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1.
背主动脉注射是生产转基因鸡的经典方法,该方法不需换壳培养,但壳内注射技术难度大,并且无法实时观察后期胚胎发育情况。本实验对背主动脉注射法进行了改进,将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)腺相关病毒(Adeno-associated Virus,AAV)壳外注射至150枚HH 14~16期(Hamburger-Hamilton Stage 14~16)鸡胚背主动脉中,再进行换壳培养,继续孵化至出壳,观察和分析改良背主动脉注射法与传统背主动脉注射法和胚盘下腔注射法对发育8、14、18、21 d鸡胚存活率、孵化率以及EGFP阳性检出率的影响。结果表明:改良背主动脉注射组鸡胚存活率均高于传统背主动脉注射组与胚盘下腔注射组(P<0.05或P<0.01);改良背主动脉注射组的鸡胚孵化率(37%)高于传统背主动脉注射组(16%)与胚盘下腔注射组(28%)(P<0.01);荧光蛋白手电筒检测显示,改良背主动脉注射组鸡胚EGFP阳性率(17%)明显高于传统背主动脉注射组(13%)与胚盘下腔注射组(12%)(P<0.01)。综上,背主动脉壳外注射结合换壳培养提高了转基因鸡胚胎孵化率和EGFP阳性检出率,对提高转基因鸡效率具有重要价值。 相似文献
2.
3.
为建立一种快速、高通量的多重耐药基因检测方法,利用Luminex液态芯片平台,建立了可同时检测17种耐药基因的液态芯片检测方法。该方法对大肠杆菌常见的七大类抗菌药物所对应的17种耐药基因(blaSHV、blaCMY-1、Aph3-IIa-1、aac(6)-Ib-cr、aadA-1、cmlA-1、gyrA、mcr-1、NDM-1、parC、qnrS-1、sul-1、sul-2、sul-3、tetA、tetB、tetX)进行序列分析,随后依次对其设计多重PCR特异性引物,构建特异的阳性质粒作为阳性参比品进行液态芯片检测条件优化,从而进行多重耐药基因液态芯片检测方法的研发。结果显示:成功构建了17种耐药基因的阳性质粒,并建立了两套体系用于检测17种耐药基因。在特异性试验中,两套体系中的检测信号无干扰,具有较高的特异性数值;敏感性试验中,体系一的单一质粒最低检测量为102~104 copies/μL,混合质粒为103~105 copies/μL;体系二的单一质粒最低检测量为102~105 copies/μL,混合质粒为104~106 copies/μL;有效性试验中,液态芯片法与PCR检测结果的Kappa值多在0.60以上,具有高度一致性。结果表明,本研究建立的2套液态芯片检测体系具有高通量、高灵敏和高特异性的优点,可同时对17种耐药基因进行检测,能够达到快速检测的目的。 相似文献
4.
5.
薄壳苦荞可直接脱壳加工米,是苦荞米产业发展的重要种质资源.本研究选用杂交育成的薄壳品种'贵米苦荞55号'为材料,对灌浆期叶片、茎和籽粒中氮代谢的关键酶活性、总氮含量、蛋白质和总黄酮含量等进行分析测定.基于One-way ANOVA分析结果发现,灌浆期苦荞叶片NR活性、茎NR活性、籽粒NR活性、叶片GOT活性、茎GOT活性、籽粒GOT活性、叶片GPT活性与茎GPT活性存在显著变化.灌浆期间'贵米苦荞55号'叶片NR活性均显著高于'晋荞麦2号',籽粒NR活性仅在灌浆后10和15d显著提高;叶片GOT活性在多个时期显著降低,但籽粒GOT活性在灌浆后5、25和30 d显著提高.而苦荞叶片、茎和籽粒中全氮含量不存在显著变化.推测苦养生殖生长与营养生长重叠导致了不同组织对氮源的竞争,进而影响了灌浆期植株各器官的氮代谢水平.'贵米苦荞55号'种子球蛋白和醇溶蛋白含量显著提高,谷蛋白含量显著降低,但总蛋白质和总黄酮含量与'晋荞麦2号'无明显差异,说明其具有较高的营养与保健价值,薄壳苦荞米可作为典型的低谷蛋白高黄酮谷物用于日常饮食.研究结果可为薄壳苦养的高产优质育种与栽培技术研究提供科学参考. 相似文献
6.
苹果是人们喜爱的水果之一,尤其是鲜切苹果具有方便食用、营养丰富和口感新鲜等特点,更受广大消费者的青睐。常温下暴露于空气中的鲜切苹果保鲜期限仅有短短几个小时,容易失去水分,且易被氧化,失去商业价值。运用多功能集成理论,设计一种双功能集成保鲜包装袋,通过配置功能D膜和E膜的搭配,对比裸放组与普通PE保鲜膜组,探索评价双功能集成保鲜袋对袋内顶空气体、鲜切苹果外观品质、VC、可溶性固形物含量、失质量率的影响。结果表明,双功能集成保鲜袋可以有效减缓鲜切苹果的呼吸速率,减少营养成分流失,维持鲜切苹果的外观品质,避免凝露现象,在25℃室温下将鲜切苹果的货架期从裸放2 d延长到4~5 d。 相似文献
7.
农村金融作为农村经济发展的核心,对农村居民的经济生活存在深刻影响。通过对湖南省131户农村居民的问卷调查,深入分析了当地正规金融与民间金融的发展现状及其对农村居民消费结构的影响。研究发现:当地正规金融与民间金融皆处于较低发展水平,农村金融发展程度对农村居民生产性消费比率具有正面作用,对农村居民生活性消费比率具有负面作用。在此基础上提出了扩大金融机构服务范围,促进金融机构多样化,加强农村信用评定工作;积极宣传扶农政策,创新农村金融产品;整顿民间金融,促进民间金融健康发展等促进农村金融发展和优化农村居民消费结构的建议。 相似文献
8.
9.
为评估霉菌毒素降解酶与解毒护肝素两种饲料添加剂对母猪繁殖性能的影响,选取120头胎次、体况相近,怀孕80 d的母猪,随机分成A、B两组,每组60头。A组在普通日粮基础上添加FSN(主要成分为霉菌毒素降解酶)1 000 g/t+FST(主要成分为解毒护肝素)250 g/t,B组饲喂普通日粮。试验猪按日常饲养方案饲养,试验期间采集统计母猪繁殖性能相关数据。结果表明:日粮中添加霉菌毒素降解酶和解毒护肝素,试验组健仔率比对照组高2.73%,但差异不显著;试验组的产程及仔猪初生重优于对照组,且差异显著(P0.05);断奶仔猪均重方面,两组差异不显著(P0.05);哺乳期母猪采食量方面,对照组优于试验组,但差异不明显;断配率方面,试验组比对照组高出16.14%,差异明显。 相似文献
10.
为揭示黄芪防控猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的物质基础及靶点信息,采用网络药理学方法,从中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选黄芪的潜在活性成分、作用靶点,同时从比较毒理基因组学数据库(CTD)收集PRRS相关宿主基因,最后构建"活性成分-关键靶点"网络、蛋白互作网络,并进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果显示,从黄芪筛选出的17个潜在活性成分中,有14个潜在活性成分共计65个基因靶点与PRRS相关宿主基因交叉,其中槲皮素、山奈酚、刺芒柄花素、异鼠李素等潜在活性成分可能对治疗PRRS有重要作用,TNF、IL8、TP53、IL6、IL10、IL1B、JUN等45个蛋白靶点间存在相互作用。此外,黄芪治疗PRRS的作用机制可能涉及细胞外间隙和胞浆等组分,并可能与炎症反应、细胞凋亡、T细胞受体信号通路等生物过程相关。本研究为临床应用黄芪及其提取物治疗PRRS奠定了理论基础。 相似文献