杜仲EuGT2基因的原核表达及蛋白纯化

本研究以克隆所得杜仲(Eucommia ulmoides)EuGT2基因为基础,利用基因重组技术构建原核表达载体pMCSG19-EuGT2。重组载体转化到E.coli Rosetta(DE3)中,用0.05 mmol/L异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在37℃下诱导6 h。使用镍-亚氨基二乙酸(Ni-IDA)亲和层析柱进行纯化,并用15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳进行检测。研究结果表明,杜仲EuGT2基因在E.coli Rosetta(DE3)中得到成功表达,重组蛋白表达形式为部分包涵体、部分可溶性蛋白。经SDS-PAGE凝胶电泳检测,在相对分子质量约56 kD处有1条特异性蛋白条带,经质谱鉴定该特异性蛋白条带确为杜仲EuGT2蛋白。以上研究结果为后续研究杜仲糖基转移酶的功能提供了科学依据。     

黄芪多糖对大肠埃希菌侵入肠上皮细胞的保护研究

采用CaCo2细胞单层肠上皮系统感染模型,将5×10-5mmol/L,1×10-4mmol/L和2×10-4mmol/L 3种不同浓度的黄芪多糖及不含黄芪多糖DMEM细胞培养液分别加入已平铺于培养板的CaCo2细胞单层系统中与定量的大肠埃希菌混合培养,观察侵入细胞的大肠埃希菌量。结果黄芪多糖浓度为5×10-5,1×10-4mmol/L和2×10-4mmol/L,处理的CaCo2细胞液的细菌培养数量分别为252.5个±54.5个,240.8个±44.2个和292.7个±71.3个,而对照组为598.8个±114.8个,显示黄芪多糖能显著减少大肠埃希菌进入上皮细胞的数量,增强肠黏膜的屏障功能。     

野猪资源的开发与利用

野猪在动物分类学上属偶蹄目，猪科，猪属，是家猪的祖先。世界上的野猪分为欧洲野猪和亚洲野猪，野猪的染色体数(2n)在36～38之间，彼此间没有繁殖障碍。我国主要有华南野猪、台湾野猪、华北野猪、东北白胸野猪和矮野猪等亚种分布，形成了极为丰富的遗传资源。鉴于野猪生态、生存空间日渐减少，现存数量不足以满足人们对野味的需求，加之野猪某些特殊性状和特征，促发了人们对野猪资源开发和利用的兴趣。     

贵州剑河白、黑香猪的血液蛋白多态性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术测定贵州剑河白、黑香猪血清转铁蛋白（Ｔｆ） 、前白蛋白（Ｐａ） 、后白蛋白（Ｐｏ） 、淀粉酶（Ａｍ） ,酯酶（Ｅｓ） 的遗传多态性。并计算它们的基因型频率和基因频率,以及５ 个多态位点的平均杂合度。结果表明,贵州剑河白、黑香猪５ 个多态位点的基因型频率和基因频率差异不显著（Ｐ＞ ０ ．０５） ,平均杂合度均较小,且两者间差异不显著（Ｐ＞ ０ ．０５） 。     

不同品种头花蓼叶片的比较解剖学研究

[目的]对野生头花蓼、GAP基地种植头花蓼、贵州省农业生物工程重点实验室选育的四倍体及其二倍体头花蓼品种叶片进行解剖学研究,期望为头花蓼优良品种的选育提供解剖学参考依据。[方法]采用石蜡切片法和指甲油印迹法,分别对4种头花蓼叶片结构和叶表皮进行观测。[结果]头花蓼叶片气孔器为无规则型,上表皮气孔数明显少于下表皮。表皮毛仅分布于叶脉上,下表皮相对较多。叶肉包括栅栏组织和海绵组织2个部分,其中栅栏组织2列,细胞呈长柱形;海绵组织细胞近圆形,排列疏松。叶脉为外韧维管束类型,主脉具两个维管束,上下排列,近轴面维管束较小,其韧皮部朝下,木质部朝上;远轴面维管束相对较大,木质部和韧皮部的排列与近轴面维管束相反。[结论]在研究的4个头花蓼材料中,与其他3个二倍体品种相比,多倍体形态解剖结构特征有明显差异。四倍体品种气孔密度较小,叶片较厚,栅栏组织发达,表明该品种具有较强的抗寒性,对环境的适应能力更强。     

石斛抗真菌内生细菌的筛选及其抗菌特性的初步研究

从药用植物石斛组织中分离到4株具有抗真菌活性的细菌菌株,其中DEB-2菌株具有比较稳定的抗真菌作用,能强烈抑制多株植物病原菌、人体病原菌、植物内生菌和食品腐败菌,显示该菌在植物真菌病害的防治、抗真菌药物的筛选、食品防霉变和植物组织培养污染真菌的防治上有一定的应用前景;抗菌机理观察,发现被拮抗菌丝尖端均有不同程度变粗、膨大、崩解或者菌丝分枝增多的现象,表明被拮抗菌丝的细胞壁可能被破坏,使细胞内原生质流出而抑制其菌丝的尖端生长.

Abstract：

Four endophytic isolates with anti1fungal capacity were obtained from Dendrobium. Of these isolates, DEB-2 demonstrated stable antifungal function. It could inhibit the growth of some plant pathogenic fungi, endophytic fungi, human pathogens and fungi which may cause food spoilage. This isolate also showed a promising prospect of application in prevention and control of plant diseases and fungal contamination in plant tissue culture. Morphological abnormalities of the inhibited hyphal tips caused by the isolate, i.e. bulges, thickening, collapse or swelling and stimulation of branching, were observed, making,consequently, the growth of the hypha tips impossible.     

头花蓼组培快繁体系的建立

以头花蓼种子无菌苗顶芽为外植体,MS为基本培养基,通过顶芽直接诱导丛生芽、丛芽增殖、生根、移栽,以建立头花蓼组培快繁体系。结果表明:头花蓼最佳丛生芽诱导培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA 0.10mg/L,增殖倍数7.1;最佳芽增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.05 mg/L,增殖倍数为10。组培苗生根以1/2MS+NAA 0.10 mg/L最好,生根最快,根数量最多,生根率达100%。在腐殖土中,幼苗移栽成活率达100%,植株生长良好。     

贵州剑河白香猪和黑香猪组织器官的LDH同工酶比较

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术测定6月龄贵州剑河白香猪和黑香猪的心、肝、肾、肺、胃、脾、小肠、眼肌和血清9种组织器官乳酸脱氢酶（LDH）同工酶。结果表明，贵州剑河白香猪和黑香猪各组织器官LDH同工酶的分布和含量差异不显著（P＞0．05），两个猪群的心、肝、肾、肺、胃、小肠和血清7种组织器官以LDH1＋LDH2为主，骨骼肌以LDH5为主，而脾脏LDH五种同工酶含量较均衡，A：B亚基之比接近1：1，发现控制LDH同工酶A亚基的基因出现变异。     

温度、pH对杜仲抗真菌蛋白抗菌活性的影响

以白色念珠球菌为指示菌，用纸片法显示的抑菌圈直径考察了温度、pH值对杜仲抗真菌蛋白活性的影响。杜仲抗真菌蛋白在室温（21℃）、37、50、60、70、80、90、100℃下分别处理10min、30min，用pH值为5．8、6．0、6．5、7．0、7．5、8．0的系列磷酸盐缓冲液溶解后，纸片法检测活性，测量抑菌圈直径。结果表明，杜仲抗真菌蛋白的最适作用温度为37℃，在100℃加热30min后，抑菌圈直径为13．16mm，抑菌环宽度为2．64mm；在选定的pH值范围，杜仲抗真菌蛋白都有显著抑制活性，最适pH值为7．0，抑菌圈直径为13．23mm，抑菌环宽度为3．62mm。杜仲抗真菌蛋白对高温有一定耐受性，可适应较宽作用的pH值范围。     

贵州剑河白、黑香猪生长发育测定

对剑河白香猪、黑香猪零世代、一世代、白香猪与大约克夏猪杂交F1代2～6月龄的生长发育数据进行了测定,在同条件下与从江香猪的生长发育及饲料报酬进行比较.结果表明,白香猪与黑香猪零世代、一世代在体重、体高、体长、胸围等指标上差异不显著(P＞0.05),与从江香猪差异也不显著(P＞0.05).剑河白香猪与大约克夏猪正、反交试验显示,除体重外,体长、体高、胸围指标F1代间无显著差异(P＞0.05),且正、反交F1比纯繁的剑河白香猪的体重、体尺指标均高,差异极显著(P＜0.01).