PCR法克隆紫穗槐4-香豆酸:CoA连接酶全长cDNA

4 香豆酸 :CoA连接酶 (4CL)是木质素生物合成过程中重要的酶 .该文利用简并寡核苷酸PCR法结合cDNA末端快速扩增PCR法直接获得了紫穗槐 4CLAcDNA全长序列 ,避免了复杂的构建、筛选cDNA文库的过程 .先用简并PCR得到了 4CLA1片段 ,又据此片段设计反向嵌套引物 ,用RACE方法获得未知的 5′和 3′端序列 .所获得的全长 4CLAcDNA ,编码 5 40个氨基酸 .氨基酸序列同源性分析表明4CLA是典型的 4CL蛋白 ,含有预计的AMP binding位点、催化反应区和保守的Cys .     

花粉管通道法转化大豆的分子表征

采用花粉管通道技术将含有gus基因的pBI121质粒DNA导入辽豆14，从处理的100朵花中获得53粒种子。经PCR检测53粒种子的幼苗，共检测出6株阳性植株。采用RT—PCR和GUS组织化学染色法对所获得阳性植株进行检测，其中2株幼苗(T0代17号和33号)均出现阳性结果，进一步对这2株阳性植株进行Southern blot检测，同样获得了阳性结果。上述检测结果表明，gus基因已整合到染色体上并得到了表达。对转基因植株后代进行了PCR跟踪检测，结果从17号株系的28株中检测出19株阳性植株，33号株系的35株幼苗中检测出17株阳性植株，表明gus基因可以在转基因植株后代遗传。本研究结果为大豆花粉管通道转化技术提供了比较充分的分子生物学证据。     

出口生姜高产优质栽培

目前生姜栽培面积逐年扩大，出口量不断增加，常规栽培技术制约了生姜的单产及商品率的提高，为解决这些技术问题，笔者近几年改进常规种植技术，经连续试验推广证明，改进后的技术每667平方米可增产10％～20％，高产地块可达30％，商品率增加20％，纯收益增加1000元～2000元，而且达到……     

土壤解磷微生物作用机理及解磷菌肥对作物生长的影响

综述了根际解磷微生物的生态分布、数量和解磷机制的研究动态,以及其作为解磷菌剂对作物生长影响的机制。     

基因型对大白菜小黑点病发生的影响及抗病品种筛选

根据调查不同品种大白菜小黑点病发生情况,分析了基因型对小黑点病发生的影响,表明小黑点病的发生与基因型有关,这为抗性育种和生产上合理选用品种,避免小黑点病发生提供了依据.     

两株土壤分离菌的解磷能力及对玉米的促生作用

从植物根际的土壤样品中分离筛选出两株高效解磷细菌P_9和P_(28),分别被鉴定为粘质沙雷氏菌和产气肠杆菌.研究了不同环境条件对解磷能力的影响,结果表明,P_(28)耐 3%NaCl(w/v,下同)、28℃是两菌的最适温度、在初始pH 5.5～10.0条件下培养时能够高效溶解Ca_3(PO_4)_2.盆栽试验结果表明,单接种、双接种解磷菌处理的玉米株高、植株干重和磷含量显著高于不接菌对照;单接种P_9处理的玉米明显强于单接种P_(28)处理;将有机肥(M)和磷矿石(RP)作为载体和解磷菌一同混合施入土壤的处理,玉米苗干重,磷含量较单施解磷菌显著增加.     

产气肠杆菌PSB28的解磷机理研究

解磷微生物在提高土壤肥力及促进作物对磷的吸收方面具有重要作用，明确其利用难溶性无机磷的本质在实际应用中具有重要的意义。本文分别在以Ca3(PO4)2和K2HPO4为唯一磷源的培养基中，检测了PSB28的解磷能力，并比较了生长动态和代谢产物的方面差异以分析其代谢难溶性无机磷的机理。结果表明，与含K2HPO4的培养基相比，在以Ca3(PO4)2为唯一磷源的培养基中菌体生长量较大但生长速率较慢，pH略高，呈逐渐降低趋势。HPLC测定结果发现有机酸种类和含量变化明显，且酸性磷酸酶活性明显增强。因此菌株PSB28解磷的主要原因是有机酸的螯合作用，酸性磷酸酶起到间接作用。     

烟曲霉WY-1植酸酶基因的克隆及其在烟草中的表达

以自行筛选的烟曲霉WY-1为出发菌株,通过PCR方法克隆其植酸酶基因,并构建了含有植物信号肽序列的植酸酶基因植物表达载体,利用农杆菌介导的叶盘法对烟草叶片进行了遗传转化.结果表明,PCR鉴定和Southern杂交分析说明植酸酶基因已整合到烟草的基因组中;RT-PCR检测结果证实了植酸酶基因已得到转录表达;酶活性分析表明功能性的植酸酶已成功表达在烟草中,这是烟曲霉植酸酶基因在烟草中的首次表达.     

一种新的耐热性植酸酶基因在烟草中的表达

[目的]探究一种新的耐热性植酸酶基因在烟草中的表达结果。[方法]克隆了泡盛曲霉植酸酶基因编码区全序列,使其在烟草中高效表达,对重组植酸酶与天然植酸酶性质进行初步的分析和比较。[结果]对烟草叶片的植酸酶活性检测结果表明,重组植酸酶基因在烟草中得到较高水平表达,转基因植株的最高植酸酶活力为对照烟草的13倍;对烟草重组植酸酶蛋白的酶学性质进行了初步分析,结果表明重组植酸酶拥有与天然植酸酶同样的最适pH值和最适温度,耐热性略微下降,但在80℃处理15 min后仍有33%的残余酶活力。[结论]该研究为该植酸酶基因转化饲料作物的开发提供理论依据,也为泡盛曲霉植酸酶的工业化生产开辟了新的途径。