p53-EGFP表达载体的构建及其对A549的影响

构建具有EGFP标签的抑癌基因p53表达载体,并验证其对肺癌细胞A549的影响。以质粒pcDNA3.1-p53为模板,设计引物并进行PCR扩增获得目的基因p53,将获得的目的基因克隆至载体pcDNA3.1-EGFP上,用琼脂糖凝胶电泳检测目的条带,双酶切以及测序验证。将克隆好的载体,利用脂质体法转染A549细胞,荧光显微镜下观察,同时用MTT法测不同时间段细胞OD值。结果表明,琼脂糖凝胶电泳结果显示,目的基因扩增成功。双酶切及DNA测序结果均证实,成功构建了载体pcDNA3.1-EGFP-p53。转染A549细胞后,荧光显微镜下观察到绿色荧光。MTT法测定结果表明,目的基因转染的A549细胞组所测得的OD值明显低于对照组(p0.01)。因此,具有EGFP标签的抑癌基因p53表达载体pcDNA3.1-EGFP-p53构建成功,转染A549细胞后,对A549细胞具有一定抑制作用。为后续继续研究p53-MDM2生物发光能量共振转移作用奠定了基础。     

露地盆栽月季主要病虫害及绿色防控技术

露地盆栽月季在栽培过程中极易受黑斑病、白粉病、霜霉病、灰霉病、月季长管蚜、二斑叶螨、西花蓟马、花蓟马、月季叶蜂等病虫害侵染,使月季花期缩短,花朵变小,植株矮小,严重影响其观赏价值。本文着重论述露地盆栽月季主要病虫害及绿色防控技术。     

两个柑橘品种内生细菌富集方法的筛选

为探究不同预处理对柑橘内生细菌的富集效果,本研究以脐橙和蜜柑的叶片与果皮为材料,通过对其内生细菌基因组DNA提取和Illumina测序,比较分析了3种富集内生细菌的方法。结果表明,与对照相比,3种方法均能有效富集内生细菌。样品组织经A处理(1.5%离析酶R-10+1.5%纤维素酶R-10+8.55%蔗糖)、B处理(1.5%离析酶R-10+1.5%纤维素酶R-10+12.8%甘露醇+0.12%MES+0.36%CaCl_2·2H_2O+0.011%NaH_2PO_4)和C处理(8.55%蔗糖)处理后,植物叶绿体DNA占宏基因组DNA的比例均有所降低,其中脐橙叶片和蜜柑果皮经过A处理效果最佳,分别为7.34%、74.89%;脐橙果皮和蜜柑叶片经过B处理效果最佳,分别为36.07%、9.65%;与对照相比,经3种处理能增加OTU分类单元数量,增加变形菌门和厚壁菌门细菌的含量,可获得更多内生细菌种类。由此可知,3种方法在内生细菌富集中均有一定的效果,其中A和B处理最佳,使内生细菌能够更好地被富集,有效减少了柑橘叶绿体DNA的干扰。本试验结果为柑橘及其他植物内生细菌的富集方法和相关研究提供了理论参考。     

茶文化视角下我国民俗体育文化探究

茶文化是扎根于中华民族文化土壤发展起来的一种文化,是文化活动与价值观结合后的产物,有着深厚的精神内涵和文化底蕴,对国民素质培养和体育文化发展有积极的推动作用。本文以推动民俗体育文化发展为目的,从当前我国民俗体育文化开展现状入手,对茶文化视角下的民俗体育文化发展策略进行了简要分析,充分发挥茶文化对民俗体育文化发展的积极作用。     

铁皮石斛液体口香糖的研制

以铁皮石斛、青钱柳和玫瑰茄为原料,研制液体口香糖。通过感官评价、正交试验得出最佳配比为铁皮石斛汁34%,青钱柳汁12%,玫瑰茄汁23%,菊花汁31%,薄荷脑0.58%,吐温-80 0.23%,苯甲酸钠0.02%。并对液体口香糖的抑菌效果进行了评价,结果表明:研制的铁皮石斛液体口香糖外观呈红色液体,均匀一致,具有青钱柳、玫瑰茄、菊花的复合气味,口感酸甜清爽,无异味;并对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有一定抑制作用。     

川芎浸膏萃取溶剂研究及其有机溶剂残留量的测定

本论文基于某已上市复方川芎制剂制备工艺,通过对其制备过程中的萃取溶剂替代研究以及有机溶剂残留测定方法研究,建立了以乙酸乙酯替代原生产工艺中三氯甲烷的川芎浸膏制备方法,同时建立了气相色谱法测定浸膏中有机溶剂的残留。结果表明,以乙酸乙酯作为川芎浸膏的萃取溶剂,与原浸膏HPLC法检测结果一致,并更安全绿色环保。应用所建立的GC法测定浸膏中乙酸乙酯残留,加样回收率98.44%,该方法稳定可靠,可用于测定浸膏中的乙酸乙酯残留。     

黄精产地加工工艺研究

为考察多花黄精产地加工工艺的具体参数,以其外观、口感、干燥时间、多糖含量、醇浸物及水浸物含量作为指标,运用综合评分法考察烫制和蒸制两种方法、不同处理时间及干燥温度对黄精品质的影响。结果表明:黄精产地加工适宜工艺是将黄精去须根,清洗,烫制4 min后,70℃干燥,所得样品的外观、口感评分为5分,多糖含量为9.96%,醇浸物含量为84.75%,水浸物含量为85.02%,综合得分为0.93。     

解读新《水土保持法》

<正>水利部副部长周英:新《水土保持法》的主要内容。新《水土保持法》共7章60条,较原法6章42条分别增加了1章、18条。第一章总则部分由原法11条修订为9条,对立法宗旨、调整对象、基本原则和适用范围等重要内容进行了补充和     

植物保护课程理实一体考试改革探讨

分析了植物保护课程传统考试存在的问题,并从树立现代高职考试观、明确考试目的、丰富考试形式、充实考试内容、促使考试人性化与科学化等方面,提出了该课程理实一体考试改革的对策。     

不同混比泥炭覆土对双孢蘑菇产量及品质的影响

针对当前双孢蘑菇工厂化生产质量与产量不够稳定的现状,为改善双孢蘑菇工厂化生产的覆土性能,开展了国产泥炭中添加不同比例进口泥炭的混合覆土对双孢蘑菇产量和品质的影响试验。结果表明,在相同的生长环境条件下,增加覆土中进口泥炭的含量,有利于双孢蘑菇生长和产量增加,同时对产品品质也有提升作用。