关岭牛MyoD Ⅰ基因在不同组织和时期中的表达分析

为研究MyoDⅠ基因在关岭牛不同组织表达量的差异及在肌肉发育过程中的表达情况,试验采用实时荧光定量PCR技术对关岭牛背最长肌、大腿肌、心脏、肝脏、脂肪、小肠6个组织的MyoDⅠ基因相对表达量进行检测。同时分析关岭牛胎儿、18月龄、30月龄时期背最长肌组织中MyoDⅠ基因的表达规律。结果显示,MyoDⅠ基因在背最长肌中表达量最高,在出生后的关岭牛肌肉组织中也具有较高的表达量,且随着出生时间的推移呈上升趋势。推测可能由于背最长肌是肌肉富集地方,因此基因表达量较高,随着年龄增大,肌肉丰满度增加,基因表达量也随着增加。     

猪BLM基因N端、C端的克隆及其在不同组织与疾病中的表达分析

为探究猪BLM解旋酶N端、C端的结构功能及其在不同组织和疾病中的相对表达量，本研究采用RT-PCR技术扩增从江香猪BLM基因N端和C端，利用生物信息学软件对克隆所获序列进行分析，同时采用实时荧光定量PCR技术分析BLM基因在猪不同组织及病样中的表达差异。结果显示，试验成功克隆了从江香猪BLM基因N端1 025 bp和C端1 300 bp序列，与GenBank中猪BLM基因序列（登录号：NM_001123084.1）同源性为100%；生物信息学软件预测显示，猪BLM基因序列长度为4 316 bp，包含4 280 bp的开放阅读框，编码一个由1 426个氨基酸组成的多肽链；氨基酸序列比对发现，猪BLM基因氨基酸序列与牛的同源性最高（85%）；结构域预测表明，猪BLM基因有DEXDc、HELICc、RQC和HRDC 4个结构域；系统进化树分析表明，猪BLM基因与牛亲缘关系最近；实时荧光定量PCR结果显示，以心脏为对照，BLM基因在从江香猪各组织中均有表达，其中在睾丸中的相对表达量最高，其次为肺脏、肝脏、脾脏、心脏、肾脏、小肠和大肠，在睾丸和肺脏中的表达量均极显著高于其他组织（P<0.01）；BLM基因在患繁殖与呼吸道综合征猪肺脏、患白血病鸡肝脏和患鸭瘟鸭肝脏中的表达水平均极显著或显著高于正常组织（P<0.01；P<0.05），提示BLM基因的变化可能也会导致动物疾病的发生。本试验结果可为后续畜禽BLM解旋酶原核表达载体的构建及其在重大疾病的发生和预防等研究提供理论依据。     

黔东南土鸡不同醒抱方法的效果研究

为研究黔东南土鸡的醒抱方法，将刚进入抱窝状态的母鸡分成4个组，分别采用4种不同的醒抱方法进行试验。I组自然醒抱；Ⅱ组自由活动，加喂异烟肼；Ⅲ组采取隔离；lV组采取隔离，加喂异烟肼。结果表明：（1）醒抱时间：Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组、Ⅳ组比较，均差异极显著（P〈0．01）；Ⅲ组和Ⅳ组比较，差异不显著（P〉0．05）。（2）复产时...     

贵州香猪超数排卵试验

选用经产贵州香猪,研究不同的超排处理、不同激素用量和超排时间研究超排效果。结果在发情周期的14~17 d,应用氯前列醇钠注射液(PG)+孕马血清促性腺激素(PMSG)+人绒毛促性腺激素(hCG)组合,PMSG用量每千克体重15~18 U,配合等量hCG对贵州香猪进行超排处理,效果较好,排卵数提高了约0.8倍。     

优化胚胎移植受体牛同期发情技术方案的研究

用C IDR+PGF2 a+HCG法的Ⅰ组和GnRH+PGF2 a+GnRH法的Ⅱ组对108头受体牛进行同期发情优化技术方案的研究,结果表明:在60 h内发情率分别为100%、96.92%,2种方法发情率都较高,Ⅰ组比Ⅱ组相对更高一些,但2种方法间差异不显著(P>0.05)。从发情时间分布上比较,22 h内,Ⅰ组发情率为96.92%,Ⅱ组发情率为72.09%,Ⅰ组(C IDR+PGF2 a+HCG法)发情同期化程度高于Ⅱ组,2种方法的发情同期化集中程度存在显著差异(P<0.05)。Ⅰ组方法在胚胎移植利用率和移植妊娠率高于Ⅱ组,但2组间差异不显著(P>0.05)。用Ⅰ组方法处理本地牛和杂交牛,其发情率均为100%,2个品种间差异不显著(P>0.05)。Ⅱ组方法处理本地牛和杂交牛,其发情率分别为91.67%、100%,杂交牛发情率稍高于本地牛,但2个品种间没有显著差异(P>0.05)。品种对受体发情率的影响不显著。因此,用C IDR+PGF2 a+HCG法对胚胎移植受体牛同期发情处理效果较好。     

家畜性别控制的研究进展

对家畜性别决定机理、受精前的性别控制技术、受精后的胚胎性别鉴定技术以及今后性别控制技术的前景和趋势等方面进行了分析讨论,旨在为科研工作者和畜牧生产者提供参考.     

竹乡乌骨鸡与珍珠鸡人工授精效果观测

本试验将人工授精技术应用于竹乡乌骨鸡与珍珠鸡的远缘杂交中,探讨不同输精时间间隔对种蛋受精率的影响。试验以10只竹乡乌骨鸡作父本,150只珍珠鸡作母本,进行一周一次人工授精和两次人工授精的种蛋受精率比较。结果显示一周二次人工授精的种蛋受精率比一周一次高9.18%,差异极显著(P<0.01),一周二次人工授精效果优于一周一次。     

贵州从江香猪与中国农大小型猪Ⅰ系的杂交性能

为加快贵州香猪资源的开发利用,培育出高品质的实验用小型猪,以贵州从江香猪为母本、中国农大小型猪Ⅰ系为父本进行杂交,测定杂交猪(农×从杂交猪)的繁殖性能和F1代的生长发育性能指标。结果表明:农×从杂交猪的平均窝产仔数为10.26头,窝断奶仔猪数为8.89头,仔猪初生重为0.68kg/头,与贵州从江香猪差异不显著(P0.05);农×从杂交猪F1代的生长速度缓慢,6月龄杂交猪平均体重为25.85kg,体高为42.44cm,体长为75.29cm,胸围为69.78cm,均显著低于纯繁贵州从江香猪(P0.05)。农×从杂交猪F1代体型矮小,生长发育缓慢,是较为理想的实验动物选育群。     

5-Aza-dC对牛成肌细胞MyoD1启动子甲基化及mRNA表达的影响

旨在探究5-氮杂-2-脱氧胞苷（5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dC）对牛成肌细胞的增殖和肌分化因子（myogenic differentiation 1,MyoD1）启动子甲基化以及mRNA表达的影响。本研究复苏了前期冻存的关岭牛成肌细胞,并进行培养,待其生长到对数生长期,再通过不同浓度的5-Aza-dC对牛成肌细胞进行处理,利用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期;结合高通量检测方法检测MyoD1启动子甲基化水平,并利用qRT-PCR检测MyoD1及相关基因的表达水平。研究发现,0.1 μmol·L^-15-Aza-dC为最适浓度,该浓度下细胞抗凋亡因子Bcl的表达极显著降低（P<0.01）,促凋亡因子Bax的表达极显著提高（P<0.01）,促凋亡因子Caspase-9的表达显著提高（P<0.05）;周期因子Cyclin A2的表达显著提高（P<0.05）,而细胞因子Cyclin B1、Cyclin D的表达无显著变化;检测空白组和试验组MyoD1启动子甲基化水平发现,试验组甲基化水平极显著低于空白组（P<0.01）;而mRNA的表达水平极显著高于空白组（P<0.01）。5-Aza-dC能够通过改变Caspase-9、Bcl、Bax、Cyclin A2等基因的表达来调节关岭牛成肌细胞的增殖和凋亡,并能够有效降低MyoD1基因启动子的甲基化水平（P<0.01）;极显著提高其mRNA的表达量（P<0.01）。低浓度的5-Aza-dC能通过促进细胞凋亡及调控关岭牛MyoD1的甲基化水平来调控MyoD1的表达;同时推测,MyoD1基因启动子的甲基化水平能够影响关岭牛成肌细胞的生长发育,可为遗传标记辅助关岭牛的改良提供理论参考。     

贵州从江香猪PDK4、FGF10基因的克隆及组织表达分析

试验旨在克隆获得PDK4、FGF10基因,并研究大白猪与从江香猪不同组织中PDK4、FGF10基因mRNA的表达差异。采用RT-PCR分别克隆从江香猪PDK4、FGF10基因并进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR技术检测PDK4、FGF10基因在大白猪和从江香猪不同组织中mRNA的相对表达量。结果显示,从江香猪PDK4基因的编码区全长1 224 bp,编码407个氨基酸;FGF10基因的编码区全长636 bp,编码211个氨基酸。经BLAST软件进行同源性比对,发现从江香猪PDK4基因与羊、马、人的核苷酸序列同源性分别为93%、92%和91%;FGF10基因与羊、牛、人、鼠的核苷酸序列同源性分别为94%、93%、93%和90%。由PDK4基因系统进化树可知,从江香猪与牛、绵羊亲缘关系较近;由FGF10基因系统进化树可知,从江香猪与绵羊、牛、人、猕猴亲缘关系较近,与小鼠和鸡亲缘关系较远。实时荧光定量PCR结果显示,在从江香猪不同组织中,PDK4基因在肾脏中的表达量最高,在胃和脂肪中表达量较高,FGF10基因在胃中表达量最高,在肾脏和脂肪中表达量较高,两个基因在背最长肌中的表达量均最低;在大白猪的不同组织中,PDK4、FGF10基因在脂肪中的表达量均最高,PDK4基因在背最长肌中的表达量最低,而FGF10基因在心脏中表达量最低。本试验成功克隆了从江香猪PDK4、FGF10基因,并检测了其在大白猪与从江香猪不同组织中的表达,为进一步研究PDK4、FGF10基因在脂质代谢及脂肪沉积等方面的调控作用提供科学依据。