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1.
2.
实时荧光PCR技术定量检测转基因大豆方法的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
以转基因大豆Roundup Ready为材料,通过特异性引物和探针,对转基因大豆中外源基因cp4-epsps进行了定量检测。研究发现Taqman荧光探针法和SYBR荧光染料法均可作为转基因大豆定量检测的方法,但前者比后者具更高的检测灵敏度和精确度,其检测阈值可降到0.05%,变异系数为0.09%~0.53%。在此基础上,建立和优化了Taqman探针实时荧光定量PCR检测技术体系,有助于提高转基因作物及产品的生物安全性定量检测的准确度和可靠性。 相似文献
3.
转Xa21基因杂交水稻选育和评价 总被引:1,自引:0,他引:1
通过基因枪转基因方法和双质粒共转化体系将Xa21基因转入优良恢复系明恢63,得到转基因系M12和M22,并进一步做田间试验、新品种选育和食用安全性评价。结果显示:M12和M22对中国的所有白叶枯病小种都表现出高度抗性,但与原受体品种明恢63相比,农艺性状上有许多变异,主要表现在:结实率、千粒重等农艺性状变差,与珍汕97A的配合力显著降低;但与温敏不育系(X07S、056S)配组的F1有较好的田间表现。通过多代回交和分子标记辅助选择,成功地将Xa21基因从M12株系转到保持系80-4B和不育系80-4A中,得到抗白叶枯病的皖21B和皖21A。并利用皖21A不育系选育出优良杂交组合抗优97(皖21A×R-18),该组合在两年区域试验和一年生产试验中产量表现突出,米质优良。对不同世代和不同遗传背景的转基因品系进行白叶枯病鉴定和Southern分析表明:Xa21基因都能稳定遗传和正常表达,连续16代的种植并没使其白叶枯病的抗性减弱或丧失,而且不论Xa21基因是纯合的还是杂合的都有相同的抗性表现。对大鼠和小鼠的饲喂试验表明:转基因大米实质上等同于非转基因大米,是安全无害的。 相似文献
4.
针对不同来源的样品,建立相应的双向电泳(two-dimensional gel electrophoresis, 2-DE)技术是开展蛋白质组学研究的基础。以野生型水稻(O. sativa L.)农林8号(N8)及其苯达松敏感致死(bentazon sensitive lethal, bsl)突变体农林8号m (N8m)为材料,通过优化条件,建立了适合于水稻微粒体蛋白的双向电泳技术。并通过双向电泳图谱的比对,共找到15个差异蛋白点,分为供试材料间差异、苯达松处理前后差异和N8在苯达松处理后特异表达等3种类型。结合苯达松抗性比较及苯达松残留分析,推测材料间差异是因γ射线辐照引起基因结构变异,从而影响了基因的表达;苯达松处理前后差异与氧自由基清除酶系或系统获得抗性相关酶系有关;N8在苯达松处理后特异表达与苯达松代谢有关。 相似文献
5.
6.
近红外反射技术建立合肥地区精米直链淀粉含量测定模型 总被引:1,自引:0,他引:1
以合肥地区种植的203份水稻材料为检测对象,用近红外反射技术采集光谱,常规化学方法测定精米直链淀粉含量。结果表明,定标样品的直链淀粉含量分布范围为3.439%~28.046%,代表性和连续性良好。采用多种计量数学处理方法和偏最小二乘法(PLS),优化建立了精米直链淀粉含量的定量分析预测模型。定标集(C-Set)样品数132个,相关系数(Rc)0.9278,定标标准差(SEC)1.6582;验证集(V-Set)样品数67个,相关系数(Rv)0.8736,预测标准差(SEP)1.9083,并证实所建立的模型在测定精米直链淀粉含量上具有很好的准确性和实用性,对合肥地区水稻品质育种及种质资源相关研究具有实用价值。 相似文献
7.
8.
[目的]比较3种中草药添加剂对育肥猪(巴克夏×梅山猪)生产性能以及生理生化指标的影响,筛选最佳中草药添加剂组方。[方法]选取体重为40 kg左右巴克夏×梅山猪杂交商品猪48头,随机分为对照组、中草药Ⅰ组、中草药Ⅱ组、中草药Ⅲ组,研究不同中草药添加剂对育肥猪生产性能及生理生化指标的影响。[结果]中草药Ⅰ组育肥猪的平均增重、平均日增重和料肉比均显著高于对照组和中草药Ⅱ组、中草药Ⅲ组(P0.05),中草药Ⅱ组、中草药Ⅲ组和对照组间差异不显著。生理生化指标表明,中草药Ⅰ组在总蛋白、白蛋白、球蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、葡萄糖等指标都有不同程度作用,中草药试验组在尿素氮指标显著高于对照组(P0.05)。[结论]中草药Ⅰ组配方可作为理想的饲料添加剂。 相似文献
9.
[目的]研究中草药添加剂饲喂育肥猪(巴克夏×梅山猪)免疫功能的影响。[方法]选取48头体重40 kg健康巴梅猪随机分为对照组和3个试验组。分别采集30、60和90 d血样,检测血清中总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白Ig G、Ig M和补体C3水平。屠宰后对免疫器官进行病理组织学检查,并进行组织切片观察。[结果]添加中草药试验组和对照组在总蛋白水平上差异不显著;试验Ⅰ组白蛋白水平在第30天显著高于对照组(P0.05);试验Ⅱ组血清中Ig G水平在第30天显著高于对照组(P0.05);Ⅱ组血清中Ig M水平在第60天显著低于对照组(P0.05),90 d极显著低于对照组(P0.01);C3补体试验组在第30天水平均显著高于对照组(P0.05)。屠宰组织器官观察和组织学切片观察均无明显差异。[结论]中草药饲料添加剂能够促进育肥猪的免疫功能。 相似文献
10.
为挖掘感染ALV-J汶上芦花鸡的肝差异表达致病相关基因。本研究以汶上芦花鸡为试验素材,分别在42和300日龄进行ALV血液病毒分离检测筛选ALV阴性和阳性个体,对ALV阳性个体有病理变化的肝组织和阴性个体肝组织进行PCR检测,分别选取3只ALV阳性(G1组)和阴性(G2组)个体的肝组织,并对G1组PCR产物测序、聚类分析确定ALV亚型,利用RNA-Seq测序技术筛选差异表达基因,并进行功能分析,利用荧光定量qRT-PCR对部分差异表达基因进行验证。结果表明,G1组样品经PCR检测、PCR扩增产物测序和聚类分析确定ALV为J亚型,转录组分析发现,共有42个差异基因在GO和KEGG中富集,其中,上调基因18个,下调基因24个。随机选取的5个差异表达基因qRT-PCR验证结果与RNA-Seq测序结果相一致。GO分析显示,差异表达基因主要涉及细胞过程、代谢过程、对刺激的反应、免疫系统等;KEGG分析显示,差异表达基因主要富集在细胞过程、信号传导、疾病、新陈代谢等信号通路。本研究通过转录组分析发现了影响ALV-J致病性的多个基因和关键信号通路,为深入了解ALV-J致病的分子机制提供了思路。 相似文献