一种有效的菊花总RNA提取方法

菊花组织或器官中含有大量的酚类、多糖、蛋白质等次生代谢物质，影响了菊花总RNA的提取质量。本研究用改良TRIZOL法提取菊花不同器官总RNA，并用凝胶电泳、紫外分光光度计对提取的总RNA质量和完整性进行检测，并对叶片总RNA进行反转录，通过RT-PCR扩增了菊花管家基因Actin的部分片断。结果表明，采用改良TRIZOL法提取的RNA条带清晰、完整性好、质量高，其中A260/A280比值在2.08~2.19。通过RT-PCR从叶片中扩增出了目的基因cDNA片断。该方法是一种快速、有效的提取菊花总RNA的方法；该方法适用于根、茎、叶、花等器官或组织总RNA的提取，可作为菊花不同组织和器官总RNA提取的通用方法。     

花香基因工程研究进展

综述了花香物质生物合成途径及其相关酶和基因的研究进展;探讨了基因工程调控及改良植物花香的策略;同时简要评述了花香基因工程研究中存在的问题并展望了其应用前景.     

菊花基因工程研究进展

菊花遗传背景复杂,传统育种往往不能获得预期的目的。生物技术为菊花育种提供了一条新的途径。现就菊花基因工程中的遗传转化技术进行了综述,分析了影响菊花遗传转化的主要因素,并概述了菊花基因工程中存在的问题。     

地被菊品种对镰孢菌侵染的响应差异及抗性综合评定

 地被菊枯萎病由镰孢菌引起,是一种土传性病害,严重威胁地被菊生产。本试验用2个强致病力镰孢菌菌株,即尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、茄镰孢菌(F. solani)接种5个地被菊品种的幼苗,测定了病菌侵染下不同品种的形态、生理和生化响应的差异,以建立抗病品种筛选的生理和生化指标。地被菊品种间抗性水平可根据病情指数划分;受病菌侵染后,叶片叶绿素含量下降,抗病品种‘俏粉阁'叶绿素含量相对较高;丙二醛含量增加,抗病品种‘乳荷'和‘俏粉阁'的丙二醛含量显著低于感病品种‘玲珑';在病菌侵染早期,脯氨酸含量、超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性在抗病品种受到迅速诱导增加,随后下降。运用隶属函数对其抗病能力进行综合评定,地被菊品种对尖孢镰孢菌(F. oxysporum)抗病性从强到弱依次为:‘俏粉阁'＞‘乳荷'＞‘火焰'＞‘鲜红'＞‘玲珑',地被菊品种对茄镰孢菌(F. solani)抗病性从强到弱依次为:‘俏粉阁'＞‘乳荷'＞‘鲜红'＞‘火焰'＞‘玲珑',为地被菊生产和开展菊花抗病机理研究提供了依据。     

不同营养生长时间对地被菊生长开花的影响

以地被菊俏粉阁为试材,分期短日照处理40 d(当日17:00至次日8:00),设置5个处理(以不遮光为对照),测定植株生长发育的相关指标并记录开花进程,探求营养生长时间对菊花生长开花的影响。结果表明,光周期处理前,T4处理(营养生长40 d)俏粉阁根系长度、鲜质量及干质量显著高于其他处理;俏粉阁株高、冠幅随着营养生长时间的增加逐渐增加,处理22～28 d,T2,T3,T4处理株高、冠幅生长量显著高于其他处理,处理36～42 d,对照处理株高、冠幅生长量最大;俏粉阁花期随着营养生长时间的增加出现延迟,T4处理植株到达花期各阶段的间隔时间最短,开花最晚,但各处理植株开花总时长差异不显著;T4处理植株开花量、舌状花长度、花径、重瓣性及花粉活力显著高于其他处理。随着营养生长时间的增加,俏粉阁株高、冠幅、根系长度等逐渐增加,盛花期花朵品质提高,但开花出现延迟。当营养生长20 d时进行短日诱导,生长速度最快,开花最早,花朵品质较好。     

AP1基因转化地被菊品种‘玉人面’的研究

地被菊(Chrysanthemum morifolium)是重要的地被植物,目前的主栽品种大都属短日照敏感型品种,花期集中在秋季,靠人工措施实现周年生产,生产成本高,花的品质差.利用基因工程改变短日照敏感型地被菊品种的花期有重大意义.     

不同基因型矮牵牛高频再生体系建立的研究

为建立不同矮牵牛品种的高频再生体系,以10个矮牵牛品种为材料,研究了不同基因型、不同生长调节剂配比、不同接种方式、叶片不同部位和不同外植体对不定芽再生的影响。研究结果表明:基因型是影响不定芽再生的重要因素之一,从10个品种中筛选获得了5个品种的高频再生体系;6-BA和NAA及其配比极显著影响矮牵牛不定芽再生率和平均不定芽再生数量,其中0.2 mg.L-1NAA极显著的促进了矮牵牛不定芽再生,其次是0.1 mg.L-1NAA,而高浓度NAA抑制不定芽再生;不同品种适宜的分化培养基不同,筛选获得了不同品种适宜的分化培养基;不同接种方式对不同品种不定芽再生影响不同,其中不同接种方式对黄金紫罗兰的不定芽再生有极显著影响,对黄金肉红、珊瑚红则没有影响;叶片不同部位极显著影响黄金紫罗兰星条不定芽的再生,对其它品种没有影响;叶片外植体是矮牵牛不定芽再生的最佳外植体。     

‘玉人面’对碱胁迫的形态和生理响应

为探讨茶菊‘玉人面’对碱胁迫的耐受程度,采用营养液砂培方法,研究了不同浓度Na2CO3(0、10、30、50、70、90mmol·L-1)胁迫对植株形态、生理生化和光合生长的影响。结果表明:随着NaCO3胁迫浓度的增强,植株叶细胞膜透性(Cond)、丙二醛(MDA)含量增加;脯氨酸(Pro)含量、可溶性蛋白(SPC)含量上升,可溶性糖(SS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性呈先升后降趋势,过氧化物酶(POD)持续升高;叶绿素含量(Chl)、净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)降低,胞间CO2浓度(Ci)先降后升;花序直径缩短,花序畸形率升高,花产量显著下降。Na2CO3胁迫显著抑制植株的生长,抑制程度随胁迫浓度提高而增强,茶菊‘玉人面’耐碱的极限浓度为50mmol·L-1。     

授粉方法对克服菊科近缘属杂交受精前障碍的影响

【目的】为克服菊科近缘属杂交受精前障碍,探究不同授粉方法对菊花柱头上异缘花粉附着及萌发的影响.【方法】以太行菊属长裂太行菊和地被菊‘赛牡丹’为材料,以常规授粉为对照,采用不同液体介质(蔗糖、蔗糖+Ca~(2+)、蔗糖+硼酸)混入花粉和不同浓度NaCl处理柱头,授粉后24 h内用荧光显微观察柱头上花粉附着、萌发及花粉管生长情况.【结果】授粉后8 h,100 mg/L蔗糖花粉的附着数、萌发数最大,分别为对照的4.08倍、1.09倍;授粉后2 h,0.1 mg/L Ca~(2+)处理附着及萌发的花粉最多,分别为8.1、3.6粒;授粉后1 h,0.025 mg/L硼酸处理花粉的萌发数显著多于其他处理,不同浓度硼酸处理后的花粉附着量均低于对照;8%NaCl处理柱头0.5 h,授粉后24 h,花粉附着数及萌发数分别为32粒、2.4粒,显著多于其他处理,且花粉管生长正常.【结论】0.025 mg/L硼酸对花粉萌发表现出一定的促进作用.100 mg/L蔗糖、0.1 mg/LCa~(2+)、8%NaCl处理柱头均可显著促进长裂太行菊柱头上异缘花粉附着、萌发及花粉管生长,有利于克服太行菊属和菊属杂交受精前障碍.     

藜麦β-香树酯醇合酶和鲨烯合酶基因的克隆与表达

为了探明藜麦皂苷生物合成的分子机制,试验以藜麦品种陇藜1号为材料,利用已有的转录数据,通过RT-PCR技术鉴定参与三萜皂苷生物合成关键酶基因,采用生物信息学分析方法进行了基因编码蛋白保守结构域、蛋白二级结构及系统发育树的构建,并利用半定量RT-PCR方法进行了目的基因在籽粒不同发育时期和植株不同部位(根、茎、叶和籽粒)表达水平的研究。试验克隆得到三萜烯皂苷生物合成途径中关键酶编码基因CqSS1、CqSS2和CqbAS的cDNA全长序列。半定量RT-PCR表达分析表明,CqSS1和CqbAS在叶片、籽粒中表达量最高,各基因在籽粒不同发育时期的表达量间无显著差异。本研究对藜麦三萜皂苷生物合成途径中关键酶基因表达模式的研究,将为进一步探明藜麦皂苷生物合成的分子机制及发掘影响藜麦皂苷含量的关键基因奠定基础。