利用分子标记对桃属植物的识别及其亲缘关系分析

采用RAPD技术，用筛选的22个随机引物对桃属主要种类及其类型进行DNA扩增分析。结果表明不同引物扩增出的DNA片段范围在3～13条，分子量范围在300bp～3kb之间，依据特征谱带，可建立种间及其类型识别的分子检索表。利用22个引物扩出的180个位点上的RAPD带，进行聚类分析，结合前人研究出的结果，揭示桃种间亲缘演化顺序为内蒙古长柄扁桃→光核桃→山桃→甘肃桃→白花山桃、红花山桃、帚形山桃→桃巴旦、陕西桃巴旦→新疆桃、毛桃。  

柿属植物种质资源及其利用研究现状

全世界的柿属植物共约１９０种，主要分布在热带和亚热带，尤其是东亚。我国产５７种６变种１变型，主要分布在西南和华南地区。以作为果树栽培的柿属植物为对象，对其经济价值、起源、栽培历史、品种资源、品种演化、性状遗传和品种选育等方面的研究现状和进展进行了较为详细的阐述。  

亲缘关系相近的桃品种的RAPD分析

对三组亲缘关系较近的品种 :砂子早生、砂激 2号 ;沪 0 2 1、沪 0 2 2、春蕾 ;1 2 1、银花露、白花、芒夏、朝霞、1 2 6 ;采用经过筛选的 2 2个 10碱基随机引物对其DNA扩增 ,通过RAPD带型分析 ,可得到鉴别。经聚类分析可知 ,来源于砂子早生无性系的砂激 2号具有与亲本较高的遗传相似系数 ,其他来源于有性杂交后代之间及其亲本遗传相似系数较上述二品种低  

柿休眠芽茎尖玻璃化法超低温保存及植株再生

 对柿 (DiospyroskakiThunb .)休眠芽茎尖进行了玻璃化法超低温保存及植株再生研究 ,结果表明 ,1.5～2 .0mm茎尖在含有 0 .3、0 .5和 0 .7mol·L-1蔗糖的改良MS培养基 (KNO3 和NH4NO3 减半 )上预培养各 1d ,室温(2 0℃ )下装载液 (2mol·L-1甘油 ,0 .4mol·L-1蔗糖 )停留 2 0min ,0℃下玻璃化液 (PVS2 或PVS3 )处理 30～ 4 0min ,投入液氮保存 1d后 ,4 0℃水浴化冻 1min ,含蔗糖 1.2mol·L-1的改良MS培养基洗涤 2 0min ,接种于含 0 .2mg·L-1CPPU、1mg·L-1BA、0 .0 5mg·L-1IAA、5 0 0mg·L-1可溶性PVP、30g·L-1蔗糖和 7g·L-1琼脂的改良MS培养基 (再生培养基 )表面的滤纸上 ,暗处理 1d后转移到新鲜的上述再生培养基中 ,暗培养 1周后转到正常光下 ,成活率高达 70 .2 % ,再生植株生长和分化正常。本研究结果为柿种质的长期保存提供了新途径。  

柿和君迁子试管苗茎尖玻璃化法超低温保存及再生植株遗传稳定性研究

对柿(Diospyros kaki Thunb.)和君迁子(D. lotus L.)试管苗茎尖玻璃化法超低温保存及再生植株遗传稳定性进行了研究。结果表明,试管苗在添加有蔗糖0.3 molL-1的改良MS培养基 (KNO3和NH4NO3减半)上,于低温6±1℃下锻炼6周后,切取侧芽茎尖1.5～2.0 mm在含蔗糖0.7 molL-1的改良MS培养基上预培养2 d,室温(20℃)下装载液(2.0 molL-1甘油 0.4 molL-1蔗糖)过渡20 min,0℃下玻璃化液PVS2(30%甘油 15%乙二醇 15%二甲基亚砜 0.4 molL-1蔗糖)处理80 min,换成新鲜的PVS2后投入液氮保存1 d,40℃水浴化冻1 min,含蔗糖1.2 molL-1的改良MS培养基洗涤20 min,接种于含0.2 mgL-1 CPPU、1.0 mgL-1 BA、0.05 mgL-1 IAA、500 mgL-1 可溶性PVP、30 gL-1蔗糖和7 gL-1琼脂的改良MS培养基(再生培养基)的滤纸上,暗处理1 d后转移到新鲜的上述再生培养基中,暗培养1周后转到正常光下,再生率超过30%;再生植株通过细胞学和AFLP标记检测,没有发现核DNA含量、染色体数目和AFLP谱带的改变。该结果为柿属植物种质资源的长期保存提供了理论依据。  

植物总基因组DNA提取纯化方法综述

归纳植物DNA提取各个环节,同时对DNA提取过程中的常见问题、原因及应对策略作简要的分析。  

柿品种'禅寺丸'花粉超低温保存研究

对柿品种‘禅寺丸’(Diospyros kaki Thunb．CV．Zenjimaru)花粉进行了干燥脱水法(Dehydration)和玻璃化法(Vitrification)液氮超低温保存研究，结果表明：0℃下硅胶干燥8h或(20士1)℃下玻璃化液PVS2处理40～60rnin后直接投入液氮保存，40℃解冻70s后，相对存活率(TTC检测)和萌发率都在90％以上，且活力与保存时间长短无关。该结果为柿花粉的长期保存提供了技术支持。  

柿休眠芽茎尖包埋玻璃化法超低温保存及植株再生

主要探讨蔗糖浓度、装载时间和PVS2处理时间对部分中国甜柿种质超低温保存后成活率的影响。结果表明,长约1 mm的柿休眠芽茎尖用海藻酸钙包埋后,在含有0.3 molL-1蔗糖的改良MS培养基(KNO3和NH4NO3减半)上预培养1 d,室温(25℃)下PVS2处理2 h后快速投入液氮(LN),1 h后取出,在40℃水浴中化冻1～2 min,用含有1.2 molL-1蔗糖的改良MS培养液洗涤20 min,接种于含ZT(玉米素)2.2 mgL-1、PVP(聚乙烯吡咯烷酮)600 mgL-1的改良MS培养基,暗培养3～5 d,转移至正常光下,最高成活率接近100%;再生植株生长和分化正常。  

甜柿试管苗生根条件的研究

采用正交设计，探讨了影响甜柿试管苗生根的复合因素，结果表明：在添加细胞分裂素CPPU0.2mg/L的MS（1／2N）继代培养基上，经适当时间继代培养的嫩梢经IBA250mg/L浸基部15s后转接到1／2MS（1／2N）＋活性炭1000mg/L的生根培养基中或直接接种到添加有IBA1mg/L的上述生根培养基中诱导生根的效果好。不仅生根率高，根生长快，且根条数多，易于多栽成活。  

甜柿2n花粉形成的细胞学机理研究

 研究了甜柿品种‘禅寺丸’2n花粉形成的细胞学机理 ,检测到导致 2n花粉形成的异常减数分裂现象 :(1)中期Ⅱ和后期Ⅱ的小孢子母细胞中发生异常的纺锤体定位 ,表现为平行 (ps)、融合 (fs)和三极纺锤体 (tps) ;(2 )末期Ⅱ4个子核呈两极分布 ,每极 2核 ,或呈三极分布 ,其中一极 2核 ,另两极单核 ;(3)四分体时期观察到二分体和三分体。二分体最终发育成 2个 2n配子 ,三分体则形成 1个 2n配子和 2个n配子。经二分体和三分体的发生频率估算出的2n花粉频率与当年以花粉直径为指标测得的 2n花粉的实际发生频率基本一致。因纺锤体定位异常而产生的 2n配子遗传上等同于FDR(第 1次分裂重组 )型 ,因而在有性多倍化中具有重要的利用价值。