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1.
河北省马铃薯Y病毒株系分子鉴定及其RT-PCR检测   总被引:7,自引:0,他引:7  
根据马铃薯Y病毒(PotatovirusY,PVY)的外壳蛋白基因序列,设计合成了一对寡核苷酸引物,从感染PVY的马铃薯田间病叶组织中提取出病毒的RNA,进行cDNA合成及PCR扩增,得到一条长度约800bp的特异PCR扩增产物,与理论设计的基因片段大小一致,本试验建立了快速、灵敏、简便的PVY检测的方法。将RT-PCR扩增产物克隆到质粒pGEM-T上,并进行了序列分析。结果表明,克隆的cDNA片段由801个核苷酸组成,编码267个氨基酸组成的理论分子量为29kD蛋白,与PVY外壳蛋白的大小一致,与基因库登记的代表性株系相比,它们之间的核苷酸序列同源性为89 6%~98 8%,氨基酸序列的同源性为93 3%~98 5%,说明PVYCP基因具有高度的保守性(记为PVY-HBEI),与国内报道的PVY-CHU、PVY-ZHJ和PVY-ZHOU株系的氨基酸序列同源性分别为96 6%、98 5%和97 8%,与PVYN和PVYO株系的氨基酸序列同源性分别为93 6%和97 8%,从分子水平上确定PVY-HBEI归属于普通株系(PVYO株系)。  相似文献
2.
不同丹参种质资源引种及比较研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
采用随机区组设计,运用统计学方法对12种丹参种质资源的生物学性状和产量进行了比较,筛选出“山东-3”、“山东-8”、“山东-9”3个优良种质资源。调查及分析结果表明:这3个种质资源表现出较好的生物学性状,产量分别比对照提高50.31%,33.96%,28.30%,丹参酮ⅡA含量分别为2.905,2.198,2.119mg/g,均符合《中华人民共和国药典》规定指标,可以作为优良株系在生产中应用,其中“山东-3”的丹参酮ⅡA含量比对照提高5.25%,并且长势粗壮,抗逆性强。“山东-4”虽然丹参酮-ⅡA含量低于《药典》规定标准,但由于具有较好的生产性能,可以作为种质资源加以改良应用。  相似文献
3.
不同物候期芍药根淀粉酶活性的变化   总被引:3,自引:0,他引:3  
采用DNS比色法,精确测定了不同物候期芍药根中淀粉酶的活性。结果表明,芍药出苗到开花期,α淀粉酶活性由低到高,在孕蕾期达到最高峰;β淀粉酶活性变化与α淀粉酶相反,只在苗期具有显著活性。芍药的质量与其粉性有一定关系,且淀粉含量与芍药体内淀粉酶的活性变化密切相关。  相似文献
4.
黄瓜花叶病毒丹参株系外壳蛋白基因的克隆和序列分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
从河北安国具有典型花叶症状的大田丹参叶片中分离到病毒病原 ,经过生物学接种、电镜观察和酶联免疫吸附测定表明该离物与CMV有较近的亲缘关系 (记为CMV DS)。从叶片中提取了该病毒的总RNA ,按照CMV外壳蛋白 (CP)基因前后保守区序列 ,设计合成了 1对特异引物 ,采用RT PCR法扩增了 780bp的全长CP基因的cDNA序列 ,将其克隆到pGEM T载体上 ,并进行序列分析。结果重组克隆序列长为 778bp ,含 1个开放阅读框架 (ORF) ,长度为 65 7nt,编码 2 1 8个氨基酸组成的蛋白。与国内外报道的CMV株系序列比较 ,CMV DS和亚组Ⅰ株系的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性为 93 3%~ 99 4%和95 9%~ 1 0 0 % ;而与亚组Ⅱ株系的核苷酸和氨基酸序列同源性仅为为 78 4%~ 79 0 %和81 2 %~ 83 0 % ,表明CMV DS与CMV亚组Ⅰ的株系较亚组Ⅱ株系同源关系更密切 ,将其划归为CMV亚组IB中 ,这是首次在丹参上发现的CMV株系。  相似文献
5.
半夏凝集素基因克隆及其对桃蚜的抗性研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
研究了半夏凝集素(Pinellia ternataagglutinin,PTA)基因对桃蚜(Myzus persicae)的抗性。从半夏幼叶中提取总RNA,采用RT-PCR法分离克隆出PTA1基因cDNA片段,该基因在GenBank中登录号为DQ092435。序列分析表明:该cDNA片段全长为810bp,编码269个氨基酸组成的蛋白,具有单子叶植物甘露糖凝集素基因家族的特征,含有3个由4个氨基酸(QDNY)组成的甘露糖专一结合位点,与报道的天南星科凝集素基因氨基酸序列的同源性在72.7%~92.9%。构建了35S启动子控制下的PTA1基因的植物表达载体pBI121PTA1,该载体含有抗卡那霉素的选择标记基因(nptⅡ),利用根癌农杆菌介导法转化烟草获得抗卡那霉素的植株。PCR和半定量RT-PCR分析表明:PTA1基因已经整合到植物基因组中并在转录水平上得到了有效表达。抗蚜虫鉴定表明:转基因植株有效地抑制了蚜虫的群体增长率,平均抑制率达77.02%,表明该基因对同翅目害虫的抗虫基因工程有重要的应用价值。  相似文献
6.
优化施肥对丹参产量及丹参酮ⅡA含量的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用"3414"二次回归最优设计,研究了氮、磷、钾肥施用量对丹参根性状、产量及丹参酮ⅡA含量的影响。结果表明:根据田间试验丹参氮、磷、钾的肥效方程,在适宜施肥量范围内,钾肥有利于根长和根数的增加,磷肥和钾肥有利于根直径的增加,氮肥对根产量影响最大;由方程得出最佳施肥方案为N241.41 kg/hm^2、P2O5115.55 kg/hm^2和K2O 171.70 kg/hm^2,根产量最高,可达4914.66 kg/hm^2;施用N225.00 kg/hm^2、P2O5120.00 kg/hm^2和K2O150.00 kg/hm^2时,丹参酮ⅡA含量达到最高值。  相似文献
7.
采用HPLC法,测定了不同地区丹参的丹参酮ⅡA和丹酚酸B含量.结果表明:所检测的15个丹参品种,仅有5个品种的丹参酮ⅡA含量达到药典规定标准,而丹酚酸B含量普遍高于药典规定标准;丹参酮ⅡA与丹酚酸B之间没有正比关系,不能仅以一种含量作为衡量丹参品质优良指标;河南卢氏皱叶丹参及四川中江丹参的品质较好,性状稳定,可推广种植.  相似文献
8.
阐述了河北省药用植物责源现状,分析了河北省中药材生产存在的主要问题和应对措施。  相似文献
9.
从河北省石家庄地区田间表现典型的矮花叶症的玉米病叶中得到分离物MD-HB,按照报道的马铃薯Y病毒属CP基因前后保守区序列的比较,设计合成了一对引物,采用RT-PCR法扩增了1 2kb的全长外壳蛋白(CP)和病毒基因组的3′末端非编码区(3′-URT)的cDNA序列,将其克隆到pGEM-T载体上,并进行序列分析。结果表明,CP基因由939个碱基组成,编码313个氨基酸并含有与蚜虫密切相关的DAG(Asp-Ala-Gly)序列。Nib/CP基因交界处的蛋白酶切位点为Q/S。与侵染禾本科作物的马铃薯Y病毒属甘蔗花叶病毒亚组的4种病毒代表株系甘蔗花叶病毒(SCMV-Ger)、SCMV-MDB、玉米矮花叶病毒(MDMV-A)、高粱花叶病毒(SrMV-H)和约翰逊草花叶病毒(JGMV-O)对应的序列进行比较,结果核苷酸序列的同源性依次为94 4%、84 3%、67 5%、74 2%和60 1%,氨基酸序列的同源性依次为95 5%、87 9%、67 1%、70 3%和58 8%;另一方面,此病毒分离物与来自甘蔗的SCMV株系SCMV-A和MDMV-SC的核酸序列及氨基酸序列的同源性分别为82%、81 1%和83 1%、82 8%,说明它们具有较远的亲源关系。认为应将我国SCMV玉米分离物单独从SCMV划分出来,作为SCMV亚组的一个新病毒种而不是SCMV的一个株系。  相似文献
10.
1栽培技术 1.1选地与整地.选择地势平坦,阳光充足,土质疏松,土层深厚,排水良好的沙质壤土.  相似文献
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