王浆高产蜜蜂和原种意大利蜜蜂咽下腺发育蛋白质组分析

 【目的】对王浆高产蜜蜂（浆蜂）（A. m. ligustica）和原种意大利蜜蜂（原意）（A. m. ligustica）1、3、6日龄工蜂咽下腺进行蛋白质组研究，揭示咽下腺在此阶段的发育特征。【方法】采用双向电泳方法对浆蜂和原意咽下腺进行蛋白质组研究，通过与已鉴定蛋白功能的咽下腺和蜂王浆蛋白质组图谱比较，推断部分蛋白的功能。【结果】浆蜂咽下腺在3个日龄表达的蛋白数（210、192、230）分别显著的高于原意（169、188、212），两蜂种均在6日龄表达蛋白最多（P＜0.05）。浆蜂咽下腺3个日龄表达的共有蛋白数为119个，其中21个蛋白表达量随咽下腺的发育显著上调，14个蛋白显著下调;原意咽下腺3个日龄表达的共有蛋白数为107个，其中15个蛋白表达量随咽下腺的发育显著上调，19个蛋白显著下调（P＜0.05）。1日龄浆蜂和原意咽下腺共有蛋白为145个，其中28个蛋白点浆蜂表达量显著高于原意，14个蛋白点原意表达量显著高于浆蜂，浆蜂特有蛋白为65个，原意为24个;3日龄浆蜂和原意咽下腺共有蛋白为138个，其中31个蛋白点浆蜂表达量显著高于原意，19个蛋白点原意表达量显著高于浆蜂，浆蜂特有蛋白为54个，原意为50个;6日龄浆蜂和原意咽下腺共有蛋白为175个，其中44个蛋白点浆蜂表达量显著高于原意，25个蛋白点原意表达量显著高于浆蜂，浆蜂特有蛋白为55个，原意为37个（P＜0.05）。与原意相比，浆蜂咽下腺发育3个日龄特有蛋白点总数为72个。从3日龄开始在浆蜂和原意咽下腺的蛋白表达谱中出现大量的王浆主蛋白点。【结论】从工蜂羽化到6日龄这一阶段内，浆蜂咽下腺蛋白表达明显比原意活跃，6日龄是2蜂种表达最为活跃的阶段。咽下腺发育过程中的共有蛋白为咽下腺发育所必需的管家蛋白，但它们的表达模式存在较大差异。不同日龄的特异蛋白表明咽下腺在不同的发育阶段需要不同的蛋白来调控。两蜂种工蜂咽下腺都从3日龄就开始分泌蜂王浆。     

优势与潜力并存的埃塞俄比亚蜂业

<正>埃塞俄比亚位于非洲东部,面积约1103600平方公里,首都亚的斯亚贝巴。埃塞俄比亚虽然地处热带,但因地势高,大部地区气候温和,年平均气温10～27℃,年均降水量高原区为1000～1500毫米,境内有30多条大河发源于中部高原,故有     

性成熟雄蜂与外勤工蜂触角差异蛋白质组分析

【目的】通过对性成熟雄蜂与外勤工蜂差异蛋白质组进行定量及定性的分析,以期探明雄蜂与工蜂触角发挥生理功能的分子基础。【方法】将性成熟雄蜂与外勤工蜂的触角蛋白质进行双向凝胶电泳以获得蛋白质的分子量、等电点和表达量信息,利用MALDI-TOF质谱以及MASCOT软件对部分表达量有差异的蛋白质进行鉴定,并对其进行表达量的聚类分析。【结果】性成熟雄蜂和外勤工蜂的触角各表达了484、479个蛋白质,其中共有蛋白质416个。在表达的蛋白质中,有102个蛋白质在雄蜂触角中高表达,有80个蛋白质在工蜂触角中高表达。9个已鉴定的差异蛋白质在功能上主要参与转运、激素代谢和能量代谢。雄蜂触角中高表达的有气味结合蛋白质14、脂肪酸结合蛋白质(2个)、保幼激素酯酶(2个)、酰基辅酶A脱氢酶、bellwether异构体1以及CG31974-PA;在工蜂触角中高表达的仅有触角特异蛋白质2。【结论】性成熟雄蜂与外勤工蜂表达的总蛋白质的数量没有明显的差异,且大部分为共有蛋白质,说明工蜂与雄蜂触角的分子进化过程是较为保守的。在雄蜂触角中高表达的参与转运以及代谢的蛋白质,可能是为了使雄蜂婚飞过程中能够更灵敏的接受蜂王的性信息素,准确发现并找到蜂王进行交尾;而在工蜂触角中高表达的触角特异蛋白质2,可能在快速准确寻找蜜粉源、接受巢内外信息素以识别同伴的过程中起着重要作用。     

饲用纤维素酶热稳定性的研究

对不同热处理参数(温度70￣100℃、时间30￣150s)条件下纤维素酶的活性进行了测定,结果表明:纤维素酶的活性损失率随处理温度的升高和时间的延长而增大。不同处理温度,酶活性损失率差异极显著(P<0.01);不同处理时间,酶活性损失率差异显著(P<0.05)。     

基于高分辨质谱和代谢组学技术评估和优化蜂王浆代谢物提取方法

【目的】蜂王浆是具有医疗保健功效的天然产品,含有丰富的小分子活性成分,目前蜂王浆代谢物的提取尚缺乏系统研究。通过蜂王浆代谢轮廓分析,比较不同溶剂对蜂王浆小分子化合物的提取效果,优化蜂王浆代谢物提取方法,鉴定蜂王浆中的代谢物。【方法】分别使用6种溶剂（50%和80%的甲醇、乙醇和乙腈）提取蜂王浆代谢物,运用反相液相色谱（reverse phase liquid chromatography,RPLC）和亲水相互作用色谱（hydrophilic interaction liquid chromatography,HILIC）分别联合四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术（Q-exactive orbitrap HRMS）进行检测。比较不同溶剂组的代谢特征离子数量和相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）,并进行主成分分析（principal component analysis,PCA）。利用质谱数据库定性代谢物,并经标准品验证,比较其RSD差异,进行聚类热图（clustering heatmap）分析。通过正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）、单变量统计分析（student’s t-test）和倍数变化（fold change,FC）筛选溶剂组间具有显著差异的代谢物。【结果】强极性化合物,包括葡萄糖与果糖等同分异构体,在HILIC条件下分离良好,而脂类等中低极性化合物在RPLC条件下得到较好的分离。两种色谱分离方法的应用实现了对不同极性代谢物的检测,在蜂王浆中共鉴定到70种高丰度化合物,涵盖了糖、氨基酸、脂类、维生素等,其丰度差异高达8 340倍,其中有17种化合物为本研究首次报道。乙腈溶剂得到的代谢特征离子数量最少,80%乙腈比50%乙腈的提取效果更差;对甲醇和乙醇而言,高浓度时的代谢特征离子数量更多。所有溶剂组得到的RSD值集中分布在20%范围内,但80%乙腈组在10%内的占比最低,已鉴定的70种代谢物的RSD值进一步证明80%乙腈的重复性较差。PCA结果表明,来自同一提取溶剂的蜂王浆代谢谱高度相似,不同溶剂提取的样品间存在差异,其中,80%乙腈组与其他5组差异最大。聚类热图等分析结果表明,中低极性物质在50%溶剂组丰度较低,强极性物质特别是果糖、葡萄糖、蔗糖、赖氨酸、腺苷、胆碱、磷酸胆碱和葡萄糖酸在80%乙腈组丰度最低。【结论】RPLC和HILIC分别联合高分辨质谱技术能够较全面准确地检测蜂王浆中的小分子化合物,80%甲醇或80%乙醇是提取蜂王浆代谢物的最佳溶剂。     

功能合理的养蜂车对我国蜂业现代化至关重要

<正>随着农业现代化进程的推进,养蜂业现代化已成为促进蜂业发展必由之路。现代化蜂业生产以提高劳动效率,降低劳动强度,提高产品质量,最终实现蜂农收益水平提高为目的。蜂业现代化包括生产现代化,管理现代化,设计功能合理的养蜂车对养蜂现代化具有重要的实际意义。一、养蜂车发展历史养蜂车早在30多年前就出现在我国汽车产品公告管理目录上,但是长期以来一直没有汽车厂家开发生产该产品。主要原因是以前我国的汽车经营管理实     

蜜蜂蛋白质组研究进展

 蜜蜂在自然界和人类社会中具有举足轻重的作用。蜜蜂授粉不但能够提高农作物的产量和质量，而且对维持自然界生物多样性具有重要贡献，同时蜜蜂提供给人类的蜂产品也具有较高的营养和保健功能。随着基因组测序工作的完成，作为模式生物，蜜蜂蛋白质组学研究进入了一个新的阶段。目前对蜜蜂蛋白质组的研究比较常用的是双向电泳结合质谱的研究方法，包括不同品系蜜蜂卵、幼虫、蛹、级型分化、咽下腺等发育相关蛋白质组及差异蛋白质组研究，蜜蜂毒腺、头部、胸部、血淋巴、精液、受精囊、附腺等器官和组织的蛋白质组分析，以及蜂王浆、蜂花粉、蜂毒等部分蜂产品的蛋白质组等。本文综述了近年来蜜蜂相关蛋白质组研究进展，对其今后在蜂业科学的研究应用进行了展望，以期对蜜蜂研究有所借鉴。     

意大利蜜蜂工蜂毒腺内蜂毒与电取蜂毒蛋白质组比较

【目的】对意蜂工蜂毒腺蜂毒和电取蜂毒蛋白质组成的特点和差异进行探究,为进一步了解蜂毒的化学组成和合理利用提供理论依据。【方法】采用凝胶电泳和非凝胶技术对直接从毒腺内获取蜂毒（毒腺蜂毒）和电取蜂毒的蛋白质组进行比较,对差异蛋白进行质谱分析、功能鉴定和生物信息学分析。【结果】在毒腺蜂毒中,一维凝胶电泳（1-DE）鉴定19种蛋白,双向凝胶电泳（2-DE）鉴定11种蛋白,非凝胶法鉴定14种蛋白,3种方法在毒腺蜂毒中共鉴定30种非冗余蛋白质,它们是蜂毒毒素成分（50%）和保护腺体细胞免受毒素损伤的抗氧化类蛋白和蛋白成熟加工相关的蛋白折叠、分子转运类等（50%）。在电取蜂毒中,1-DE鉴定12种蛋白,2-DE鉴定3种蛋白,非凝胶法鉴定7种蛋白,3种方法共鉴定14种非冗余蛋白质,它们主要是蜂毒毒素成分（93%）。其中类磷脂酶A2在2种蜂毒中首次鉴定,肽基辅氨酰顺反异构酶在毒腺蜂毒中首次发现。蜂毒明肽前蛋白原、镇静肽在毒腺蜂毒中的含量显著高于电取蜂毒。磷脂酶A-2、毒液二肽基肽酶Ⅳ前体、毒液过敏性酸性磷酸酶和肥大细胞脱粒肽在电取蜂毒中含量较高。【结论】毒腺蜂毒中蛋白种类丰富,但电取蜂毒中主要毒素成分含量不低于毒腺蜂毒。由于蜂毒中的主要药物成分在毒素中,因此,电击取毒可有效利用蜂毒的功能成分。新发现的蜂毒蛋白对进一步认识蜂毒组成成分具有一定意义,这为蜂毒合理利用提供理论依据和实践基础。