猪极体的排出与退化规律及其活性保存

哺乳动物卵母细胞二次减数分裂分别产生第一极体(PbⅠ)和第二极体(PbⅡ),极体(Pb)含有与卵母细胞相似的遗传物质。为探索猪Pb的排出与退化规律,并建立有效的Pb保存方法,从屠宰后的母猪卵巢中采集卵母细胞进行体外成熟培养及体外受精,分别对PbⅠ和PbⅡ的排出与退化规律及其在不同保存温度下的存活情况进行研究。结果表明:PbⅠ在卵泡卵母细胞体外培养40 h时排出率最高,PbⅠ在39℃条件下保存6 h形态正常率为85.5%,但存活率只有18.2%,4℃保存40 h存活率为85.0%,-20℃保存168 h存活率为95.0%,-196℃超低温保存1 344 h存活率和形态正常率分别达89.1%和97.8%。PbⅡ在卵母细胞受精后20 h排出率最高,PbⅡ在39℃条件下保存16 h形态正常率为69.0%,但存活率只有34.5%,4℃保存30 h存活率为87.5%,-20℃保存240h存活率为84.6%,-196℃超低温保存1 344 h存活率和形态正常率分别达87.0%和95.7%。     

GnRH－A诱导泰和鸡母鸡排卵的生殖内分泌机制

本试验研究了促性腺激素释放激素类似物───［Ｄ－Ｌｅｕ￣６，Ｐｒｏ￣９］－ＧｎＲＨＮ－乙酰胺（ＧｎＲＨ－Ａ）诱导泰和鸡母鸡排卵的生理效应，藉此探讨其生殖内分泌机制。结果表明：（１）ＧｎＲＨ－Ａ具有显著刺激母鸡生殖器官发育的效应，导致母鸡卵巢、输卵管以及肝重增加（Ｐ＜０．０１），但对鸡体重没有显著的影响（Ｐ＜０．０５）；产蛋停止前１周施用ＧｎＲＨ－Ａ可维持母鸡正常产蛋的生殖生理状态。（２）ＧｎＲＨ－Ａ给药后最初２０ｄ诱发出两个鸡血浆促黄体生成素（ＬＨ）释放峰，处理组（ＧｎＲＨ－Ａ组）血浆ＬＨ浓度在此期间显著高于对照组（Ｐ＜０．０１）；然而与对照组相比较，处理组鸡血浆促卵泡素（ＦＳＨ）却没有明显变化（Ｐ＜０．０５）。（３）鸡血浆孕酮（Ｐ４）浓庆在施用ＧｎＲＨ－Ａ后明显上升，显著高于尚处休产期的对照组（Ｐ＜０．０１）。与此相反，给药后的囊初８ｄ内，鸡血浆雌二醇（Ｅ２）浓度明显降低，虽然随后略有回升，但仍低于对照组（Ｐ＜０．０１）。据此可以认为，ＧｎＲＨ－Ａ诱导卵巢和输卵管发育与鸡血浆ＬＨ、Ｐ４以及Ｅ２浓度变化密切相关，ＧｎＲＨ－Ａ是一种有效的制剂，可应用于诱导卵巢和输卵管发育及换羽前产蛋力的改善     

一种羊用内置式采精器的手工制作及其使用

介绍了一种简易的新型羊(山羊、绵羊)用内置式采精器装置的制作、操作方法及其相关配套技术在绵羊和山羊繁育领域中的示范推广应用.经多年来畜牧科研和生产实践检验,并与目前广泛应用的常规假阴道采精器相比较,本采精装置的主要特点在于:(1)结构简单,安装简便,操作安全快速,可在羊场简陋条件下全天候实施采精操作；(2)发情或未发情母羊皆可作为台羊,采精全程操作模拟自然本交方式,对公羊和母羊无应激和生理伤害作用；(3)与常规采精器相比较,采精成功率均超过93.1％,显著优于常规采精器(38.5％以上)；(4)该套采精技术与同期发情、人工授精等技术相结合适用于山羊和绵羊繁育领域,受胎率在71.2％以上.该装置及其配套技术体系可望进一步改进和完善后替代传统采精装置,广泛推广应用于规模化养羊科研和生产领域.     

湖羊同期发情与杜泊绵羊人工授精技术

实验设计了5种不同的同期发情方法对300余只湖羊进行处理,对湖羊同期发情技术进行了系统研究,并采用杜泊绵羊鲜精人工授精技术对同期发情羊群进行集中杂交配种,对不同处理羊群的同期发情率、人工授精受胎率进行了统计分析与评价。     

猪极体的保存研究

将从屠宰场采集的猪卵巢卵母细胞进行体外成熟培养和体外受精,得到猪第一极体和第二极体.通过形态学观察和台盼蓝染色,探讨不同保存温度(39 ℃、4 ℃、-20 ℃、-196 ℃)下猪第一极体和第二极体的存活情况.试验结果表明:随着保存温度的降低,猪第一极体和第二极体的存活率随之升高.第一、二极体在39 ℃条件下大都在几小时内发生退化;4 ℃条件下保存40 h存活率为70%～80%;-20 ℃保存7 d时存活率达90%以上;而在液氮中保存1个月时,第一极体和第二极体的存活率仍接近90%.     

猪受精卵第二极体的采集与保存

哺乳动物卵巢中的初级卵母细胞成熟后排出第一极体,卵母细胞随即进入第二次减数分裂过程,并休止于分裂中期(M Ⅱ期),此时期卵母细胞若与精子结合受精,则受精后的卵母细胞被激活突破M Ⅱ 期阻滞,通过后期末期完成第二次减数分裂,排出第二极体(PB Ⅱ)[1-2] .     

波尔山羊卵泡卵母细胞的体外培养和输卵管配子移植

从4头同期发情与超数排卵的因重复采胚不孕的供体波尔山羊卵巢采得24枚卵泡卵母细胞(18枚卵丘卵母细胞，6枚裸卵)，其中9枚卵丘卵母细胞直接与获能后的精子实施配子输卵管内移植，4头受体均未受孕；其余15枚进行26h成熟培养，经培养后其中9枚卵丘卵母细胞中有6枚卵丘扩散，3枚未扩散；6枚裸卵因均退化而弃去。9枚卵丘卵母细胞移植至4头受体后有两头妊娠并如期产羔各一头。     

胚胎移植用受体山羊同期发情方法的比较

本研究分别用CIDR(处理1)、CIDR+PG(处理2)、CIDR+PG+PMSG(处理3)三种处理方法对山羊进行同期发情处理。结果发现,三种处理均以去栓36h后发情率最高。不同处理去栓24h后发情率,处理3(34.3%)极显著高于处理1(7.1%)、显著高于处理2(15.7%),而处理1和2之间差异不显著;不同处理去栓后36～48h内发情率,三种处理(51.4%、56.9%、50%)之间差异均不显著;不同处理去栓后48h发情率,处理1(14.2%)显著高于处理3(4.3%),其它处理间无明显差异;不同处理之间去栓后36～72h发情率,三种处理间(65.7%、64.5%、54.3%)也均无显著差异;不同处理的总发情率,处理3(88.6%)极显著高于处理1(72.9%),其它处理间无明显差异;持续发情或返情(发情羊中第7天仍发情的羊)的比例,处理3(18.6%)极显著高于处理1(2.9%)和处理2(3.9%),而处理1和2之间的差异不显著;实际胚胎移植可用羊数,处理1(62.3%)和处理2(60.8%)极显著高于处理3(35.7%),而处理1和2之间的差异不显著。     

硫化物醌氧化还原酶定向表达载体的构建及细胞转染表达检测

为建立硫化物醌氧化还原酶(SQR)的肠道定向表达载体,同时通过转染小鼠肠道上皮细胞确定载体的有效性,本试验采用重叠PCR、中间载体法、酶切连接法获得重组载体,通过脂质体转染法将重组载体转入小鼠肠道上皮细胞,并鉴定重组载体的特异性表达。结果显示,成功构建了以肠脂肪酸结合蛋白质(IFABP)为启动子的SQR肠道定向表达载体pc DNA3.1(-)-IFABP-SQR-GFP,并在小鼠肠道上皮细胞中检测到表达的融合绿色荧光蛋白质(GFP)。表明IFABP启动子能够在肠道细胞中定向启动SQR的表达。