巴斯德毕赤酵母表达系统及其在饲料添加剂开发上的应用前景

经过近15年来的不断开发和完善,巴斯德毕赤酵母已经成为目前最成功的酵母表达系统之一。由于该酵母具有高水平表达的潜力和能进行高密度发酵,它的大规模发酵可用于生产多种新的蛋白。一些生长激素、酶、抗菌肽在毕赤酵母中的成功表达展示了该表达系统在饲料添加剂开发上的广阔应用前景。     

黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的响应面优化设计及其酶学性质的研究

本研究采用响应面法的中心组合对影响黑曲霉(aspergillus niger JL 15)固体发酵产木聚糖酶的条件进行了优化.以橘皮粉为基质,补充碳源、氮源,以及含水量和发酵时间对木聚糖酶产量具有显著影响(P<0.05).模拟二次多项式回归预测模型,并建立自变量与响应值的回归方程,获得各因素的最佳水平,即:甘油、硫酸铵的添加量分别为4.2%和3.1%,含水量为61%,发酵时间为73.4 h,木聚糖酶活性最大预测值达922.9 U/g干发酵产物,验证值为917.7 U/g干发酵产物,高出基础培养基酶活3.2倍.酶学性质分析研究表明,黑曲霉木聚糖酶(XylA)的最适温度和最适pH分别为55oC和pH 5.0.XylA的K_m和V_(max)值分别为9.24 mg/mL和54.05 μmol/min/mL.Mn~(2+)、Zn~(2+)和斗和Mg~(2+)对XylA活性具有促进作用,而Fe~(3+)和cu~(2+)对XylA活性具有明显抑制作用.HPLC分析结果表明,XylA的水解桦木木聚糖和麸皮不溶性木聚糖的产物均为木糖至木六糖,主要产物为木三糖.     

烟曲霉植酸酶的酶学特性研究

对烟曲霉植酸酶的酶学特性进行了研究.结果表明,其最适反应温度为60℃,最适pH为5.0;液态酶在70℃处理5 min,残余酶活为69.12%;在4℃保存2个月,残余酶活为90%;不同金属离子和螯合剂对酶活性的影响存在差异,Fe3 ,Mg2 对该植酸酶有较强的激活作用, 而Zn2 ,Co2 ,Cu2 和EDTA有较强的抑制作用,Ca2 ,Fe2 和Mn2 等对其则无明显影响.     

木聚糖酶TAXI型抑制蛋白的研究进展

木聚糖酶是一种重要的半纤维素酶,广泛用于饲料工业。近年来在小麦中发现一类能抑制木聚糖酶活性的蛋白,这类抑制蛋白可能会对木聚糖酶的应用效果产生影响。目前发现在不同的谷物中共存在2种类型的木聚糖酶抑制蛋白,根据其结构的不同,分为TAXI型(triticum aestivum xylanase inhibitor)和XIP型(xylanase inhibi-tor protein)。本文主要简述了TAXI型抑制蛋白的分子结构、抑制特性和活性影响因素等方面的研究进展,对于深入研究木聚糖酶及其活性影响因子,充分开发利用我国饲料资源和促进畜牧业生产可持续发展具有重要现实意义。     

猪乳铁蛋白基因克隆及其在P.methanolica系统中的表达研究

为了研究猪乳铁蛋白(PLF)基因克隆及其在酵母(P.methanolica)系统中的表达,试验从泌乳15 d的约克夏母猪乳腺组织中提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增猪乳铁蛋白基因,获得1条长为2 115 bp的目的片段,将目的基因克隆到酵母表达载体pMET-B中,采用电转化法转化P.methanoli-ca感受态细胞PMAD11;选取Ade+MutS重组子进行诱导培养,产物纯化后进行SDS-PAGE和West-ern-blot分析及其他生物学特性分析。结果表明:rPLF在P.methanolica表达系统中表达,表达产物的分子质量约为78.0 ku;在第144小时时表达量最高,最佳pH值为7.0,最佳铁离子浓度为100μmol/L;重组PLF对大肠杆菌ATCC25922有抑菌效果,而且抑菌效果随着浓度的升高随之增强。     

影响大肠杆菌中外源基因表达的因素

大肠杆菌由于遗传背景简单，可进行大规模发酵培养，表达周期短，操作简单及已有大量可供选择利用的载体，而成为人们克隆与表达外源基因的首选。但在外源基因的表达过程中，常常会遇到表达效率不高和产率较低等困难。以往的研究表明，影响外源基因表达效率的因素主要有密码子的选用、目的基因的量、载体的选择、宿主菌的培养控制等。     

重组毕赤酵母产木聚糖酶条件的优化

对基因工程菌Pichia pastoris GS115-ATx在摇瓶发酵水平产木聚糖酶条件进行了优化.结果表明,该基因工程菌产木聚糖酶的最佳碳源为麸皮,最佳氮源为牛肉膏,有机氮源促进产酶的效果优于无机氮源.GS115-ATx产木聚糖的最佳甲醇诱导浓度为0.5%,在甲醇诱导的同时补加0.5%甘油能显著提高木聚糖酶的活性.研究发现,吐温20、吐温80、甜菜碱等表面活性剂均具有促进基因工程菌GS115-ATx产木聚糖酶的作用,其中甜菜碱的作用效果较佳.经SDS-PAGE电泳分析,GS115-ATx产生木聚糖酶的分子量约为19.0 kDa.发酵液上清中的木聚糖酶活性在甲醇诱导培养96 h后达到最大值.     

Leptin的生物学功能及其对脂肪沉积的调控作用

Leptin（瘦素）是肥胖基因ob基因的表达产物,由脂肪细胞分泌,与下丘脑Leptin受体结合,可抑制食欲中枢,减少进食量,并通过兴奋交感神经系统,促进脂肪分解,增加产热,从而发挥降低体重,提高瘦肉率的功能。对Leptin的生物学功能及其对脂肪沉积的调控作用进行综述,以期为营养上调控畜禽肉品质,以及生产优质畜禽产品提供理论依据和科研基础。     

鲜油坊市场、投资、利润分析

一、市场分析 随着百姓健康意识的增强,人们正在逐步改变传统的膳食结构,纯天然植物油越来越成为受大众欢迎的"绿色"食品.开家现榨现卖的鲜油坊,正顺应这一生活新趋势.让人们亲眼目睹店家用油菜子、花生仁榨出营养丰富、口感醇正的食用植物油,而且榨油的全过程公开透明,人们肯定会放心地购买.     

不同紫花苜蓿品种生产性能比较试验

紫花苜蓿是豆科多年生牧草,可利用5年,第二、三年产量最高。其特点是:一般牧草产量60 0 0 0～90 0 0 0kg/hm2 ,茎叶干物质中粗蛋白质含量高达2 0 %,并且氨基酸种类齐全,必需氨基酸含量丰富,还含有多种维生素和矿物质,是牛、羊、猪等的优质饲料(王成章,1 998)。本试验目的在于通