甘蓝型油菜BnWRKY41的理化性质分析及BnWRKY41-2 在花青素合成中的功能解析

甘蓝型油菜BnWRKY41-1通过负调控花青素合成相关基因的表达而显著抑制拟南芥叶片花青素的积累。为[JP2]深入了解同源拷贝BnWRKY41-2在花青素合成过程中的作用,对BnWRKY41-1和BnWRKY41-2进行生物信息学分析,并从甘蓝型油菜品种‘中双11’中成功克隆BnWRKY41-2 的全长编码序列,分别转化烟草和拟南芥 wrky41-2 突变体,对其亚细胞定位和在花青素合成中的调控作用进行分析。结果表明,BnWRKY41两个拷贝均具有典型WRKY结构域,N端不含跨膜结构和信号肽,二级结构主要由无规则卷曲组成,蛋白质修饰以磷酸化为主。BnWRKY41-2 定位在细胞核中,在拟南芥 wrky41-2 突变体背景下异源表达 BnWRKY41-2 基因使突变体叶片中的花青素含量恢复到野生型水平,而且可显著调控花青素积累相关基因的表达。这些结果表明BnWRKY41-2 与BnWRKY41-1在蛋白质结构及理化性质方面相似,并且在调控拟南芥叶片花青素积累方面发挥类似的生物学功能,起负调控作用。     

甘蓝型油菜酯酶基因BnLIP2的克隆及其植物超表达载体的构建

应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了甘蓝型油菜BnLIP2基因,并将其克隆到pMD18-Tvector载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定了该基因全序列.结果表明,该基因全长为1 170bp.将甘蓝型油菜BnLIP2基因定向克隆到植物表达载体pCambial300的35S启动子下游,构建了该基因的植物超表达载体.     

白菜型油菜BrDAD1基因的克隆及其植物反义载体的构建

应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了白菜型油菜BrDAD1基因及自身的启动子基因Pro-DAD1,并将其分别克隆到pMD18-Tvector载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定了该基因及启动子全序列。结果表明,该基因及启动子全长分别为1 270 bp与1 335 bp。将白菜型油菜BrDAD1基因反向克隆到植物表达载体pCambia 1300的自身启动子基因Pro-DAD1启动子下游,构建了该基因的植物反义表达载体pCamDAD1。     

我对花盆的改进

我养花多年，前期不是死亡就是烂根，我看了很多报道，花养不好 ，究其原因主要是浇水多和盆土透气性差。针对这一养花普遍存在的问题，近年，我开始摸索改进，最后的改进结果就是用一个广口罐头玻璃瓶作外盆（可是各形状的），     

拟南芥WRI1基因的克隆及其植物反义载体的构建

应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了拟南芥WRI1基因,并将其克隆到pMD18-Tvector载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定了该基因全序列.结果表明,该基因全长为1 287 bp.将拟南芥WRI1基因反向克隆到植物表达载体pCambia1300的35S启动子下游,构建了该基因的植物反义表达载体.     

几种栽培花苗的透气办法

如何使花苗不沤根、长得好且开花多，笔者在养花中摸索了一些透气方法．感到较为适用，现介绍如下。     

谷子SiMYB76基因抑制种子油脂积累的功能分析

拟南芥AtMYB76转录因子参与调控脂肪族芥子油苷和油脂的积累过程。为深入了解谷子中的同源基因 SiMYB76在种子油脂积累过程中的调控作用,从谷子品种‘豫谷1号’中克隆获得 SiMYB76基因的全长编码域序列,对其进行烟草叶片的亚细胞定位研究,并初步分析其在种子油脂积累过程中的调控作用。结果表明,SiMYB76定位于烟草叶片细胞的细胞核中。在拟南芥 myb76-2突变体背景下,异源表达 SiMYB76基因不仅能够完全恢复突变体高含油量的表型,而且可显著调控油脂合成途径上多个关键基因的表达。由此可知,谷子SiMYB76通过调控油脂合成途径上关键基因的表达而显著抑制种子油脂积累,并在种子油脂积累过程中与拟南芥AtMYB76具有相似的生物学功能。     

人工杂交法获得拟南芥酯酶基因位点AT1G54790/AT2G429双突变体及其PCR鉴定与表型分析

以拟南芥T-DNA插入纯合突变体AT1G54790和AT2G42990为亲本,采用人工杂交技术与PCR鉴定相结合的方法获得了AT1G54790/AT2G42990纯合双突变体,并对表型进行了初步分析。     

栽培花苗透气5法

长寿果又名蒙山冬红海棠,是沂蒙山区的园艺工作者用蒙山海棠(当地俗称蒙山甜茶)作砧木,用美国冬红海棠作接穗嫁接而得的。适宜作盆栽和园林绿化栽培。春天播种,秋天嫁接,从小苗到成型结果大约3～5年。4月开花,花簇状,初呈粉红色,渐转为白色,花期20余天,白花授粉。果实圆球形,大小如葡萄,光洁亮丽,先青后红,11月成熟。果实经冬不落,一直挂至次年,故名长寿果。近年来市场上出售的长寿果植株,也有用木瓜海棠或苹果树作砧木嫁接的。     

甘蓝型油菜EMS诱变二代农艺与籽粒品质性状的变异与TILLING库的构建

利用甲基磺酸乙酯（EMS）溶液处理甘蓝型油菜双低品种浙双72种子,经田间M1代观察和M2代筛选及部分M3代验证,筛选到叶色、叶形、株高、茎色、花色、花瓣（数目与颜色）、雄性不育及开花期等性状发生明显变异的M2突变株。经统计,突变株占M2群体植株总数的8.46％。对M3种子的主要脂肪酸组分之间以及脂肪酸组分与种子含油量进行了相关与回归分析,同时详尽描述各种脂肪酸组分和含油量的变异幅度与变异分布,构建了包括主要农艺性状、雄性不育及籽粒品质性状变异的突变体库,提取了2558份包含突变性状的M2植株叶片的DNA。该诱变二代DNA库及其相应的突变体种质资源为进一步深入研究控制油菜农艺性状、育性与籽粒品质性状的主效基因的等位多态性打下基础,并可为油菜品种的遗传改良提供许多特异的育种材料。