2016-2017年江西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查及ORF5基因变异分析

为了解近年来江西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）分子流行病学和其遗传变异情况,本次调查于2016-2017年从江西省各地区规模化猪场采集453份疑似猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）的病料,采用RT-PCR方法对所有病料进行检测。结果发现,其中321份病料为PRRSV阳性,阳性率为70.86%,各地区的阳性率在19.15%~84.85%之间。挑选14份阳性样品测序后,经ORF5基因序列分析,江西地区各PRRSV毒株ORF5基因的核苷酸同源性为83%~100%,PRRSV流行毒株与参考毒株的同源性在59.9%~98.5%之间。基于ORF5基因的进化树分析表明,14个测序毒株均为美洲型毒株,其中有4株为基因亚型Ⅰ,即高致病性毒株（HP-PRRSV）;3株为基因亚型Ⅱ,即经典毒株;3株为基因亚型Ⅲ,即NADC30-like毒株;4株为新出现的基因亚型Ⅳ。氨基酸序列比对分析表明,基因亚型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ毒株ORF5基因编码的GP5蛋白氨基酸在3个表位及2个重要的抗原相关区域存在较大变异,其中以NADC30毒株为代表的基因亚型Ⅲ毒株和以GD1404毒株为代表的基因亚型Ⅳ毒株均表现出独有的氨基酸变异,这些变异可能会影响GP5蛋白的免疫原性。本次调查结果表明,2016-2017年江西地区PRRSV流行出现了新形势,美洲型毒株出现了多基因亚型共同存在的局面,以高致病性毒株（HP-PRRSV）为主,NADC30-like毒株和新基因亚型等新毒株的比例较高,同时还存在经典毒株;持续实时监测PRRSV的毒株流行和变异情况,可为临床诊断、药物和疫苗开发及PRRS的科学防控提供依据。     

Ⅱ、轻度和中度热应激

Ⅱ、轻度和中度热应激花象柏，周吉薇，胡楠，唐玉新，刘海生，王小琴（江西农业大学畜牧兽医学院３３００４５）温上升速度几乎是后者的２．５倍，再以３９℃饮水组为例，平均体温从４１．６２７℃Ｃ升至４３．４７７℃仅用１小时，而从４３．４７７℃升至４４．０９４℃...     

中国泰和乌骨鸡MHC与其繁殖性能相关的研究

实验采用四种限制性内切酶（ＨｈａＩ、ＥｃｏＲＶ、ＨａｅⅢ、Ｘｂａｉ）,运用ＰＣＲ－ＲＦＬＰＳ的方法,研究了泰和乌骨鸡ＭＨＣ分子遗传多态笥,探讨了各基因型与繁殖性能的相关关系,结果表明：四种酶切区别的Ｂ－ＬＩＩＢβ１外元的多态笥及ＭＨＣ基因组合型对蛋重及受精蛋孵化率影响差异均不显著。ＥｃｏＲＶ及ＸｂａＩ酶切多态性对产蛋数的多态性及ＭＨＣ基因组合型对蛋重及受精蛋孵化率影响差异均不显著。ＥｃｏＲＶ及Ｘｂ     

对《杂草科学》栏目的浅析与探讨

《杂草科学》是江苏省杂草研究会主办的专业性科技期刊,创刊于1982年,现已公开发行到全国除西藏、台湾之外的29个省、市、自治区。稿源遍及全国23个省、市、自治区。该刊内容丰富,科学性、实用性强,在我国杂草界享有盛誉。最近,笔者对该刊1983～1990年共8年25期刊载的495条文献和该刊所设计的栏目及作者分布情况进行统计分析,以探讨该刊栏日设计的合理性,为广大农业科技工作者更好地利用该刊提供参考。     

微量干血纸McAb ElisA竞争法检测猪瘟抗体

用抗ＨＲｐ－ＳＦＶＭｃＡｂ建立了ＥｌｉｓＡ竞争方法。对７２份注射兔化疫苗后的猪微量于血纸浸出液和血清进行检测，结果表明该法具有特异、敏感、快速和简便等特点，与ＳＰＡ－ＥｌｉｓＡ检测结果呈现显著正相关，互相一致，它正确反映了猪群注射疫苗后的免疫水平，因此该法可用于免疫监测。     

早期断奶应激(EWS)对仔猪影响的研究——对血液生理指数和血清蛋白成分变化影响的试验观察

试验检测了ＥＷＳ对仔猪在断奶前和断奶后的血液生理指数和血清蛋白质指数的变化情况，结果表明：（１）在血液生理指数方面，断奶１０ｄ后，红细胞、血红蛋白和白细胞数均有所减少，特别是白细胞减少２５．３２％（Ｐ＜０．０１），在白细胞分类比值中，断奶１０ｄ后，淋巴细胞和嗜酸性白细胞分别减少１０．８６％（Ｐ＜０．０５）和３６．３６％（Ｐ＜０．０１），嗜中性白细胞增加１８．３４％（Ｐ＜０．０５），这是机体抵抗力降低的标志。至断奶２０～３０ｄ后，上述各项指数基本恢复和超过断奶前原有水平。（２）在血清蛋白质成分指数变化方面，断奶１０ｄ后，血清总蛋白量减少２２．５４％（Ｐ＜０．０１），白蛋白比值增加３．９４％（Ｐ＞０．０５），而γ－球蛋白则减少１２．３９％（Ｐ＜０．０５），这也是机体抵抗力降低的标志。至断奶３０ｄ后，血清总蛋白量已恢复至断奶前原有水平，白蛋白减少７．３９％（Ｐ＜０．０５），γ－球蛋白则增加１５．６０％（Ｐ＜０．０５），表明仔猪已适应于新环境生活，机体抵抗力已获得恢复和提高     

抗猪瘟病毒单克隆抗体的研究——Ⅱ抗猪瘟兔化弱毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用聚乙二醇沉淀浓缩纯化猪瘟兔化弱毒中国株(SFV-C)免疫 BALB/C 小鼠,取其脾脏,制备淋巴细胞,与 FO 骨髓瘤细胞融合,经 EliSA 检测和有限稀释法克隆化,最后筛选出5株对SFV 的单克隆抗体杂交瘤细胞.所制成的腹水抗体,一株只对 SFV-C 发生特异性反应,四株与SFV-S,SFV-F 及 BVDV oregon 发生微弱的交叉反应.细胞上清液的 EliSA 效价为1:800～1600,腹水效价为1:10~6～10~7.     

非洲猪瘟病毒p72蛋白的原核表达和多克隆抗体制备

[目的]非洲猪瘟(african swine fever,ASF)是一种以猪急性发病、高死亡率为典型特征的病毒病,其病原非洲猪瘟病毒(ASF virus,ASFV)在中国的暴发给中国养猪业造成重大损失.p72蛋白是ASFV的主要衣壳蛋白,能够有效诱导机体产生特异性抗体,常被利用于检测试剂盒的备成.[方法]构建了p72全长(pET-28a-ASFV-p72)及1-171aa截短突变体(pET-28a-ASFV-p72-(1-171))原核表达质粒,通过E.coli原核表达系统表达并纯化了p72全长及1-171aa融合蛋白.该2种蛋白经过4次免疫日本大耳白Balb/C兔后,获得效价皆为大于1:819200的多抗血清.[结果]通过间接免疫荧光实验和Western blot检测2种多抗均能与真核表达的p72蛋白发生特异性反应.[结论]制备的针对p72多克隆抗体为后续诊断试剂盒的研发提供依据.     

新型冠状病毒核衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

[目的]当前,新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)导致的疫情在全球大流行,严重危害人类的生命健康.研究拟制备并鉴定针对SARS-CoV-2核衣壳蛋白(nucleocapsid,N)的单克隆抗体,为SARS-CoV-2新型快速检测方法的创制奠定基础.[方法]纯化原核表达的SARS-CoV-2 N重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,经过4次免疫后将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,并通过western blot和间接免疫荧光试验鉴定抗体的反应性.[结果]经3次亚克隆,试验获得了2株能够稳定分泌抗原特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2D11和8G6;并且制备的抗体与真核表达的SARS-CoV-2 N蛋白反应原性良好.[结论]研究制备的单克隆抗体能够用于SARS-CoV-2的检测.     

发酵床垫料水分调控系统设计

为解决发酵床垫料部分区域积水导致的烂床等问题,试验确定了＆quot;热气脉动法＆quot;的垫料水分调控方法,并设计了一套发酵床垫料水分调控设施设备以 STC89C52单片机为核心,WL433A无线通讯模块进行数据的传输,使用 VB.NET进行上位机的开发, Access为后台数据库,实现了对发酵床垫料内部信息的实时采集、无线传输、自动存储以及远程实时监测等,为发酵床垫料水分调控的研究提供了设施基础,在一定程度上推动了养殖设施设备的发展。