H5亚型禽流感疫苗对蛋鸭免疫效果影响的研究

用H5亚型禽流感疫苗对58个养鸭场的150~450日龄产蛋鸭进行2次免疫后,21~180 d随机抽取有效血清674份进行HI抗体水平监测,分析其免疫效价。结果表明：处于产蛋高峰期的300日龄组蛋鸭免疫效果最佳,抗体有效率达到100%,抗体效价达到8.7 log2,除与250日龄组无显著差异（P>0.05）外,与其他各组比较差异显著（P<0.05）;蛋鸭在免疫后21~120 d内均能维持较高的HI抗体效价,并在61~90 d进入高峰期,此期抗体合格率达97.9%,抗体效价为7.7 log2,与免疫后121~150 d及151~180 d比较差异极显著（P<0.01）;同时,经与鸡的免疫效果相比,蛋鸭免疫后所产生的HI抗体效价显著高于鸡（P<0.05）。     

猪瘟病毒的分离鉴定及其E2基因序列分析

2004~2005年上海和江苏3家猪场发生仔猪急性死亡,用ELISA鉴别试剂盒证明为猪瘟感染。用PK15细胞分离病毒,传代至第3代无细胞病变,RT-PCR扩增E2基因为阳性,扩增片段经纯化后克隆入T载体并进行序列测定。通过DNAStar软件对3株病毒的基因序列进行了比较,同时构建了系统进化树,结果表明,三株病毒分离株均扩增出269bp片段并且核苷酸序列100%同源,这3株与Alfort、Shimen株、兔化弱毒株(HCLV)和Brescia4个标准毒株核苷酸序列同源性均在90%以上,说明在江苏、上海地区分离得到的3株猪瘟病毒与流行毒株在基因序列上没有发生大的变异。     

猪圆环病毒2型PCR检测方法的建立

根据猪圆环病毒2型(PCV2)的基因序列,设计一对能特异性扩增PCV2ORF2基因的引物,通过对PCR方法的优化,建立了快速的PCR检测方法用于病料中PCV2感染的检测。用本方法对猪瘟病毒(HCV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)进行了扩增,均未有条带出现,表明该方法具有良好的特异性;敏感性试验表明,该方法能够检测到的最低DNA模板浓度为1.0×10-5ng/μL;重复性试验表明,该方法具有良好的稳定性。     

猪链球菌2型和猪圆环病毒2型混合感染的检测

2006年9月,温州某猪场断奶仔猪出现消耗性综合征,剖检的仔猪主要表现为淋巴结肿大和脑膜炎等。分别设计针对猪圆环病毒2型CAP蛋白和猪链球菌2型溶血素蛋白基因的特异性引物,用PCR技术从患病仔猪的肺脏、脾脏、淋巴结和脑组织中扩增出了猪链球菌2型和猪圆环病毒2型特异性片段。结合本病的临床症状和病理变化,病例确诊为猪链球菌2型和猪圆环病毒2型的混合感染。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗的制备与免疫效力研究

猪圆环病毒2型（PCV2）经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞,盲传3代,用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,共免疫2次,时间间隔为3周,分别于一免后第21天和二免后第14天进行ELISA抗体检测。同时为了评价国产油佐剂和进口油佐剂的免疫效果,笔者进行了猪体免疫效力试验。通过ELISA抗体、攻毒后临床表现及体温变化、剖解时的病理变化、平均日增重及病毒血症等指标对疫苗免疫效果进行评价。结果如下：①PCV2能被0.2%甲醛完全灭活,灭活时间为16 h。②PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗免疫小鼠后均能产生较好的免疫应答,并且油佐剂灭活疫苗免疫效果好于铝胶佐剂灭活疫苗。③猪体免疫效力试验表明,两种油苗均能产生较高水平的ELISA抗体。攻毒后,攻毒对照猪的体温高于免疫猪,空白对照猪体温正常。免疫猪及空白对照猪平均体重均升高,而攻毒对照猪平均体重有所降低,且两个免疫组和空白对照组之间平均日增重差异显著（P〈0.05）。病毒血症检测及病毒DNA在组织中的分布检测表明两油苗均能够有效降低猪体的带毒。以上结果表明,PCV2灭活疫苗免疫小鼠和猪体后均能诱导机体产生免疫应答,并能够在一定程度上抵抗PCV2对猪体的感染。     

自家高免血清防治PMWS效果试验

断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）是一种由猪圆环病毒2型（PCV2）引起的存在于世界范围内的感染保育和育肥猪的疾病,6～12周龄的仔猪最普遍。该病的发病率和死亡率取决于猪场和猪舍条件,一般分别在4％～30％和50％～90％。近几年,该病在我国的发生率愈来愈普遍,已经对我国规模猪场造成了严重的经济损失。规模化猪场大都是通过科学的饲养管理、改善饲养条件、降低饲养密度等方法来减少该病的发生,但并不能从根本上预防该病。因此,研制出一种能够治愈PMWS的制剂、有效降低规模猪场的损失是当前急需解决的问题。本研究通过自制的高免血清对发病仔猪进行治疗,结果表明,高免血清对PMWS具有较好的治疗效果。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒混合感染的检测

2005年3月,江苏某猪场仔猪发生体温升高,呼吸困难,四肢末端、耳尖发绀,站立不稳和淋巴结出血为主要症状的疾病。4头发病仔猪的淋巴结、脾、肺脏组织用RT-PCR方法分别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒为阳性,用猪瘟ELISA试剂盒检测猪瘟病毒野毒为阳性。结合本病的临床症状和病理剖检,病例确诊为猪繁殖与呼吸综合征和猪瘟野毒的混合感染。     

规模化猪场猪咬尾症的发生原因及防治对策

猪的咬尾症在规模化猪场时有发生，特别是在猪场饲养密度较大、饲养管理稍差的情况下，发生猪咬尾症的机率就会更大。如果对这种不良行为不及时加以制止，极易导致猪的尾巴溃烂、化脓甚至死亡，继而对猪只的生长发育以及猪场的经济效益带来较大影响。找出诱发猪咬尾症的真正原因是防治该病发生的关键所在。但在实际生产中其诱发因素可能有很多，猪场管理者很难准确地找出发病的具体原因。最好的方法是要首先将有恶癖的猪移出原来的圈舍单独饲养；其次是找出最有可能的原因及时进行解决；最后采取综防措施进行预防。     

温州地区规模猪场断奶仔猪多系统衰竭综合征的病原学调查

在断奶仔猪多系统衰弱综合症(PMWS)临床症状和病理变化观察的基础上,用PCR方法对采自2005年6月至2006年3月温州市11家养猪场的70份疑似有发病猪的组织病料,进行了猪圆环病毒2型(PCV2)的基因检测。结果发现,8家猪场的45份病料为PCV2阳性,猪场阳性率为72.73%,样品阳性率为64.29%。表明PMWS在温州市发病比较严重,并且患有PMWS的病猪群广泛存在着PCV2感染。     

断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的综合防控技术

断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）是由猪圆环病毒2型（PCV-2）引起的、其他多因素共同作用的一种疫病综合征,它的发生已经给各国养猪业造成了很大的经济损失。由于目前国内外尚没有商品化的PCV-2疫苗用于大规模的免疫,因此,研究、制定一整套的综合防控措施对于本病的防制至关重要。