温度、湿度和光照对苹果炭疽叶枯病菌(Glomerella cingulata)产孢的影响

苹果炭疽叶枯病(Glomerella cingulata)是我国苹果上新发现的一种病害,为了了解病原菌的产孢条件和产孢动态,为病害的预测预报与防控提供依据。本研究在人工控制条件下,测试了温度、湿度和光照对苹果炭疽叶枯病菌产生分生孢子和子囊孢子的影响。结果表明,苹果炭疽叶枯病新形成的病叶润湿后,在15℃~30℃下保湿培养2~6 d后可产生大量橘黄色的分生孢子堆,其中30℃下产孢量最大,产孢速度最快,仅需2 d时间。炭疽叶枯病菌在新形成的病叶上于15℃~30℃下培养20~30 d可形成子囊孢子,最适温度为25℃,子囊孢子的形成需要高湿环境或叶片润湿。炭疽叶枯病菌的单孢分离菌株于15℃~25℃下,在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上培养20~30 d也可形成子囊孢子,最适产孢温度25℃。紫外光、黑光和日光都能促进子囊孢子的形成。     

苹果树腐烂病菌产生细胞壁降解酶的种类及其活性分析

通过对酶活性的分析,研究证实苹果树腐烂病菌在活体外和寄主体内均能分泌一系列的细胞壁降解酶:多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、纤维素酶(Cx)、β-葡萄糖苷酶和木聚糖酶。不同碳源培养条件下,腐烂病菌产生细胞壁降解酶的活性及达到酶活性高峰的时间存在显著差异;诱导酶液对苹果愈伤组织具有明显的浸解作用,其中木聚糖为碳源产生的细胞壁降解酶,破坏能力最强。此外,研究发现,腐烂病菌在寄主体内产生细胞壁降解酶的活性变化规律不同,PMG和木聚糖酶在接种后最先被检测到活性显著升高,PMG酶活性于接种后第13天达到高峰,随后活性降低,而木聚糖酶和其他3种酶活性则随接种天数的增加活性不断增强;5种细胞壁降解酶中,Cx最大酶活性最低,而木聚糖酶活性最高,是其他酶最大活性的1.74～7.44倍。     

农杆菌介导樱桃干腐病菌的遗传转化

以携带潮霉素磷酸转移酶基因的pBIG3C为转化载体,根癌农杆菌EHA105为转化介体,对樱桃干腐病菌LXS230101分生孢子进行转化。结果表明,樱桃干腐病菌的最优转化体系为：α型分生孢子浓度为106个/mL,培养基中添加200μmol/mL乙酰丁香酮（AS）,共培养温度和时间分别为25℃和72 h,其转化效率为1×106个α型分生孢子产生686个转化子。随机选取转化子进行PCR和Southern blot 鉴定,发现T-DNA已整合进樱桃干腐病菌基因组中;转化子在不含潮霉素的PDA培养基中连续培养5代后,仍表现出对潮霉素的抗性,表明外源基因能在樱桃干腐病菌中稳定遗传。     

外源抗药性基因导入香菇体内的研究

利用PEG转化法将携有潮霉素抗药性基因的质粒载体导入香菇原生质体内，获得了抗性转化子，但转化率较低，每微克DNA仅有0．5个转化子。点杂交证实，外源基因已整合到香菇染色体；不同转化子在抗笥平板上生长速率不同，且转化子有丝分裂是稳定的。香菇转基因技术的成功，为利用该技术克隆香菇内源基因及启动子，将外源有益目的基因导入香菇体内，为培育香菇基因工程菌株提供了可能。     

一种强寄生病原真菌的分离方法 ―毛细管打孔单孢分离法

毛细管打孔单孢分离是将真菌孢子涂布在2%琼脂板上,显微镜下找到单孢后,用内径1mm毛细管直接打孔,然后挑取带有单孢的琼脂饼培养。毛细管打孔简化了单孢分离的操作过程,提高了单孢分离的速度和成功率,特别适合强寄生真菌的分离培养。用于梨黑星病菌、苹果褐斑病菌和樱桃褐斑病菌的分离培养,成功率达60%以上。     

内生放线菌A-1对苹果果实轮纹病的防效及防御性酶活性的影响

为揭示内生放线菌A-1对苹果果实轮纹病的防效及防病机制,采用平板法和喷雾处理刺伤接种法,测定了其对苹果轮纹病菌的抑制作用及果实内防御性酶活性的影响。结果表明：菌株A-1能显著抑制轮纹病菌菌丝生长,10⁴ CFU/mL菌悬液的抑制率达90%以上;喷施10⁷ CFU/mL A-1菌悬液后,间隔12 h以上接种的各处理,3 d和7 d时防效分别为91.79%~95.67%和77.41%~94.00%,均与对照农药苯醚甲环唑相当。喷施10⁷ CFU/mL A-1菌悬液后接种或不接种轮纹病菌的处理,果实内过氧化物酶、过氧化氢酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶活性显著升高,且均高于只接种轮纹病菌的处理;喷施A-1菌悬液后接种病原菌的处理酶活性增加最显著,其峰值是对照的2.30~11.00倍。表明内生放线菌A-1可通过产生拮抗物质、提高寄主防御性酶活性等机制实现对苹果轮纹病的有效防治。     

AM真菌对连作西瓜根内和根围土壤酚酸类物质和黄酮含量的影响

AM真菌是土壤共生真菌中分布最广泛的一类真菌,有研究表明其对植物次生代谢有影响,现以"京欣1号"西瓜品种为试材,以不同连作年限土壤为试验土壤,在温室盆栽条件下,研究了接种AM真菌对不同年限连作西瓜根内和根围土壤中酚酸类和黄酮类含量的影响。结果表明:接种AM真菌能够有效的提高根系内总酚的含量,增强西瓜根系抗病能力,减少土壤中酚酸类物质的积累,不论连作年限的长短,接种AM真菌对连作土壤酚酸类物质的积累都具有较强的抑制作用;根系内总黄酮的含量变化与总酚的变化趋势较为一致,呈不断上升的趋势,说明AM真菌有效的提高了根系内次生代谢物质的含量,且在一定程度上增加了连作土壤中黄酮物质的含量,且连作年限不同,对黄酮类物质的含量影响效果也不相同。     

一种强寄生病原真菌的分离方法 ―毛细管打孔单孢分离法

毛细管打孔单孢分离是将真菌孢子涂布在2%琼脂板上,显微镜下找到单孢后,用内径1 mm毛细管直接打孔,然后挑取带有单孢的琼脂饼培养.毛细管打孔简化了单孢分离的操作过程,提高了单孢分离的速度和成功率,特别适合强寄生真菌的分离培养.用于梨黑星病菌、苹果褐斑病菌和樱桃褐斑病菌的分离培养,成功率达60%以上.     

2011年烟台苹果产区腐烂病发病情况调查与原因分析(英文)

[目的]为了解2011年烟台苹果产区腐烂病的发生情况,研究病害的发生规律。[方法]2011年5月,在腐烂病发病较重的栖霞、海阳等地选择21个农户的果园,对腐烂病的发生情况进行了调查。[结果]结果表明,21个果园中具有新病疤的病株率为68.20%,死株率为2.76%,平均受害枝量为23.98%,死枝量10.74%,病株率超过50%的果园占25%~30%,总体发病情况比一般年份严重。调查共发现967块新病疤,平均每株2.32块,其中源自剪锯口的病疤占80.04%,从旧病疤复发的病疤占60.29%。[结论]2010年秋季的连续阴雨、冬季低温和2011年春季干旱可能是导致烟台苹果产区2011年春季腐烂病大发生的主要原因。剪锯口是腐烂病菌侵染的主要途径,旧病疤复发是春季腐烂病发病的主体。     

棉花黄萎病菌毒素生物测定技术初探

棉花黄萎病对棉花生产威胁很大。近年来,由于植物检疫工作未能跟上,盲目调引棉种,导致发病面积成倍扩大。因此,控制病害蔓延,确保棉花高产优质,选育抗病品种是极其重要的一环。棉花黄萎病是一种寡循环病害,其潜育期比较长,发生发展比较缓慢。在进行抗病性鉴定时,一般要半个月乃至一个多月才能取得结果,鉴定时间太长。为了探索抗性鉴定的速测方法,以缩短抗病育种的周期,1982和1983年,作者在利用棉花黄萎病菌毒素进行快速测定方面作了初步研究,在方法上获得了一些结果。