薄壳山核桃疮痂病菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用

疮痂病是薄壳山核桃上最具毁灭性的病害,带菌植物材料是传播疮痂病的重要来源。准确、灵敏、快速的检测方法可为该病害流行规律调查和防控提供有力的依据。本文通过比较薄壳山核桃疮痂病菌Venturia effusa及其近似种之间的ITS序列差异,设计了特异性引物和TaqMan探针,建立了薄壳山核桃疮痂病菌的荧光定量PCR检测方法。特异性检测结果表明,该方法可以检测不同地区的薄壳山核桃疮痂病菌菌株,而对其近似种以及薄壳山核桃上的其他真菌均没有信号。本研究建立的检测方法对薄壳山核桃疮痂病菌DNA的最低检测限可达0.5 pg/μL。该方法用于田间样品检测时,检测时间仅需1 h,远快于常规的分离培养法。本研究建立的基于TaqMan探针的荧光定量PCR检测方法为薄壳山核桃疮痂病菌的快速检测和监测提供了有力工具。     

不同基因型谷子品种(系)对干旱胁迫的响应及抗旱性评价

旨在为旱区谷子生产及抗旱育种提供理论依据。以10个谷子品种(系)为研究对象,采用管栽试验,研究了干旱胁迫对不同基因型谷子生长及产量相关性状的影响。结果表明,在干旱胁迫条件下,参试的10个谷子品种(系),叶绿素含量下降的幅度为4.90%~33.11%,株高降低的幅度为9.56%~30.93%,穗长减小的幅度为5.58%~30.90%,穗粗减小的幅度为3.42%~16.34%,单穗重降低的幅度为7.30%~45.71%,单穗粒重降低的幅度为11.83%~54.72%,出谷率降低的幅度为4.89%~16.60%。抗旱性评价结果表明,‘冀谷31’、‘沧谷5号’、‘冀谷19’等3个品种的抗旱性较好。     

普通小麦春化基因VRN1 RNA干扰载体构建及转基因小麦获得

为进一步探究春化基因VRN1在小麦发育进程中的功能,利用荧光定量PCR分析了VRN1基因在不同发育特性小麦品种新春2号、京841中的表达情况。结果表明,随着生育进程的推进,VRN1基因在新春2号叶片和茎尖中表达量均呈上升趋势,VRN1基因在京841叶片中呈波动上升趋势,在茎尖中表达量趋于0;以p FGC5941载体为基础构建含有VRN1反向重复序列的RNA干扰载体,利用农杆菌介导的茎尖转化法转化新春2号获得了再生植株,并通过PCR法检测获得了转基因阳性植株,为从分子水平上实现小麦发育特性遗传改良和创育小麦新种质奠定了基础。     

薄壳山核桃果园良种配置方案初报

为解决山核桃发展的盲目性,给其生产提供参考依据,根据薄壳山核桃优良品种的特性,对生产中常用的品种进行分析、比较和筛选,提出了新建薄壳山核桃果园优良品种配置的初步方案。     

干旱胁迫对银杏叶类黄酮年动态变化的影响

以2年生银杏盆栽实生苗为研究材料,通过人工模拟干旱胁迫环境,探索4个干旱胁迫（土壤含水量分别为田间持水量的75%～80%、55%～60%、40%～45%和30%～35%）对银杏叶黄酮类物质及其季节变化的影响。结果表明：干旱胁迫下,生长季节不同,银杏叶内槲皮素、山柰酚、异鼠李素以及总黄酮含量具有显著差异,4月份萌芽初期和7月初,黄酮类物质含量处于较高水平。适度干旱可以促进银杏黄酮类物质的合成,尤其中度干旱,即土壤相对含水量为田间持水量40%～45%时,有利于叶内黄酮类物质的合成。考虑到叶产量、叶黄酮含量以及采叶与采时的关系等,在实际生产中控制土壤相对含水量达到中度干旱水平,并于7月初及时采收叶片提取黄酮类物质,可以提高黄酮类物质得率,在生产实践中应用。     

薄壳山核桃常规育苗方法改良技术研究

对薄壳山核桃根插繁殖和播种繁殖2种育苗方法的改良技术进行田间实验研究。根插实验采用粗度分组的比较方法,提出了根插繁殖时适宜的粗度及其相应长度;播种实验采用改良露地播种的方法明显提高了播种当年苗木地上部的生长量。     

调控小麦春化发育特性的相关基因研究进展

小麦春化发育过程主要受VRN1、VRN2、VRN3等基因的调控。对小麦春化基因的研究进展及其互作关系进行了综述,指出小麦VRN1基因经低温诱导可以加速植株茎尖由营养生长向生殖生长转变,VRN1的3个部分同源基因的等位变异是小麦春化发育特性差异的主要决定因子;VRN2基因是一个开花抑制因子,其核心作用结构域的单碱基突变会使基因失去功能;VRN3基因被长日照诱导,可促进植株开花,基因的等位差异对小麦开花时间早晚有显著影响。VRN1、VRN2、VRN3 3个主要春化相关基因之间的互作共同调控小麦开花的春化响应途径。     

南京早期引种的薄壳山核桃不同单株果实品质分析

为给薄壳山核桃良种选育、品种改良及果实分类提供参考依据,采用化学分析法,以南京地区早期引种的薄壳山核桃优良单株为研究对象,在对其外部形态指标分析的基础上,就其果实中的粗脂肪、可溶性糖、淀粉、蛋白质含量等品质特征指标进行了测定与分析。测定分析结果表明:不同单株果实中的粗脂肪含量和可溶性蛋白质含量的差异均达到极显著水平,其可溶性糖和淀粉含量的差异显著;薄壳山核桃果实形态特征指标与相关营养物质指标之间不存在显著相关性。主成分分析结果表明:可将反映果实外部形态和品质特征的12个指标划分为果实大小、果仁出油率、果仁碳水化合物这3个主成分,其累积贡献率达83.19%。     

PEG6000渗透处理对油松种子发芽的影响

通过正交试验探讨聚乙二醇（PEG 6000）溶液渗透处理对油松Pinus tabulaeformis种子萌发的影响。利用不同处理组合（PEG 6000溶液质量分数,处理时间和处理温度）分别对2002年不同含水量种子和2004年人工老化不同时间的种子进行预处理,并进行棉床发芽试验,对种子发芽率、发芽指数和活力指数进行统计分析,并筛选出最佳处理组合。综合各指标获得以下最佳处理组合,2002年种子：含水量9.84%和6.03%＋200 g.kg-1PEG 6000＋处理时间1d;2004年种子：人工老化0 d＋200 g.kg-1PEG 6000＋处理温度25℃＋处理时间2 d。种子发芽率较高,发芽较整齐。PEG 6000溶液渗透处理可以促进油松种子萌发,溶液质量分数、处理时间和处理温度对处理效果具有明显影响;油松种子发芽的适宜含水量范围较大,但含水量太低则会抑制种子萌发;人工老化可以模拟自然老化种子活力变化,PEG渗透处理有利于老化种子恢复活力。     

均匀设计优化超声波辅助乙醇提取银杏叶黄酮

以银杏叶为材料,通过超声波辅助乙醇法提取银杏叶黄酮,采用U30(105×3)混合水平均匀设计对影响超声波乙醇法提取效果的料液比、乙醇浓度、提取时间、提取温度、电磁波功率和频率等6项因素进行考查,通过逐步回归分析获得最佳理论组合。最佳提取条件:料液比1∶50、乙醇体积分数95%,超声功率100 W、超声频率1 s-1 s、提取温度67℃、提取时间45 m in;黄酮化合物提取得率为37.792 mg.g-1,并经实验证实优化提取工艺黄酮得率为36.985 mg.g-1。结果表明,均匀设计高效科学,超声波辅助乙醇提取银杏叶黄酮可用于工厂化提取黄酮类物质。