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1.
单精注射法生产转基因小鼠的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
精子胞质内显微受精技术(ICSI)作为辅助受精的一种手段,将体外受精研究和胚胎的显微操作技术结合起来,比以往对精子质量的要求大大降低,使其无论在畜牧业生产实践还是在哺乳动物的生殖生理基础研究中都有着十分重要的意义。本研究用小鼠精子及小鼠精子与GFP基因孵育后对小鼠卵母细胞进行ICSI,获得子代鼠。提取鼠尾基因组DNA,应用PCR、Southern blot进行整合检测。在发育至成年的11只小鼠中经PCR和Southernblot检测到3只阳性(27.3%)。结果表明,利用ICSI技术可以高效地生产转基因小鼠。  相似文献   
2.
环境激素生殖毒性作用的研究进展   总被引:17,自引:0,他引:17  
  相似文献   
3.
多氯联苯对鸡胚睾丸结构的损伤作用   总被引:5,自引:3,他引:2  
选用海兰鸡作为实验动物 ,研究了多氯联苯 (polychlorinated biphenyl,PCB)对鸡胚胎期性腺发育和生殖细胞分化的影响。在入孵前将多氯联苯商业混合物 Aroclor 12 5 4花生油制剂注入海兰种蛋卵黄内 ,试验 、 、 组剂量分别为 1、10、10 0 μg/枚 ,体积为 10 0 μL,对照组注射等体积花生油 ,统计分析死亡率和孵化率 ,并取出新出壳雏鸡的性腺进行组织学观察。结果表明 ,雄性雏鸡的睾丸结构发生明显改变 ,与对照组相比 ,其横截面积、精细管直径和精细管面积占睾丸横截面积的百分比显著降低。在 组 ,雄性雏鸡的大部分精细管降解甚至消失 ,其睾丸内精细胞的分化受到了不同程度的抑制 ,几乎所有生殖细胞都发生了核固缩和胞质空泡化 ,而在 、 组则只有散在的发生。本试验结果表明 ,PCB干扰鸡胚性腺的发育 ,并具有抑制禽类睾丸发育和精原细胞分化的作用。  相似文献   
4.
单精注射法生产转GFP基因猪胚胎的研究   总被引:1,自引:1,他引:1  
卵胞质内单精子注射(ICSI)的出现为治疗人类男性不育提供了新的途径。作为一种家畜胚胎工程新技术,ICSI可以解决猪的多精子受精问题。本研究用冷冻/解冻的猪精子与GFP基因孵育后对猪IVM卵母细胞进行ICSI,通过对猪ICSI卵母细胞发育能力和基因表达效率的分析,初步研究以精子为载体的转基因与卵细胞质内单精注射相结合的技术(SMGT-ICSI)生产转基因猪胚胎的技术路线的可行性。用GFP基因转染的精子注射后化学激活的ICSI卵母细胞基因表达率显著高于电激活处理的ICSI卵母细胞的基因表达率。用精子头部注射的猪卵母细胞和用完整精子注射的猪卵母细胞总基因表达效率无显著差异(P>0.05)。结果表明,用冷冻/解冻后的猪精子或精子头部与外源DNA孵育后通过ICSI方法生产转基因胚胎是可行的。  相似文献   
5.
环境激素生殖毒性作用的研究进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
环境激素如多氯联苯和二恶英等由环境进入食物链,在动物和人的脂肪中蓄积,通过激素样作用导致动物的生殖失败和人类的流产以及生殖器官癌症,影响动物和人的生殖机能.环境激素的激素样作用已受到许多国家的关注,有关这方面的研究已取得许多进展.  相似文献   
6.
多氯联苯对鸡胚卵巢发育和配子分化的影响   总被引:9,自引:0,他引:9  
禽类的肉和蛋产品含有大量的脂肪,可蓄积高浓度的多氯联苯(PCB)和其他环境污染物从而影响动物和人类健康,试验选用鸡作为实验动物研究了PCB对胚胎期卵巢发育和生殖细胞分化的影响,在人孵前将Aroclor 1254注入海兰种蛋的卵黄内,剂量分别为0,1,10和100ug/枚,取出新出壳雏鸡的卵巢进行组织学研究,结果表明,PCB处理后,鸡胚的卵化率与对照组相比明显下降,而且死胚都发生了不同程度的水肿;雌性雏鸡左侧卵巢横截面积,皮质厚度和皮质内的卵母细胞数均比对照组显增加;只有个别的卵母细胞发生了核固缩和胞质空泡化,本研究表明PCB干扰鸡胚卵巢的发育,首次揭示了PCB促进卵原细胞分化的作用。  相似文献   
7.
由于传统显微注射法具有操作繁琐、技术要求高和外源基因导入率低等局限性,本试验对常规显微注射法进行改进,旨在建立一套比较完善的水平显微注射方法。采用水平微注射系统,将外源DNA片段导入胚胎的雄原核中,获得子代鼠,分娩后3周提取鼠尾基因组DNA,PCR法筛选转基因阳性鼠。本试验采用Puc/BLG IN S和Chym os in基因,共使用710枚鼠原核胚进行研究,胚胎经注射后移植了25只受体,产下仔鼠77只;妊娠率分别为33.3%(5/15)和50%(5/10),胚胎成活率分别为9.47%(41/433)和l3.00%(36/277),阳性率分别为4.88%(2/41)和8.33%(3/36)。将阳性雌鼠配种妊娠后,对外源基因整合情况进行检测,结果表明初步获得了转基因阳性小鼠。  相似文献   
8.
 在受精蛋孵化第3天从气室注入100 μl生理盐水或芳香化酶抑制剂(AI),出雏后常规饲养到8月龄性成熟,观察其性行为,检测血清性激素水平,观察下丘脑视前内侧核(POM)形态结构变化。结果发现,AI处理母鸡获得雄性交配行为,血中雌二醇(E2)和睾酮(T)含量发生变化,雄性交配频率与血清T/E2 比呈正相关。1日龄雌雄雏鸡POM细胞大小和形态无明显差异,AI处理后细胞均变大;性反转母鸡POM细胞形态较正常母鸡无明显变化,但细胞密度降低,细胞变小。结果表明,在胚胎期抑制芳香化酶活性可以引起血清性激素水平、性行为雄  相似文献   
9.
抑制芳香化酶活性对母鸡性腺分化和性行为的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
为研究雌激素在鸡性腺和性行为分化过程中的作用,本试验在受精蛋孵化第3天气室注入100μL生理盐水或芳香化酶抑制剂(AI),出雏后常规饲养到8月龄性成熟,观察其性行为的表现,检测性腺结构和血清性激素水平.结果发现,AI处理获得的性反转母鸡出现雄性第二性征和雄性交配行为,性腺形态和组织学检查结果表明其性腺得到了不同程度的反转(1)完全反转母鸡右侧性腺发育成为睾丸,而左侧性腺出现不同程度的反转.两侧性腺均出现精细管结构,管径较正常窄,发育不完整,精细管内大量分布生殖细胞,右侧性腺的间质较左侧发达;(2)不完全反转母鸡的右侧性腺退化,左侧仍为完整卵巢.血清中雌二醇(E2)含量为不完全反转母鸡>正常母鸡>完全反转母鸡>正常公鸡;睾酮(T)含量为完全反转母鸡>不完全反转母鸡>正常公鸡>正常母鸡,雄性交配频率与血清T/E2的比值呈正相关.以上结果表明,在性分化前用AI阻断雌激素的合成可引起雌性性腺结构和激素分泌功能及性行为雄性化,而血清T和E2含量及其比值决定了性反转母鸡雄性交配行为的频率和强度.  相似文献   
10.
模拟发情期母牛体内类固醇激素水平,在培养乏情期母牛输卵管上皮细胞的体系中添加雌二醇(E2)、孕酮(P)和血小板激活因子(platelet activating factor,PAF),以诱导细胞的分泌作用。借助Northern的斑点杂交技术分析输卵管上皮特异性糖蛋白(OGP)基因RNA水平,研究激素及生长因子对体外培养的乏情期母牛输卵管上皮细胞分泌OGP的影响。结果显示:E2、P和PAF可以促进乏情期母牛输卵管上皮细胞OGP基因的表达。  相似文献   
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