Sf9昆虫细胞系的致瘤性研究

为确定Sf9昆虫细胞系作为疫苗生产细胞株的安全性,检测了Sf9细胞对裸鼠的致瘤性。将3周龄SPF级雌性裸鼠随机分为5组,分别为Sf9基础细胞库细胞组、Sf9最高限制代次细胞组、阳性对照Hep-2细胞组、阴性对照CEF细胞组和空白对照组,以各自细胞悬液皮下接种裸鼠。在接种后21 d和84 d观察接种部位肿瘤形成情况,并进行病理组织学检查。结果显示,接种后21 d,Hep-2细胞组裸鼠注射部位形成米粒大小结节,经病理组织学检查为鳞状细胞癌,而CEF细胞组和Sf9细胞组注射部位均无结节。接种后84 d,经病理组织学检查,CEF细胞组和Sf9细胞组均无肿瘤形成。本研究表明基础代次和最高限制代次Sf9细胞均不具有致瘤性,Sf9细胞可用于疫苗生产。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是影响世界养猪业的重要病原,为了解析该病毒N蛋白抗原表位,本研究制备获得纯化的重组N蛋白,经过BALB/c小鼠免疫、细胞融合、间接ELISA方法筛选和Western blot鉴定,获得了7株稳定分泌抗PRRSV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,细胞培养上清液抗体效价为1∶800～1∶25 600,其中8F1、5E2、2B1、12E1的重链类型为IgG1,4F1、2H2、5A2的重链类型为IgG2b,轻链类型都为κ型。间接免疫荧光试验显示7株单克隆抗体均与PRRSV感染细胞产生反应,可识别3种不同的B细胞线性表位,分别位于47～57 aa、57～67 aa及67～77 aa区域,其中57～67 aa为新发现的抗原表位。本研究结果为PRRSV诊断试剂盒的开发和流行病学调查提供了有用工具。     

猪繁殖与呼吸综合征综合防控技术与应用

猪繁殖与呼吸综合征是严重影响生猪产业的经济性疫病之一,控制该病对于保障养猪生产稳定发展意义重大。本文概述了猪繁殖与呼吸综合征的控制技术,总结了近年来国家生猪产业技术体系在猪繁殖与呼吸综合征综合防控技术应用方面的工作成效。     

湖北省某规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征的诊断及流行毒株GP5基因特性分析

2016年湖北省某猪场暴发一起疫情。通过病史调查、临床观察、实验室诊断,确诊该疫情为猪繁殖与呼吸综合征。对病原测序分析的结果显示:其Nsp2基因存在30个氨基酸缺失;ORF5基因与WUH1野毒株同源性最高。此外,生产母猪群和后备猪群血清样品的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ELISA N蛋白抗体S/P值离散度较大,证明该病原为高致病性PRRSV。     

荷包猪SLA-3-HB01基因四聚体前体链的构建及表达

为了构建荷包猪SLA-3-HB01基因四聚体前体链原核表达载体,并获得SLA-3-HB01表达蛋白,试验以SLA-3-HB01/pMD18-T为模板进行PCR扩增四聚体前体链SLA-3-HB01-BSP,并克隆至pMD19-T载体中,经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切筛选阳性克隆并测序,目的基因连接至表达载体pET-21a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白大小及表达情况,提取包涵体并进行检测。结果显示,PCR成功扩增得到SLA-3-HB01-BSP,大小为896bp左右。酶切鉴定证实,目的基因成功克隆至pMD19-T载体中,插入片段大小为876bp,阳性克隆经测序后所获序列与原序列一致,并在3′端带有BSP标签序列。酶切鉴定进一步证实成功构建SLA-3-HB01-BSP/pET-21a(+)重组表达载体,经转化及诱导表达,SDS-PAGE检测显示目的蛋白分子质量在33.5ku左右。包涵体蛋白分子质量约33.5ku,与菌体中目的蛋白大小一致,经凝胶成像系统UVP扫描分析,包涵体蛋白纯度接近于90%,符合进行相关结构和功能研究的要求。本研究成功构建了荷包猪SLA-3-HB01基因四聚体前体链的pET-21a(+)重组表达系统,并获得了一定纯度的包涵体蛋白。     

猪繁殖与呼吸综合征诊断与疫苗研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是危害世界养猪业的最严重的传染病之一,自出现以来迅速在世界范围内大面积流行,对养猪业造成不可估量的损失,因此对于该病的研究具有重要的意义.近几年来,随着各国对该病的研究日益深入,在疫病的防控机制、诊断方法等方面也取得了重要进展.文章就近年来猪繁殖与呼吸综合征诊断方法和疫苗的发展概况进行了综述,诊断方法...     

检测流感病毒的商业PCR试剂盒比对验证

利用8种不同流感病毒株及其核酸,结合自然感染组织样品与人工混合样,验证比较了8种商业PCR试剂盒的质量参数。结果表明,3号荧光PCR试剂盒漏检1株外,其他试剂盒均可以检测8种毒株,对其他类似病毒如猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒和猪环状病毒核酸等无交叉反应,最高可检测到10-7稀释的目标核酸,重复性与再现性均为理想,在有效期内检测结果没有发生变化。     

PLC控制系统的防雷措施

随着现代化控制技术的发展,目前,PLC控制系统广泛应用于工矿企业等单位。PLC的主体及外围传感器均为电子器件组成,它们极易遭受感应雷电和雷电浪涌的危害,因而给此类设备造成损坏。本文从几个方面分析了雷电对PLC控制系统的危害,提出了有针对性的防护措施和方法。     

猪蓝耳病免疫防控存在的问题与对策

猪蓝耳病是猪场的一个"桶",常会伴随猪链球菌、猪细小病毒、副猪嗜血杆菌病等的发生。母猪感染蓝耳病后的临床症状:母猪产仔弱、死胎、仔猪呼吸道症状等。(一)猪蓝耳病感染与防控现状PRRSV感染非常普遍,阳性场的比率非常高,但并不是所有     

长春市月季露地栽培技术

月季已经成功在长春市进行了露地栽培,该项成功丰富了绿化花卉品种,使城市增加了更多靓丽的色彩,因此,月季在长春市的绿化中发挥了重要作用。根据笔者多年的实践经验,文章总结了月季露地栽培的技术要点,以供参考。