农杆菌介导的紫花苜蓿遗传转化体系的建立与优化

以“中苜一号”紫花苜蓿品种作为受体材料,建立了适用于农杆菌介导的转基因组培体系,并对GUS 基因进行转化,经 GUS 组织化学染色,以获得抗性愈伤组织分析为目的,转化优化条件为:叶片预培养 4~5 d,用农杆菌菌液(A600=0.3~0.8)侵染 20 min,然后在培养基上铺一层灭菌滤纸共培养 7 d 后清洗。     

生物制品公司周边环境中2株大肠杆菌噬菌体的分离鉴定

为了检测生物制品公司周边环境中噬菌体的种类及含量,以大肠杆菌(CMCC44102)为宿主菌,对生物制品公司污水处理厂污水样本中的噬菌体进行了分离纯化,并对纯化样本的一般生物学特性进行了鉴定。实验分离获得了2株噬菌体ΦL和ΦS,ΦL噬菌斑直径为1~2mm,ΦS噬菌斑直径为0.1~0.3mm。2株噬菌体在电镜下形态极为相似,均可见明显头部和尾部结构,头部呈正多面体,直径约为33nm;尾部较短,长约21nm,可见爪刺样结构。ΦL与ΦS的一般生物学特性大多相似,前者效价为2.129×10~(10) PFU/mL,后者为2.5645×10~(10) PFU/mL;2株噬菌体的最佳感染复数均为10;在37℃及以下温度均具有良好的稳定性;且均对宿主菌,即大肠杆菌(CMCC44102)具有高度属特异性。一步生长曲线结果表明,ΦL的潜伏期和爆发期均显著短于ΦS,说明ΦL生长能力强于ΦS。上述结果表明,生物制品公司周边环境中存在大量噬菌体,并对一些重要工程菌具有高度特异性,应高度关注并防止其对生物产品质量产生影响。     

一株产乙醇嗜热厌氧油藏微生物Thermoanaerobacter sp DF3的性质研究

[目的]了解油藏微生物Thermoanoerobacter sp DF3的生理生化特性,优化木糖产乙醇培养方案。[方法]利用厌氧分离技术从大港油田油层采出液中分离到一株产乙醇厌氧杆菌DF3。采用生理生化鉴定与16SrDNA序列的系统发育学分析其系统发育地位。用气相色谱分析其代谢产物。[结果]菌株DF3是一株严格厌氧的嗜热细菌,呈直杆状,G^-,菌体大小为O．42μm×（1．60～5．20）μm,单生、成对或成串生长,产顶端芽孢;生长温度为45～78℃（最适65℃）,能利用葡萄糖、木糖、果糖、核糖、甘露糖、阿拉伯糖、蔗糖、半乳糖、乳糖、纤维二糖、松三糖、棉子糖、淀粉等作为底物;其16SrRNA与zpseudoethanolicus相似性为99．7％。发酵葡萄糖与木糖的主要产物为乙醇,培养方案优化后其代谢木糖产乙醇终浓度为2．og／L。[结论]通过试验证明菌株DF3是目前已知菌株中产乙醇活性较强的茵株之一,在65℃时代谢木糖能产生2．Og／L的乙醇。目前代谢木糖高产乙醇的茵株均由国外分离获得,菌株DF3的分离获得为我国研究木质纤维素产乙醇提供了优良的出发菌株。     

限制性内切酶分析鸭瘟病毒DNA

本文报导了一种限制性内切酶图谱分析法鉴别鸭瘟强毒株及疫苗株的微量快速方法。该法选用HindⅢ、HinfⅠ、BamHⅠ、PostⅠ、EcoRⅠ、SalⅠ、XhoⅠ七种限制性内切酶,酶切两毒株图谱表明酶切分子量范围1.43-22×10~6道尔顿,HindⅠ羌酶切位点,EcoRⅠ两毒株图谱相同;HindⅢ、BamHⅠ、PstⅠ、SalⅠ、XhoⅠ这五种酶切后的片段数、片段大小、迁移率可准确鉴别两毒株。直接裂解感染细胞是种快速、简便的抽提鸭瘟病毒DNA的方法。     

几种转移因子的制备及特性鉴定

本文用透析法制备猪脾转移因子（ＰＴＦ）、猪囊虫特异性转移因子（ＰＳＴＦ）及兔脾转移因子（ＲＴＦ）和兔脾猪囊虫特异性转移因子（ＲＳＴＦ）,旨在探讨它们的理化特性及组成上异同。结果表明四种转移因子在核糖、多肽及氨基酸组成上存在很大差异。即同一来源的转移因子ＲＴＦ与ＲＳＴＦ、ＰＴＦ与ＰＳＴＦ及ＲＴＦ与ＰＴＦ、ＲＳＴＦ与ＰＳＴＦ之间组成不同。     

四川猪细小病毒的分离与鉴定

本文为1982—1984年在四川秋季初产母猪死胎内分离的猪细小病毒(PPV)3株(SR-1、SR-2及SR-3),能在原代猪肾单层细胞上生长,引起细胞病变(CPE)。电镜观察病毒粒子多呈圆形或近似六角形,无囊膜,直径大小为20—22nm,个别最大直径为25nm。核酸类型为DNA。耐热、耐酸、能抵抗乙醚和胰蛋白酶。细胞培养能产生血凝素,能很好地凝集豚鼠红细胞。三株病毒均能与PPVMu-1毒株和阳性血清产生交互凝集抑制。PPV在四川猪内存在较广,是引起秋季初产母猪死胎的重要原因之一。     

猪乙型脑炎的调查研究

乙型脑炎(JEV)是人畜共患的虫媒性病毒传染病,分布在东南亚各国。此病首先在日本人体内发现,以后在马、牛、羊、猪等动物内发现。某实验猪场在1972年大批     

猪囊尾蚴几种抗原氨基酸分析及其与抗原反应原性的相关性

 通过对猪囊尾蚴虫体 (CWag)、囊液 (CFag)、头节 (CSag)、囊壁 (CBWag)、脲溶抗原 (UCWag)和成虫抗原(TSag)的水解氨基酸以及抗原反应原性的分析 ,确定了各氨基酸与抗原反应原性的关系。试验结果表明 ,几种抗原都含有 17种氨基酸 ,通过数据处理软件SPSS对各种抗原组成差异分析显示 ,各种抗原在天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、组氨酸的组成上无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,且CSag、CBWag之间在所有氨基酸组成上均差异不显著 ;而UCWag却与其它抗原在氨基酸组成上差异显著 (P <0 .0 5 )。UCWag的敏感性和特异性均较高 ,脯氨酸与抗原反应的敏感性呈正线性相关 ,谷氨酸与抗原反应的特异性呈正线性相关     

改进简并PCR法克隆盐生杜氏藻烯醇酶基因

该文针对基因同源性克隆中存在的问题 ,采用改进简并PCR法对盐生杜氏藻具抗逆功能的烯醇酶基因 .改进后的同源引物简并度从 10 0 0倍以上降低至 10 0倍以下 ,利用RT PCR成功地扩增出一条 6 30bp的盐藻cDNA片段 ,该片段与其他物种的烯醇酶基因具有很高的相似性 .在此基础上进行 5’和 3’RACE获得了盐藻烯醇酶基因的全长cDNA ,其长度为 1734bp .序列分析表明 ,该基因与莱茵衣藻烯醇酶基因的相同性达 83% ,相似性达 89% ,且在进化上与莱茵衣藻的亲缘关系最近 .Southern杂交结果显示 ,该基因在盐藻中可能为单一拷贝     

乙型脑炎病毒与猪细小病毒混合感染猪的血清学调查

乙型脑炎病毒(JEV)、猪细小病毒(PPV)均能引起猪的繁殖障碍。藤崎优次郎等首先报道日本在同一猪场内有两种病毒的存在。井出诚弥报道了JEV和PPV两种病毒的免疫试验,但未肯定结论。邬捷等提出JEV和PPV和两种病毒是四川秋季初产母猪死胎的主要原因;其后,他们用JEV苗和PPV苗免疫秋季初产母猪预防死胎的研究,获得良好效果。本文的目的是,以血清学方