茶树CsWRKYIIcs转录因子的克隆及功能分析

【目的】以‘陕茶1号’为材料,克隆CsWRKYIIcs转录因子并分析序列特征,了解其在不同组织和非生物胁迫下的表达模式以及转录活性,为深入研究茶树在逆境胁迫中的功能提供理论依据。【方法】根据茶树基因组数据库注释的WRKY序列设计特异性引物,采用RT-PCR技术从‘陕茶1号’中扩增CsWRKYIIcs的cDNA序列,用生物信息工具分析序列的特点,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）研究基因的表达模式,用酵母试验验证其转录活性。【结果】获得9条CsWRKYIIcs的cDNA序列,开放阅读框长度分别为561、960、936、978、897、912、720、1 008和969 bp,分别编码186、319、311、325、298、303、239、335、322个氨基酸。除了CsWRKYIIc7缺少锌指序列外,其他CsWRKYIIcs均含有1个WRKY保守结构域和典型的C₂H₂型锌指结构。不同物种中的WRKYIIcs具有相似的保守基序,而茶树CsWRKYIIcs和拟南芥、葡萄等双子叶植物的WRKYIIcs氨基酸序列相似性更高。另外,CsWRKYIIcs启动子区域均预测到多个与非生物胁迫相关的顺式作用元件,意味着其可能参与非生物胁迫响应。qRT-PCR结果表明,9个CsWRKYIIcs在根和花中的表达量高于茎和叶,具有一定的特异性。同时,在干旱、ABA、高温和高盐胁迫下被不同程度的诱导表达,其中CsWRKYIIc1和CsWRKYIIc7的表达量变化显著,与推定的顺式作用元件结果相符。酵母试验表明9个茶树CsWRKYIIcs均具有转录激活活性。【结论】克隆获得9个茶树CsWRKYIIcs转录因子,它们参与了茶树对ABA、干旱、高温和高盐胁迫的响应,也可能发挥转录激活因子的调控作用。CsWRKYIIc1和CsWRKYIIc7可作为候选基因深入研究茶树的抗逆功能。     

γ射线辐照对四种蔬菜叶片SOD活性和MDA含量影响的回归分析

本研究采用曲线拟合、建立相应回归数学模型的方法 ,定量地描述了γ射线对蔬菜叶片中SOD、POD活性和MDA含量影响的动态过程 ;通过对上述动态方程参数的求解与分析 ,4种供试蔬菜对电离辐射的敏感性依次为落葵、莴苣和生菜、青菜。     

ATP发光技术测定辐照前脱水蔬菜和调味品的含菌量

用ATP发光技术测定脱水蔬菜和调味品的初始含菌量,发现脱水蔬菜和调味品中细菌ATP的生物发光强度与其初始含菌量之间显著相关,从样品的制备到获得ATP发光强度结果的检测过程仅需1～2h。该技术可用于辐照灭菌前的微生物检测。     

路易斯安娜鸢尾对重金属镉的吸收、积累及其抗性的研究

采用溶液培养法,研究0、10、100、500μmol·L-1浓度CdCl2处理对路易斯安娜鸢尾外部形态、镉积累量、叶绿素含量、光合参数以及抗氧化酶活性等各项指标的影响。结果表明:低浓度Cd2+处理对路易斯安娜鸢尾生长无明显影响,随着Cd2+胁迫强度上升,根长显著降低,叶绿素和光合速率显著下降,POD、SOD活性显著上升,CAT活性下降。此外,根内POD、SOD酶活性明显高于叶,而根内MDA含量低于叶。说明路易斯安娜鸢尾对100μmol·L-1以下Cd2+毒害具有较强的抗性和吸收、积累能力,且根是主要积累部位。     

3种养殖方式下刺参营养成分和功能成分的研究

对大连地区圈养、浅海和深海3种养殖方式下平均体质量分别为67.11、96.15、258.40 g刺参Apostichopus japonicus的营养成分(灰分、蛋白质、脂肪、碳水化合物、氨基酸、脂肪酸)、功能成分(多糖、胶原蛋白)进行比较分析。结果表明:圈养刺参的蛋白质、脂肪和碳水化合物含量最高,灰分含量最低;圈养刺参的多糖含量最高,且含有较高的氨基糖和糖醛酸,而深海刺参的胶原蛋白含量最高;3种养殖方式下,刺参的脂肪酸含量均以多不饱和脂肪酸为主,其中,深海刺参所含的多不饱和脂肪酸最高,尤其是EPA;3种养殖方式下,刺参的谷氨酸含量均最多,圈养刺参的必需氨基酸含量最高。研究表明,不同养殖方式下,刺参的营养成分和功能成分有明显差异,本研究结果可为生产者加工和消费者购买刺参提供参考。     

农村食品安全存在的主要问题及对策

针对农村地区食品安全在生产企业、流通环节、餐饮行业、农民食品安全思想及法律意识、法制和监管机制等方面存在的问题,提出了加强农村食品生产企业管理、推行农村食品连锁经营、完善法制及基础设施建设、加强法规宣传、完善农村消费维权网络等措施建议,以为农村食品安全提供参考。     

脱水香菇细菌污染的生物发光快速检测试验

利用ATP生物发光分析技术对脱水香菇细菌污染情况进行了快速检测试验。结果表明,非细菌ATP因发光强度对总体发光强度的影响小于0.9%,可忽略不计;采取Tris/EDTA加热法提取细菌ATP,提取时间确定为90 s;整个检测过程可在1～2h内完成,与标准的细菌培养方法有良好的相关性,且不需要复杂的设备,可用于食品的快速筛选和现场检测,是一项值得广泛推广应用的新技术。     

ATP生物发光技术快速测定农产品辐照灭菌效果

应用ATP生物发光技术测定待辐照样品的含菌量,从取样到ATP发光强度的测定,整个过程只需1~2 h;样品中细菌ATP的生物发光强度与含菌量之间显著相关。该方法对辐照样品的检测结果是产生了辐照产品的发光强度均高于对照的异常现象,分别从γ射线对ATP的影响、对发光动力学以及发光强度增高的途径等方面对其原因进行了研究,结果表明,发光强度的增加并非由细菌ATP所造成,而是由农产品中含有的细菌经辐照后引起的干扰所致;荧光素酶—荧光素制品中存在的能引起光辐射的物质是形成干扰的另一个方面的原因。     

水热法提取龙井长叶中茶多糖工艺优化研究

使用水热法对茶多糖进行提取,以期为茶多糖的提取提供新的思路。以龙井长叶茶树叶片为材料,研究提取时间、提取温度、固液比对茶多糖得率的影响,以正交试验优化提取工艺。结果表明,影响茶多糖得率各因素的主次顺序是提取温度固液比提取时间,最佳提取工艺参数为提取温度120℃,提取时间90min,固液比为1∶25(g·mL~(-1)),此工艺条件下龙井长叶中茶多糖得率为110.23mg·g~(-1)。