空肠弯曲杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

空肠弯曲杆菌（Campylobacter jejuni）是一种人兽共患病病原菌,给养殖业带来了较大经济损失。为实现对空肠弯曲杆菌的快速检测,针对其MapA基因序列设计特异性引物,优化反应条件和反应体系,建立了空肠弯曲杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行了评估。结果显示：建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性,仅能特异性扩增出空肠弯曲杆菌,对胎儿空肠杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌无交叉反应;敏感性较强,最低检测限为6.42 copies/μL;以5个稀释度的重组质粒为模板分别进行组内和组间重复性试验,发现组内和组间Ct值变异系数（CV）均小于2.50%,说明该方法具有良好的可重复性。结果表明,本研究建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR具有良好的特异性、敏感性及重复性,可用于空肠弯曲杆菌的快速诊断和流行病学调查。     

南疆西部降法对土壤性质的影响

通过野外调查、定位试验和室内分析,探讨了南疆西部降尘与土壤在盐分和养分组成上的差异,分析了降尘对土壤积盐和肥力的作用。     

犬累卡佩斯病的诊断及手术疗法

介绍了犬累卡佩斯病的诊断方法及手术治疗方法,以期为该病的诊治提供参考。     

鸡骨保护素在毕赤酵母中的分泌表达及生物学活性测定

为了在毕赤酵母中表达鸡骨保护素(chOPG),采用DNA重组技术将鸡OPG成熟肽cDNA片段插入毕赤酵母表达载体pPICZ帷糃D·2 A中,以电穿孔法转化酵母X-33,用Zeocin平板筛选阳性重组子,经甲醇诱导,实现了OPG在毕赤酵母中的分泌表达.SDS-PAGE电泳分析结果显示,表达产物存在两种形式,其相对分子质量分别为43 000和53 000,表达量约为200 mg·L-1,经免疫印迹验证,有较好的抗原性.表达产物经处理后加入到体外培养的鸡胚破骨细胞上,能显著抑制成熟破骨细胞的骨吸收活性,减少骨吸收陷窝的个数与面积.     

南疆西部降尘对土壤性质的影响

通过野外调查、定位试验和室内分析,探讨了南疆西部降尘与土壤在盐分和养分组成上的差异,分析了降尘对土壤积盐和肥力的作用.     

关于褐土分类的建议

根据北京地区土壤的特点,讨论了褐土的性状和褐土的定义及褐土亚类检索。     

实验室生物安全与人员必备素质

保障实验室生物安全是一项综合性的管理工作,具有较强的专业性和科学性,是实验室生物安全管理体系建设正常运行的重要环节,是各级别实验室减少安全事故的组织保障,它涉及化学、医学、机械、生物、动物等多个领域和学科。减少生物实验室安全事故的关键在于管理和所从事实验室工作人员高度的安全意识。本文从实验室生物安全防护等级的划分、实验室相应配套的防护设备和设施、危险品的保管使用、剩余化学药品和废弃物的正确处理、实验动物饲养管理与福利,以及从事实验室工作人员的必备素质等方面阐述了生物实验室的管理。     

鸡骨保护素（chOPG）的原核表达、纯化及抗体制备

 【目的】骨保护素（OPG）是一种新发现能抑制前体破骨细胞分化及成熟破骨细胞活性的蛋白，本文旨在从体外扩增、表达鸡骨保护素（chOPG）蛋白，并制备其多克隆抗体，为深入研究它的生物学功能奠定基础。【方法】以体外培养的鸡胚成骨细胞中提取的总RNA为模板，利用RT-PCR方法，扩增出chOPG基因，测序后克隆至原核表达载体pET-32a（+），成功构建了原核表达质粒pET-32a（+）-OPG，重组质粒转化Rosetta-gami（DE3）pLysS，经IPTG诱导表达。【结果】表达产物经SDS-PAGE电泳，发现目的蛋白大小约为63 kD，占菌体总蛋白的11.9%，Western blotting分析显示，表达的chOPG蛋白具有良好的免疫反应性。用镍离子亲和层析的方法可获得纯化的蛋白，以纯化的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体，ELISA结果显示效价达到1﹕10240。Western印迹结果表明，该抗体可以和chOPG酵母表达产物特异性结合。【结论】成功地实现了鸡骨保护素在大肠杆菌中的表达，并获得其多克隆抗体。