饮水温度对崂山奶山羊产奶性能的影响

为了研究在寒冷季节饮水温度对崂山奶山羊产奶量及主要乳成分的影响,给奶山羊饮用16、22、28℃的温水,以自然水温为对照,结果发现:奶山羊的饮水量和产奶量随水温升高而增加,从低到高其产奶量比CK组产奶量分别显著提高16.2%、18.4%、23.1%(P<0.05);随饮水温度升高,乳脂率和乳蛋白率整体呈现递减趋势,但22℃组高于16℃组和28℃组,建议在冬季寒冷季节给奶山羊饮用22℃温水为宜,既能保证产奶量又对乳品质影响较小。     

E2、P4、OT和PGF2α对猪PBMC活性的影响

应用MTT比色法,以四因素四水平L16(45)的正交试验测定E2、P4、OT和PGF2α四种激素对猪的外周血单个核细胞(PBMC)的转化效果。结果显示,所选的4种激素在不同浓度组合时刺激PBMC转化的作用不同。这4种激素对PBMC的转化影响的强度依次为:PGF2α、OT、E2、P4。在试验剂量范围内,E20.1 pg/mL、P41 ng/mL、OT 10 pg/mL、PGF2α100 ng/mL时,其共同作用对PBMC转化活性最强。提示在不同生理时期,由于机体内各种激素浓度变化不同,免疫系统也发生相应的变化。     

犬瘟热病毒一步RT-PCR检测方法的建立

根据犬瘟热病毒(CDV)弱毒株Onderstepoort的核蛋白(N)基因的相对保守区序列设计了1对特异性寡聚核苷酸引物,在国内首次建立了CDV一步RT-PCR检测方法。该法可以特异地扩增出N基因265 bp大小的目的片段,可以检测到0.043 6μg/mL的总RNA,与两步法RT-PCR的敏感性相当。对25例犬瘟热临床疑似病例样品,一步法RT-PCR检测出17份阳性,与两步法RT-PCR的阳性符合率达94.4%,胶体金检测试纸条检测出13份阳性。研究结果表明,建立的CDV一步法RT-PCR检测方便、敏感、特异,适用于CDV临床病料的检测和分子流行病学调查。     

山羊子宫内膜基质细胞的分离培养及鉴定

对山羊子宫内膜基质细胞进行分离与体外培养,研究其生长特性,并对其进行免疫细胞化学染色鉴定。结果表明,山羊子宫内膜在37℃条件下,以2 g／L的胶原酶Ⅰ型消化3～4 h效果最好;采用过滤—低速离心—沉降相结合的方法分离山羊子宫内膜基质细胞效果较好,所得细胞在培养后0．5 h开始贴壁,培养12 h后,可见梭形和多角形2种形态的细胞,3～4 d呈网状铺满皿底,有明显的重叠生长现象;免疫细胞化学染色显示这2种形态的细胞均表达波形蛋白,阳性率可达95％以上,不表达角蛋白。说明采用本文所述的消化和分离方法可获得高纯度的子宫内膜基质细胞。     

奶牛乳汁中体细胞计数方法的改进

乳汁中细胞计数或者说是白细胞计数在奶牛乳房炎监测中已运用有百多年的历史。由于乳中体细胞的变化与炎性反应密切相关，体细胞计数(SCC)被好多国家认为是监控乳汁质量的标准方法。在美国及一些发达国家的奶牛场，SCC被作为一种常规监控方法，运用于每月的定期检测中，这项技术在许多发展中国家也得到了很好的推广。如今，除大型奶牛场应用仪器检测乳中体细胞外，实验室经常采用的就是Little和Plastrige法。但由于乳汁中脂肪的影响，使得后两种方法不大好操作，尤其对初乳和泌乳期末乳汁中体细胞无法进行计数。经过在实践中长期摸索，总结出一种简便而实用性较强的方法，现报道如下。     

崂山奶山羊乳腺上皮细胞系的建立及鉴定

实验采用组织块培养法、高密度培养和连续传代法等对崂山奶山羊乳腺上皮细胞进行培养、传代及鉴定。在对纯化的乳腺上皮细胞进行形态观察和生长动力学分析的基础上,进行染色体核型分析、免疫组化、质粒转染等方面的研究。结果表明:利用组织块培养法能够有效地进行崂山奶山羊乳腺上皮细胞的培养,并已传至40代,核型分析其染色体众数为60条,证明得到具有正常形态的崂山奶山羊乳腺细胞;进一步免疫组化显示培养细胞的波形蛋白、细胞上皮膜抗原、角蛋白和β-酪蛋白等上皮细胞标记蛋白呈阳性,证明该细胞为崂山奶山羊乳腺上皮细胞;最后油红染色可见到明显的脂肪滴,外源质粒PEGFP-N1-H-FABP能够稳定地在培养细胞中表达,表明所获得的细胞具有分泌功能。由此可见,利用组织块培养法能够成功建立崂山奶山羊乳腺上皮细胞系,并且所培养的乳腺上皮细胞具备一定的泌乳潜能。     

奶牛隐性乳腺炎病原菌的分离鉴定

从2002年10月起，应用LMT从西安及其周边地区184个乳区的1000头奶牛中抽取了48头，进行奶牛隐性乳腺炎的调查及病原菌的分离鉴定。结果西安及其周边地区患隐性乳腺炎奶牛占总头数的66．7W，患隐性乳腺炎乳区占总乳区的35．4％。4个乳区全阳性者占15．2％。共检出细菌67株，其中金黄色葡萄球菌占总检出菌41．8％。链球菌占总检出菌29．9％。G^ 杆菌与G^-杆菌各3株，分别占总检出菌4．5％。     

附植期孕鼠热应激对胚胎发育及生殖嵴损伤的研究

实验旨在探究附植期热应激对小鼠胚胎发育和生殖嵴损伤的影响。将108只体重为（30±3）g的见栓0.5d(0.5dpc)孕鼠随机分配为对照组（24±1℃室温饲养）、38℃热应激组和40℃热应激组；热应激组于4.5dpc分别以38℃和40℃热应激2h/d，连续7d。记录孕鼠每日体重，于13.5dpc取小鼠胚胎，同时记录胚胎数量、胚胎重量和死亡胚胎数量，统计分析胚胎雌雄比率、含死亡胚胎的子宫比率、胚胎分布异常的子宫占比、胚胎子宫内异常分布比率；采用组织切片及透射电子显微镜观察生殖嵴组织细胞结构的变化。结果显示：与对照组相比，38℃和40℃热应激可降低孕鼠4.5～10.5 dpc和0.5～13.5 dpc体重增长率以及胚胎重量（P<0.05），同时增加胚胎子宫内分布异常比率（P<0.01）;40℃热应激可降低附植胚胎数量及增加胚胎分布异常的子宫占比（P<0.05）;38℃和40℃热应激导致生殖嵴组织细胞间隙明显增大，细胞连接方式多为桥粒连接，粗面内质网及部分线粒体肿胀，溶酶体与自噬泡增多。上述研究结果表明，附植期孕鼠遭受热应激导致胚胎发育迟缓及生殖嵴组织细胞超微结构损伤。     

禽脑脊髓炎病毒的鉴定

对分离到的AEV毒株进行氯仿、乙醚、温度敏感性试验等理化性质及血凝性质的鉴定,表明该毒株理化件质稳定,无血凝性;电镜下观察接毒鸡胚的超薄切片可看到AEV病毒颗粒,大小在25～30 nm.参照AEV的基因序列设计了一对引物,对该病毒进行了特异性扩增,得到了目的片段.证明该分离病毒为AEV毒株,暂定名为AEV HD.