北方园林绿化中宿根花卉的应用研究

指出了宿根花卉作为园林植物的一种,因其较高的观赏价值、种类丰富以及适应性强等优势在北方园林绿化中的应用范围变得越来越大。从宿根花卉的角度出发,对北方园林绿化中宿根花卉的应用进行了有效性研究。     

油菜cDNA表达文库构建及核盘菌致病因子互作蛋白的筛选和鉴定

核盘菌 [Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary] 是引起油菜菌核病的病原真菌。核盘菌侵染植物细胞早期,可分泌一些细胞壁降解酶, 如不同类型的多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase, PG)。这些酶对病菌在植物组织上的定植起关键作用, 同时酶活性的高低也决定病原菌的毒性或致病性。PG可以激活细胞的防卫反应而与其酶活性无关。为了解PG的信号转导途径, 利用RT-PCR方法克隆了核盘菌的PG基因, 将PG的编码区与酵母GAL4的DNA结合功能区融合, 构建到酵母诱饵蛋白表达载体PGBKT7中; 然后在酵母中构建了油菜cDNA表达文库。通过酵母双杂交方法在油菜cDNA表达文库中对与PG互作的蛋白进行了筛选, 分离到一个与PG互作的蛋白, 测序及BLAST分析表明该蛋白含有一个与钙离子结合的结构域, 称为C2结构域(C2-domain), 推测该蛋白是一种钙依赖的膜结合蛋白。该蛋白与拟南芥中一个含C2结构域功能未知蛋白的氨基酸同源性高达80.24%。利用半定量PCR分析了核盘菌诱导后该基因在油菜花、茎、叶中的表达, 结果表明该基因在叶片中表达量最高。克隆到的C2蛋白与其他物种中的C2蛋白比较发现, 与钙离子结合的天冬氨酸残基很保守。     

真空斩拌机的运动与动力分析

针对真空斩拌机的振动、轴承发热等问题,对斩拌刀与斩盘螺环相对运动及斩拌刀的受力进行了分析。分析表明,斩拌刀轴既受区间连续性变载荷又受区间交接点的有限突变载荷;有限突变载荷既有力的大小突变又有方向的突变;各区间内的连续性径向载荷变化不大;轴向载荷虽小,但载荷变化的相对不均匀度大。刀轴每转1周经受2个循环变载荷和与刀具数量相同次数的冲击。运动与动力的分析为斩拌机的减振降噪结构设计提供了参考依据。     

制浆处理方法对芹菜纸机械性能的影响

采用机械法制浆，分析不同处理方法对芹菜纸机械性能的影响。设计了4种组合方法，在中试条件下制备了4种标样芹菜纸。利用L&W纤维分析仪提供了纤维分析报告，利用Olympus测量显微镜表征了芹菜纸的结构。纤维、结构、性能分析结果表明，4种标样芹菜纸中最高抗张强度为1.029kN/m，最低抗张强度为0.583kN/m，可以通过整棵打浆、分切后打浆、打桨粗细等不同处理方法得到较高抗张强度的芹菜纸。     

芝麻AQP家族的全基因组序列鉴定及其特征分析

【目的】从芝麻全基因组中分离鉴定水通道蛋白AQP(aquaporin)家族基因,并进行系统进化关系、连锁群定位、基因结构、跨膜结构域和亚细胞定位预测、保守性氨基酸残基以及青枯雷尔氏菌诱导表达分析,为芝麻AQP的功能研究与利用奠定基础。【方法】通过生物信息学手段,结合芝麻基因组注释信息,鉴定芝麻AQP家族成员序列信息,并用InterPro逐一进行验证。利用ClustalW2对芝麻、拟南芥和水稻的AQP以及马铃薯的XIPs进行多序列比对,用MEGA6.0构建进化树。通过MapInspect和Gene Structure Display Server 2.0进行连锁群定位和基因结构分析。采用ProtParam、WoLF PSORT和TMHMM Server v.2.0在线工具预测芝麻水通道蛋白的分子质量和等电点、亚细胞定位及跨膜结构域。通过芝麻、拟南芥和水稻AQP及马铃薯XIPs的蛋白多序列比对结果推测NPA基序、ar/R滤器及P1—P5的氨基酸残基。利用前期研究获得的转录组测序结果进行青枯雷尔氏菌诱导表达分析,并通过qRT-PCR技术对差异表达较为明显的12个芝麻AQP进行验证。【结果】系统分析鉴定了36个芝麻AQP家族基因,根据多序列比对及系统进化分析将其分为5个亚家族:13个质膜内在蛋白(PIP)、12个液胞膜内在蛋白(TIP)、8个类NOD26膜内在蛋白(NIP)、2个膜内在小分子碱性蛋白(SIP)和1个未知内在蛋白(XIP),其中有34个基因定位在12个连锁群上。同一亚家族成员在基因结构、蛋白序列、亚细胞定位预测及保守性氨基酸残基等方面都较为相似。青枯雷尔氏菌诱导表达分析显示,NIPs、SIPs和XIPs表达无明显变化,部分PIPs和TIPs能够响应青枯菌诱导。SiPIP1;2、SiPIP1;3、SiPIP2;3和SiPIP2;4受青枯菌诱导后表达上调,SiPIP1;3和SiPIP2;3为持续上调,而SiPIP1;2和SiPIP2;4的表达先下调后上调;与之相反,表达下调较为显著的有SiPIP1;4、SiPIP2;1、SiPIP2;6、SiTIP1;1、SiTIP1;3、SiTIP2;1及SiTIP2;2。上述差异表达基因的qRT-PCR验证结果与转录组测序结果一致。【结论】通过全基因组分析,在芝麻中鉴定出36个AQP家族基因,分为5个亚家族,分布于12个连锁群上,大部分基因具有1—4个内含子(除SiNIP1;2有7个内含子外)。根据ar/R滤器和P1—P5氨基酸残基组成类型,预测不同亚家族AQP可能识别的底物。青枯菌诱导表达分析表明,部分PIPs和TIPs成员的表达发生了显著变化。     

ISSR标记在小麦指纹图谱分析中的应用研究初探

对ISSR标记技术在构建多态水平很低的小麦种内指纹图谱方面做了初步研究。发现（AG）n,(AC)n,(TG)n等二核苷酸重复引物类型在小麦中多态水平最高。能将亲缘关系很近的品种或品系区分区。结果有明：与其它常规分子标记技术如RFLP、RAPD等相比，ISSR标记具有简便、快捷、成本低、多态水平高等特点，是一种植得进一步研究的分子标记技术。     

我国陆地棉品种的遗传多样性研究初报

选用１８个随机引物，对２１个陆地棉品种作ＲＡＰＤ分析，并对各品种的指纹图谱进行了聚类和相似性分析。结果表明大部分品种与其系谱吻合。研究结果充分展示了ＲＡＰＤ技术可以作为棉花品种分类和遗传多样性研究的可行方法。     

我国短季棉品种的RAPD指纹图谱分析

本文选用了１８个随机引物，对２５个我国主要的短季棉品作物了ＲＡＰＤ多态分析。 各品种的指纹图谱进行了矛类和相似性分析。结果表明，大部分短季棉品种与其系谱吻合。主要从来自美国的金字棉口选育而成，它再次反映了我国现在推广的短季棉品种遗传基因比较狭窄，亟等发掘新的早熟棉基因资源。研究结果可对杂种优势利用的亲本选配提供理论依据。     

TRV病毒介导的基因沉默体系在棉花中的建立及应用

以陆地棉CLA1基因为标记基因,利用烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)载体建立基于病毒介导的棉花基因沉默体系(virus-induced gene silencing,VIGS)。病毒RNA2的RT-PCR分析证明,棉花子叶接种TRV病毒后,该病毒可高效扩散到受体的根、茎、叶等器官。利用TRV-VIGS体系同时诱导34份不同来源棉花材料CLA1基因沉默,尽管不同材料间的抑制程度有差异,但均可有效抑制CLA1基因的表达,说明该体系在棉花研究中的广谱利用性。GhMAPKKK基因受黄萎病菌诱导表达,接种后96 h表达量达到高峰。利用TRV-VIGS体系,成功抑制了棉花GhMAPKKK基因的表达,与对照株相比,抑制后的棉花植株接种黄萎病菌后更易感病,说明GhMAPKKK参与了棉花对黄萎病菌的抗性反应。具有广谱性、灵敏性和高通量等特点的棉花TRV-VIGS体系建立将加速棉花功能基因组研究进程。     

去叶芹菜纸的介观结构及机械性能研究

为提高用于包装的蔬菜纸机械性能，采用整棵或分切后打浆并配合打浆的粗细程度，在中试条件下制备了2种去叶芹菜纸样本。利用L&W纤维分析仪分析了打浆粗细程度，利用测量显微镜及显微图像分析系统表征了芹菜纸的介观结构，在标准环境下测试了机械性能并分析了变化情况。结果表明，去叶芹菜纸样本S1的抗张强度是样本S2的1.323倍；与带叶芹菜纸相比，总体上去叶芹菜纸的抗张强度是带叶芹菜纸的2.326倍，且断裂延伸率较好。