植物内生菌对重金属胁迫下植物生长的影响综述

重金属污染是近几年来人们热议的话题,利用绿色、经济、环保的方法缓解重金属胁迫是人们一直所追求的,内生菌与植物联合缓解重金属胁迫就是其中之一。内生菌能够缓解重金属对植物生长的影响,本文综述了近年来植物内生菌对重金属胁迫缓解的相关研究,以及内生菌在重金属胁迫下促进植物生长发育的作用机制。     

农杆菌介导大豆遗传转化影响因素研究进展

大豆基因工程育种和功能基因组分析亟需建立高效大豆转化体系。本文综述了近年来影响农杆菌介导大豆遗传转化体系的农杆菌因素、植物因素及培养条件等方面的进展,主要包括农杆菌菌株、菌株生长状态、大豆基因型、外植体类型、防御酶、内源激素及侵染和共培养方法等,为提高大豆遗传转化效率及基因工程育种等相关研究提供参考。     

水稻抗稻瘟病突变体筛选初报

以稻瘟病病原菌粗毒毒提取液为选择压,对水稻进行抗病的筛选。结果表明：粗毒素提取液对水稻愈伤组织诱导、继代及分化有明显的抑制作用,抑制程度随毒素浓度提高而增强,且品种间差异显。采用诱导与分化培养基均含毒素的处理方法筛选效果较好,毒素筛选的愈伤组织与对照相比,ＰＡＬ酶活,ＰＯＤ酶活显增强;ＰＯＤ同工酶酶谱中有新增谱带出现。     

一株野生大豆内生真菌YD-25的筛选鉴定及其抗重金属活性研究

为了丰富野生大豆内生真菌资源,探究野生大豆内生真菌的生物学活性。从野生大豆植株内分离筛选出1株内生真菌YD-25,通过形态学和分子生物学相结合的方式鉴定菌株;采用控制单因素变量试验和正交试验确定菌株的最适生长条件;通过对比胞内、胞外产物和对照组培养大豆幼苗的株高测定菌株的促生效果;测定菌株抗重金属铜、铅、镉的能力和重金属胁迫下菌体的抗氧化酶活性变化。结果表明:YD-25菌落初期为白色,后期变为橘黄色,菌丝分支且产孢;经鉴定该菌株为黑附球菌(Epicoccum nigrum)。该菌株生长的最适pH为3.0,优化培养条件为可溶性淀粉4%、酵母浸粉0.5%、KH_2PO_4 0.15%、MgSO_4 0.05%,培养8 d。YD-25菌株的胞外产物对大豆幼苗有较好的促生长作用,第4天和第6天的促生率分别达到了15.4%和18.1%。同时具有良好的耐重金属镉、铅、铜的能力,除受Cd~(2+)胁迫的YD-25菌株的SOD活性之外,受其它重金属胁迫的YD-25菌株各项酶活性均随着重金属浓度提高有不同程度的提高。     

玉米细胞悬浮系的建立与单细胞培养效果

以330、辽7352和丹340共3个玉米自交系的雄幼穗为外植体获取愈伤组织,建立悬浮细胞系,在改良MS、改良B5、改良1/2B5 培养基中进行细胞悬浮培养。试验中发现 ,基因型和培养基对细胞悬浮系有很大影响,其中供试材料330表现最好,圆形细胞率平均达16.5%,改良1/2B5 培养基有利于细胞悬浮培养,500mg·L-1的水解酪蛋白对悬浮细胞生长有促进作用。2,4 -D的浓度影响悬浮细胞的生长和细胞成活率,浓度为1.0～2.0mg·L-1时比较适宜。细胞悬浮培养5～7d继代1次。在悬浮培养1个月后 ,经400目镍网过滤筛选,获得单细胞。单细胞培养中,激素水平和培养方式影响单细胞的分裂率,其中2,4-D的浓度为0.5～1.0mg·L-1时比较适宜。浅层培养和看护培养有利于单细胞的生长。在单细胞培养过程中试验获得了愈伤组织。     

低温和激素处理对直立穗型粳稻幼穗培养的影响

为探讨低温预处理和激素浓度及其配比对直立穗型超高产粳稻幼穗组织培养的影响,以沈农265和盐丰47幼穗为试材,比较研究了外植体经5～8℃不同持续时间低温预处理,以及诱导阶段添加不同浓度的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA),分化阶段添加不同浓度的激动素等几种培养条件下的培养效果.结果表明:经24h低温预处理的幼穗出愈率显著提高,各处理均达89%;诱导过程中2,4-D浓度为3mg·L-1时,2个品种出愈率均处较高水平,分别达到86%以上:分化过程中激动素(KT)与萘乙酸(NAA)浓度配比为2mg·L-1/0.05mg·L-1时,是2个品种愈伤出苗的适宜浓度.因此,低温预处理、激素种类及配比是决定直立穗型粳稻幼穗离体培养的重要因素.     

超级稻沈农9741的组织培养体系的构建

以超级稻沈农9741的成熟胚为外植体,通过筛选基本培养基、优化激素组合和调节培养基渗透压,构建了适合水稻特定品种的高效再生体系.试验结果表明:愈伤组织诱导培养采用13(NBB 2.0mg·L-12,4-D)培养基可获得95%的愈伤诱导率;愈伤组织继代培养采用S3(NBB 1.5 mg·L-12,4-D 0.2 mg·L-16-BA 500 mg·L-1脯氨酸)的培养基能使愈伤快速增殖,并且保持良好的胚性;愈伤组织分化培养采用D2(NBB 3.0 mg·L-16-BA 0.5 mg·L-1NAA 500 mg·L-1脯氨酸)的培养基可获得85%的幼苗分化率.该体系可用于超级稻沈农9741的遗传转化和基因工程育种研究中.     

草莓轻型黄边病毒CP基因的克隆、序列分析及原核表达

克隆草莓轻型黄边病毒CP基因,并构建其原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达CP蛋白。利用SMYEV的检测引物,通过RT-PCR技术筛选带SMYEV的草莓植株;根据NCBI中SMYEV序列设计扩增CP基因全长引物,通过RT-PCR获得SMYEV沈阳分离物CP基因全长序列;将CP基因克隆到原核表达pGEX-6P-1上,利用IPTG诱导CP基因在大肠杆菌BL21(DE3)中表达蛋白。利用RT-PCR扩增获得SMYEV分离物SY05的CP基因全长序列,由729个核苷酸组成,编码242个氨基酸残基。SY05与其他SMYEV分离物的核苷酸同源性为80.1%～97.4%,氨基酸同源性为92.1%～99.6%,其中,与SMYEV分离物SY03的氨基酸一致性为98.3%。将SY05的CP基因成功克隆到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建了重组表达载体p6P-EV-CP,并将其导入大肠杆菌BL21(DE3)中。SDS-PAGE分析表明,IPTG诱导SMYEV分离物SY05的CP基因在大肠杆菌中表达出分子量为52.0 kDa的融合蛋白。克隆出SMYEV分离物SY05的CP基因,实现了其在原核细胞中的表达,为SMYEV抗血清的制备奠定了重要基础。     

不同盐浓度下水稻胚性愈伤组织生理生化指标分析

水稻成熟种子诱导形成的胚性愈伤组织 ,继代时加不同浓度的盐胁迫 ,经连续 3个月的筛选培养 ,生理生化分析表明 ,盐胁迫条件下 ,游离脯氨酸含量和超氧化物歧化酶活性均显著高于对照 ,且随盐浓度的升高而上升 ,可溶性蛋白含量则低于对照 ,且随盐浓度的上升而下降。分化培养获得了再生植株     

野生和栽培大豆对镉胁迫的响应差异分析

为探明野生大豆和栽培大豆对不同浓度镉胁迫的响应差异,筛选大豆耐镉优质资源。以辽豆24和野生大豆1502为材料,采取不同镉浓度处理(0,20,40,80 mg·kg~(-1)),以不添加镉为对照,分别在处理20,30和40 d时,测定株高、抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性及MDA含量。结果表明两种大豆均表现出随镉浓度的增加而株高逐渐降低的趋势,40和80 mg·kg~(-1)处理组显著低于对照,且随着处理时间延长,高浓度镉下株高降低幅度增大。镉胁迫对栽培大豆株高的抑制作用较野生大豆表现得更早,更明显。镉胁迫对栽培和野生大豆的SOD、POD和CAT活性及MDA含量都有一定影响,但是两种大豆间差异很大。不同浓度镉胁迫下,SOD和POD活性变化较CAT活性变化表现得更灵敏;栽培大豆的3种抗氧化酶较野生大豆活性变化幅度更大,高镉浓度抑制效应更明显;栽培大豆较野生大豆的MDA含量增加效应出现得更早更明显。野生大豆与栽培大豆相比,对重金属镉的耐受性更强,可以作为重要的遗传资源应用于大豆的抗镉育种。