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1.
【目的】构建多拷贝整合表达禽流感病毒样颗粒的重组巴斯德毕赤酵母,为H5N1亚型禽流感基因工程疫苗提供基础。【方法】以巴斯德毕赤酵母GS115株18S rRNA基因(rDNA)部分序列,插入pPIC9K载体上XbaⅠ和Bsp1407Ⅰ位点间,构建多拷贝整合表达质粒p8K。再以禽流感病毒H5N1毒株基因组RNA为模板,RT-PCR扩增HA、M和NA基因,分别插入多拷贝载体p8K,构建表达质粒 p8K-HA/M/NA。表达质粒分别扩增后线性化,按比例混合,电转化GS115感受态细胞。增菌后,经遗传霉素G418抗性平板筛选、PCR鉴定携带HA、M和NA基因序列的多拷贝整合菌株。阳性菌株增菌、诱导表达、高压均质破碎后,Western-blot检测表达产物。【结果】PCR鉴定阳性的重组菌株,其细胞裂解蛋白,免疫印迹试验可检测到与HA、M1和NA分子量一致的蛋白条带;电子显微镜可观察到大小约为80~120 nm 的病毒样颗粒,免疫鸡能产生抗禽流感病毒中和抗体。【结论】重组毕赤酵母能够多拷贝整合、表达、组装禽流感病毒样颗粒。 相似文献
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正2014年5月14日,智利猪肉协会年度交流会在上海举行。智利猪肉协会主席胡安·奥瓦耶(Juan Ovalle)先生主持了此次活动,来自国内外的行业相关专家、媒体及知名经销商等百余人出席了本次交流会。此次活动的议题聚焦于从养猪产业到猪肉产品如何做到精益求精和可持续发展。智利猪肉协会有关人员和与会嘉宾分享了2013年智利猪业协会的卓越成 相似文献
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正西班牙阿拉贡自治区政府对外局携手西班牙脱水苜蓿制造商协会(AEFA)及几大主要苜蓿生产商如西班牙Navarro Aragonesa de Forrajes S.A.草业公司、西班牙VENSOS.A.草业公司、西班牙Alfalfas Ansó草业公司等企业参加了5月18~20日在青岛举办的第十二届中国畜牧业博览会暨2014中国国际畜牧业博览会。并于5月19日晚举办了 相似文献
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为确定临沂市机播条件下红玫瑰彩色马铃薯的最佳播种密度,开展了机播马铃薯相同行距(90 cm)、不同株距(14、18、22、26 cm)的密度试验,分析了不同密度处理对红玫瑰马铃薯出苗期、现蕾期、开花期、成熟期、株高、茎粗、主茎数、马铃薯晚疫病发病情况、产量、商品薯率的影响。结果表明:随着播种密度的增加,红玫瑰物候期无明显变化,株高、马铃薯晚疫病株数呈升高趋势,茎粗和主茎数呈降低趋势,商品薯率和商品薯产量呈下降趋势。以行距90 cm、株距22 cm密度下商品薯667 m~2产量最高,为2 129.25 kg,并且马铃薯晚疫病未见发生。 相似文献