏附扩展及MMP-2分泌的调节

有报道显示，一氧化氮(NO)在哺乳动物胚胎植入过程中发挥重要的调节作用，为探讨其作用机制，应用胚胎植入的体外模型，将常规方法获取的胚泡随机培养在含有不同药物处理的培养液中，在培养12，24和36h后分别观察、统计胚泡黏附及扩展的情况，同时收集培养液，用明胶酶谱分析其中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的变化，用半定量RT-PCR分析各组胚泡中MMP-2mRNA的变化．结果表明，500μmol／L L-单甲基．精氨酸(L-NMMA)单独处理能显著抑制胚泡的黏附、扩展及MMP-2的分泌；此抑制不仅可被同时加入的100umol／L S-亚硝基．乙酰青霉胺(SNAP)逆转；也可被同时加入的20μmol／L的8-Br-cGMP逆转．结果提示，NO能促进体外小鼠胚泡的黏附、扩展及MMP-2的分泌，NO的这些作用是通过cGMP来实现的。     

3种磷酸二酯酶对小鼠卵母细胞自发成熟的影响

为探讨和比较磷酸二酯酶(PDE)3、4和5对小鼠卵母细胞体外自发成熟的影响,将小鼠卵丘卵母细胞复合体(COCs)和裸卵(DOs)分别培养在含有或不含有PDE 3、4和5特异性抑制剂的M-199培养液中。结果表明:PDE3的特异性抑制剂cilostamide和PDE5的特异性抑制剂zaprinast均能显著抑制小鼠COCs和DOs的自发成熟,且其抑制效应不随培养时间的延长而减弱,但却是可逆的;而PDE4的特异性抑制剂rolipram对小鼠COCs和DOs没有影响。上述结果提示,不同亚型的PDE在小鼠卵母细胞减数分裂过程中具有不同的调节作用。