α-SMA与TGF-β1在大鼠肝纤维化中的表达及相互关系

为明确α-SMA和TGF-β1在肝脏纤维化过程中的作用和相互关系,研究首先利用CCl4腹腔注射的方法建立肝脏纤维化大鼠模型,通过组织学、免疫组织化学及蛋白组学方法检测肝脏纤维化过程中病理组织结构变化、α-SMA和TGF-β1的表达情况。结果显示肝脏纤维化模型造模成功,肝脏组织呈现明显纤维化病变特征,α-SMA和TGF-β1的表达呈阳性,且与肝脏纤维化程度呈正相关。α-SMA和TGF-β1是肝脏纤维化过程中的重要细胞因子,能够促进肝脏纤维化的形成,并可能协同参与。     

肝脏纤维化复合模型的改良及病理组织学评价

为了建立完善、快速、高效肝脏纤维化动物模型,试验采用乙醇灌胃、高脂饲料喂养、高糖饮水等复合因素,并结合腹腔注射CCl_4建立大鼠肝脏纤维化模型,并对肝脏纤维化形成病变和相关指标进行评价。结果表明:复合因素的改良能够促进大鼠肝脏纤维化的形成,造模8周大鼠肝脏细胞变性坏死,汇管区和肝小叶间纤维组织增生,可见胶原纤维沉积,形成典型肝脏纤维化的假小叶病变;大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、伽马谷氨酰胺转肽酶、白蛋白、总蛋白、胆固醇水平与对照组比较差异显著;与纤维化形成密切相关的转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白表达均呈阳性反应。说明试验建立的肝脏纤维化改良方法成功率高,形成时间短,模型稳定。     

间歇性冷刺激对高脂饮食小鼠的血清脂质相关指标、肝脏组织形态及肝脏脂质合成相关基因和蛋白表达的影响

为了探究间歇性冷刺激对高脂饮食小鼠血清脂质相关指标、肝脏组织形态以及肝脏脂质合成的影响，试验选择5周龄的雄性C57BL/6小鼠48只，随机分为常温对照组、常温高脂组、冷刺激组和冷刺激高脂组，每组3个重复，每个重复4只。常温组小鼠饲养温度为（26±2）℃，冷刺激组小鼠饲养温度为4℃，试验期30 d（每天6 h）。处理结束后采集各组小鼠的肝脏组织和血清样本，通过苏木素-伊红（HE）染色、蛋白质免疫印迹（Western blot）、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)等方法，对小鼠肝脏形态结构和脂质合成相关指标进行检测。结果显示：1）饲喂高脂饲粮的小鼠在14周时，体重极显著高于常温对照组（P<0.01）。2) HE结果表明，常温对照组小鼠肝脏肝小叶结构清晰，肝索排列规则有序，未见水肿变性和坏死，未见炎细胞；冷刺激组小鼠的肝脏组织出现颗粒变性，炎性细胞浸润，并观察到充血和出血现象；常温高脂组小鼠肝脏可见大小不一的圆形空泡，发生大泡性脂肪变；冷刺激高脂组小鼠肝脏肝小叶排列紊乱，肝细胞水肿可见空泡变性，炎性细胞浸润。3）小鼠高脂造模后，常温高脂组小鼠血清中血脂相关指标甘油三酯（TG）、游离脂...