禽肾炎病毒与鸡细小病毒双重PCR检测方法的建立

为了同时检测禽肾炎病毒(avian nephritis virus,ANV)和鸡细小病毒(chicken parvovirus,ChPV),根据GenBank中ANV的ORF基因和ChPV的NS1基因的保守序列,设计筛选了扩增片段大小分别为511 bp和242 bp的特异性引物,通过反应条件优化、特异性和敏感性试验,建立了一种双重PCR检测方法。该方法最佳引物比例为ANV上下引物各0.4μL(20 mol/L),ChPV上下引物各0.6μL(20 mol/L);最佳退火温度为53.8℃;灵敏度可达到55 fg(ANV)和58 fg(ChPV);对常见鸡病病原体进行检测,结果全为阴性。本研究建立的PCR方法具有特异、敏感、快速、稳定的优点,可用于同时鉴别诊断ANV和ChPV的混合感染。     

江西梅岭国家森林公园古树名木的分布特征

古树名木是自然界和前人留下的珍贵遗产和宝贵的林木种质资源。本文以每木调查法对江西梅岭国家森林公园内的古树名木的分布特征开展调查。结果表明:在水平分布上,古树名木分布于生态环境较好的罗亭镇和太平镇,占61.40%;在垂直分布上,海拔200 m以下分布居多,达68.38%。以香樟为例:发现海拔高度与树高呈明显正相关,与胸径呈明显负相关,与冠径和树龄呈负相关但不显著;在生境分布上,以村旁和林地居多,占67.28%;在地形分布上,分布于平坡、阳坡以及平地,分别占37.50%、90.44%和43.38%;在集群分布上,以散生为主,占83.46%。这些结果为该区域后续的古树名木资源保护提供可靠的信息资料。     

禽呼肠病毒感染鸡胚成纤维细胞后Toll样受体mRNA转录水平的动态变化

为分析禽呼肠病毒(ARV)标准毒株S1133株感染鸡胚成纤维细胞(CEF)后对相关鸡Toll样受体(ChTLRs)mRNA转录水平的影响作用,利用实时荧光定量PCR,测定和分析ARV-S1133感染CEF后ARV结构蛋白σC和ChTLRs的mRNA转录水平变化情况。结果表明,ARV-S1133感染CEF 10h后,ARVσC蛋白的mRNA相对表达量开始迅速上升,在48h达到峰值;同时,感染CEF中的ChTLR3、ChTLR5、ChTLR7、ChTLR15和ChTLR21mRNA表达量发生显著变化,在感染72h内各个受体的mRNA表达量呈波浪式变化。5个不同滴度的ARV感染CEF 24 h后,ChTLR3、ChTLR5、ChTLR7、ChTLR15、ChTLR21mRNA转录水平与病毒滴度均呈正线性相关。上述结果表明,ARV感染后可诱导CEF ChTLR3、ChTLR5、ChTLR7、ChTLR15、ChTLR21的mRNA转录水平发生变化,可能与禽呼肠病毒的复制和致病机制相关。     

樱花栽植管理

正樱花栽植管理是樱花栽培养护的基础,因为樱花只有栽植成活后才谈得上以后的施肥、修剪等管理工作。在樱花栽植之前应该对樱花的栽培习性有充分的了解,在此基础上选择合理的地点和土壤栽植樱花,这样才能为樱花以后的栽培管理打下坚实的基础,起到事半功倍的效果。一、养樱谚语和樱花六怕1.养樱谚语·樱花与梅花,植地忌低洼。·樱花剪者为笨伯,不剪梅花亦笨伯。·樱桃白玉兰,伤口愈合难。·暖地秋植,冷地春植。     

微滴式数字PCR定量检测鸡毒支原体方法的建立

为建立微滴式数字PCR（droplet digital PCR,ddPCR）定量检测鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum,MG）方法,以MG的mgpc基因序列为目的序列,在其保守区域内设计合成了1对特异性引物和1条探针,通过各反应条件优化,建立了检测MG的ddPCR方法,并测定了建立方法的特异性、敏感性以及重复性。结果显示：建立方法的最佳引物浓度为20 μmol/μL,探针浓度为10 μmol/μL,退火温度为55 ℃;该方法只检出MG,没有检出鸡滑液囊支原体、禽衣阿华支原体、禽流感病毒、鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、禽脑脊髓炎病毒、禽偏肺炎病毒、禽呼肠孤病毒、鸡沙门氏菌和鸡大肠杆菌,且相互间没有交叉反应;本方法最低检测MG重组质粒标准品的检测限为3.9拷贝/μL。重组质粒标准品浓度在3.9~41 025拷贝/μL范围内,绘制的ddPCR绝对定量曲线与测得值呈良好的线性关系（R2 = 0.999）;3次重复检测试验结果的变异系数均小于5%。对采集的60份病鸡喉拭子、气囊拭子及肺样品进行MG检测,结果ddPCR方法的阳性检出率（15.0%）高于荧光定量PCR方法（13.3%）。结果表明,本研究建立的ddPCR方法定量检测MG特异性强,灵敏度高,重复性好,为绝对定量检测MG提供了技术手段。     

杜鹃盆景

杜鹃花是杜鹃花科杜鹃花属的落叶或半常绿灌木,她溶观花、赏干、看根、品形四者于一身,是制作盆景的良好素材。杜鹃盆景具有根干苍劲、叶片稠密、开花娇艳的优点,深受广大人们喜爱。     

玫瑰橙引种初报

通过高接换种方式,在福建省莆田常太镇时茂农庄果园进行了玫瑰橙引种栽培试验。经连续3年观察,玫瑰橙表现为果实低酸,具玫瑰风味,果形端正,优质丰产,抗逆性、适应性强,且性状稳定,在≥10℃年活动积温5 000℃以上、1月最低温〉-3℃地区适宜种植。     

一树梅花十样景

梅花品种丰富(见彩页),从枝条上可分为直枝、垂枝及龙游(枝条自然扭曲)3类,从花色上可分为红、粉、白、绿、洒金(一树开红白两色花)等色;从花态上看,有花心又开一小花的台阁梅,有花开朵朵向下的照水梅等;此外梅花品系中还有一些远缘杂交种,如杏梅、樱李梅等,这些远缘杂交种抗寒性强,是北方梅园的主力军。一树梅花能否集大成,即包容上述梅花呢?笔者通过实践,摸索出一种制作十样景梅花的方法。