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1.
小鼠卵母细胞第一极体的采集与保存   总被引:3,自引:0,他引:3  
用孕马血清(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)对6~8周龄的雌性昆明系及ICR系小鼠进行超数排卵处理,从注射hCG后10 h起每间隔2 h采集小鼠的卵丘卵母细胞复合体(COCs),对卵母细胞的第一极体(PbI)进行数量和形态分级统计,并用台盼蓝染色法鉴定第一极体的活力;同时,对新获取的卵丘卵母细胞复合体进行不同温度保存条件试验。结果表明,在注射hCG后12 h所获得的第一极体活性最高;在室温和37℃下,第一极体的活力在6 h后便完全丧失,而在4℃下保存的第一极体,经过48 h后其活力依然良好。  相似文献
2.
建立兔胚胎干细胞系方法的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
3.
利用SAGE库挖掘有功能的假设基因   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用生物信息学方法,从人大动脉内皮细胞(HAECs)低氧处理的基因表达的系列分析(SAGE)中,挖掘出许多与低氧反应相关的假设基因。共预测到369个有功能的假设基因,其表达产物大部分与信号传导和基因的表达调控相关。选择了8个候选基因,RT—PCR验证其是否真正表达,其中7个为真基因。半定量RT—PCR表明,这些基因表达水平的变化在低氧处理的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中得到验证。结果表明:SAGE库中包含丰富的假设基因资源,可以用生物信息学方法从中鉴定与特定生理或病理过程相关的假设基因。  相似文献
4.
简并寡核苷酸引物PCR扩增单细胞基因组的影响因素研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
[目的]研究影响简并寡核苷酸引物聚合酶链反应(degenerate oligonucleotide primed PCR,DOP-PCR)扩增单细胞全基因组的因素。[方法]以单个人外周血淋巴细胞为材料,进行DOP-PCR,研究新鲜细胞与冷藏细胞及采用新鲜和冻存的细胞裂解物为模板对扩增产物的均匀性及特异性的影响。[结果]以新鲜的淋巴细胞为模板与以冷藏的淋巴细胞为模板相比,扩增产物的均匀性相当,特异性上新鲜细胞较好。细胞裂解后立即进行扩增的效果在产物的均匀性及特异性方面均明显优于冻存的细胞裂解物。[结论]对单细胞应用DOP-PCR方法进行全基因组扩增时,应尽量选取新鲜细胞进行裂解,裂解后避免冻存以保证扩增的均匀性及特异性。  相似文献
5.
将不同剂量的Epostane(100μg、50μg、25μg)与单层培养的颗粒细胞作用1.5小时,尔后用PGF2α刺激超数排卵处理的幼龄小鼠颗粒细胞、LH刺激成熟小鼠颗粒细胞的激素合成。结果表明,Epostane能抑制颗粒细胞内3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)活性,但超数排卵处理的小鼠颗粒细胞与成熟小鼠颗粒细胞3β-HSD的反应结果有所不同。  相似文献
6.
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