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1.
以牛乳素为目的基因,构建舍有组氨酸标签、人生长激素信号肽的真核表达栽体,为利用牛乳素在活体动物及培养细胞中的表达提供基因材料.用人工合成hGH-Lacf B的序列与T栽体连接,用Xho Ⅰ和BamH Ⅰ酶切后与相应酶切处理的pVAX1连接,取阳性克隆质粒,用EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ酶切回收舍hGH的pVAX1载体,再与经过PCR扩增的his-Lacf B连接,酶切鉴定及测序.DNA序列分析表明,携带hGH、6xhis和目的基因Lacf B已成功连接到真核表达栽体pVAX1中.  相似文献
2.
[目的]为临床研究和治疗某些病原微生物引起的感染提供依据。[方法]参照LfcinB的氨基酸序列,利用化学合成法合成LfcinB基因并克隆到pPIC9K载体中,转化到酵母菌GS115感受态细胞中,用抗性选择标记G418筛选出高拷贝酵母菌转化子。利用甲醇诱导表达重组LfcinB,经Tricine-SDS-PAGE电泳检测目的蛋白牛乳铁蛋白素的表达情况,同时通过体外抑菌试验检测表达产物的抑菌活性。[结果]提取的酵母菌DNA扩增出1条预期的560bp左右的特异性条带。目的基因已经成功克隆到pPIC9K载体中,并转到酵母菌GS115中而且获得了表达。重组酵母表达上清中牛乳铁蛋白素抗菌肽对沙门氏肠炎杆菌的抗菌活性为42.857IU/ml,表明LfcinB基因的酵母表达载体构建成功。[结论]该研究证明利用化学合成法直接合成编码LfcinB的DNA构建真核表达载体、通过生物发酵工程来制备LfcinB是可行的。  相似文献
3.
选28日龄健康仔猪16头,随机分为4组。1组为对照组,肌肉注射生理盐水;2~4组为试验组,分别肌注重组猪IFN-γ注射液(rpoIFN-γ)4万、40万、400万单位/头,注射液体积均为4 ml,研究rpoIFN-γ对猪外周血T细胞亚群及血清IL-2、IFN-γ含量的影响。结果发现:2组在试验第7天CD3 亚群比例、第7天和第14天CD4 亚群比例及CD4 /CD8 比值、第1天和第3天血清IL-2水平显著高于对照组(P<0.05);3组在试验第14天CD3 和CD4 亚群比例、CD4 /CD8 比值、血清IFN-γ含量,第7天、28天CD8 亚群比例,第14天、21天、28天血清IL-2含量显著高于对照组(P<0.05);4组CD8 亚群比例在第28天显著高于对照组(P<0.05)。表明注射rpoIFN-γ对仔猪的细胞免疫有促进作用,肌注的适宜剂量是40万单位/头。  相似文献
4.
经观察,盐酸二氢埃托啡对麻醉犬具有抑制心肌收缩性能和降低血压的作用。心率、心输出量、平均动脉压、左心室最大收缩压、左心室内压最大上升速率和零负荷状态下心肌最大收缩速度下降,30min降至最低水平,90min恢复至给药前水平。而左心室舒张末压、中心静脉压、体循环总阻力、心室传导间期和房室传导间期无明显变化。  相似文献
5.
 构建胸腺肽αl(Thymosin αl,Tαl)基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行表达,为大量获得胸腺肽αl打下基础。将人工合成的Tαl三串体基因插入到表达载体pET32a后,CaC12法转化大肠杆菌BL21,经氨苄青霉素筛选后用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测BL21中胸腺肽αl的表达。大肠杆菌中检测到与目的蛋白相对分子量(31kD)相符的条带。成功构建了Tαl原核表达载体,该蛋白能在大肠杆菌中表达。  相似文献
6.
【目的】构建水貂生长激素(mGH)基因真核表达载体,并在巴斯德毕赤酵母GS115中进行表达,为大量获得水貂生长激素奠定基础。【方法】将体外合成的水貂生长激素基因插入分泌型表达载体pPIC9K。将重组的pPIC9K-mGH用SacI酶切后,LiC1法转化巴斯德毕赤酵母菌株GS115,经G418筛选后进行甲醇诱导表达,并以SDS-PAGE和Western blot检测酵母上清中水貂生长激素的表达。【结果】酵母上清中可见与目的蛋白相对分子量(31kd)相符的条带,该条带可被水貂生长激素多克隆抗体特异识别。【结论】正确构建了水貂生长激素真核表达载体,该蛋白能在巴斯德毕赤酵母中成功表达。  相似文献
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