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为对杆状病毒表达系统制备的重组禽腺联病毒进行生物学特性的鉴定,将含GFP报告基因及AAAV两侧末端重复序列的重组杆状病毒rBac-GFP、表达AAAV结构蛋白的重组杆状病毒rBac-VP、表达AAAV功能蛋白的重组杆状病毒rBac-Rep以感染复数为5,同时感染摇瓶培养中的昆虫细胞Sf9,72 h后收集细胞沉淀,反复冻融3~5次后,离心取上清。经滤膜过滤、氯仿抽提和PEG沉淀后,进行电镜观察和Western blot分析,并体外感染鸡成纤维细胞和鸡肝细胞系。SDS-PAGE结果显示,rAAAV得到了较好的纯化,电镜下可观察到大小约20 nm的典型细小病毒样粒子,Western blot分析数据显示rAAAV由3个结构蛋白组成,与野生病毒相似。体外表达试验结果显示,rAAAV能介导GFP报告基因在鸡细胞中稳定持久地表达。表明杆状病毒表达系统制备的rAAAV具有与野生病毒相似的性质,可应用于后继研究和开发应用。 相似文献
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为在鸡蛋清中表达人溶菌酶(hLYZ),将含有hLYZ输卵管特异表达盒的重组禽腺联病毒以每只鸡2×10~(11)经翅静脉注射正常产蛋母鸡,收集蛋清对重组蛋白的表达情况进行检测。RT-PCR结果显示,hLYZ只在输卵管部位表达,Western blot结果显示重组蛋白大小正确,抑菌活性表明注射重组病毒后的蛋清的抑菌活性明显优于正常蛋清的。动态表达水平检测结果显示,注射病毒后第1周即可以检测到重组hLYZ的表达,第5周时表达量最高,达68.3μg/mL,表达时间持续3个月之久。以上结果表明,重组禽腺联病毒能介导人溶菌酶在蛋清中的高效、长时表达,为人溶菌酶的开发应用提供了新途径。 相似文献
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[目的]研究复方犬肠宁胶囊的质量标准.[方法]采用薄层色谱(TLC)法对复方犬肠宁胶囊中的黄连、黄柏、白头翁、黄芪进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱的含量,研究复方犬肠宁胶囊的质量标准.[结果]薄层色谱鉴别表明,样品分离度好,斑点清晰,且阴性对照无干扰;盐酸小檗碱进样量在10.92~ 163.74 μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=39 611X-2387.9(R2 =0.999 8),平均加样回收率为97.60%,相对标准偏差RSD=1.64% (n =6).[结论]该标准操作简便,专属性、稳定性、重复性良好,可用于犬肠宁胶囊的质量检测方法. 相似文献
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根据农业部《兽药试验技术规范汇编》观察了仔猪痢清口服液对小白鼠的亚慢性毒性,试验组分设高、中、低3个剂量组,另设空白对照组,连续给药28d后剖杀各组小鼠。统计学分析结果表明,各组间的体重变化和脏器系数比较无显著差异;各试验组的血常规检测指标、血液生化学检测指标的测定结果与空白对照组测定结果相比差异均不显著;组织病理学检查显示小鼠的主要内脏器官未见明显异常变化。试验结果表明仔猪痢清口服液按临床剂量使用无毒性反应,应用安全可靠。 相似文献
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崔潇婷李冬梅时菲菲王榕 《中国畜禽种业》2023,(2):185-187
腹泻是影响畜禽发育和生长的多发病,它制约着养殖业的发展。我国的中药资源非常丰富,在抗病原微生物的同时,又能改善肠道菌群,并且提高机体免疫力,在畜禽腹泻的防治上具有独特的优势。该文在分析畜禽腹泻病因的基础上,针对细菌性腹泻、病毒性性腹泻、寄生虫性腹泻以及非感染性腹泻等不同情况常使用的抗腹泻中药,结合防治机制对中药防治畜禽腹泻的研究现状进行了全面的阐述,以期为后期的研发提供理论依据。 相似文献
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