以SRAP和EST-SSR标记分析芝麻种质资源的遗传多样性

利用SRAP和EST-SSR分子标记对192份国内外芝麻种质资源进行遗传多样性分析。结果表明，2种标记都能很好地揭示品种间遗传关系；在31对SRAP引物组合扩增的270个等位基因中多态性占62.08%，平均每对引物可以检测5.45个；25对SSR引物扩增的136个等位基因中56.28%呈多态性，平均每对检测引物产生3.04个。UPGMA聚类结果显示，在相似性系数为0.70时，192份材料可被分为3个类群；阈值为0.75时类群Ⅰ又可分为6组，表明芝麻品种遗传多样性比较丰富。我国南部地区芝麻品种遗传多样性(多样性指数H_i=2.572)较中部(H_i=2.117)和北部地区 (H_i=2.114)丰富。分析结果将有助于更好地保护和利用芝麻种质资源，并为育种工作提供依据。     

棉花SSR多重PCR技术的初步研究和利用

简单重复序列(simple sequences repeat,SSR)具有数量丰富、高度多态、共显性等优点,是一种极具实用价值的标记,目前已成为研究种质资源遗传多样性、基因组作图的首选标记.SSR多重PCR扩增法可同时完成多个标记检测,具有高效、经济、快捷的特点,并保持了单一SSR引物扩增的高度敏感性和准确性.本文选取6对SSR引物,配成三组SSR两重PCR反应,并设置五种不同反应体系以探索PCR反应体系对其影响,以单一引物PCR扩增为对照,对用于构建亚洲棉(Gossypium arboreum)遗传图谱所用的亲本、F1及F2群体单株的DNA模板进行多重PCR探索、分析;另外,在扩增产物的电泳检测时,结合银染技术,试验了单一引物PCR扩增产物在同一泳道同时上样和先后分时上样的两重检测的方法,以期对这种方法进行多态性位点检测的效果进行评价.结果表明,即使采用与单一引物PCR相同的反应体系,两重PCR扩增也可获得与之相同的多态性产物;而两重检测法的结果亦显示出与相应的单引物检测到的相应的多态性位点,能准确反映单引物所能达到的检测效果,因而为SSR的多重PCR和扩增后多重检测的技术在高效的遗传图谱构建工作中进一步应用提供实验依据.     

陆地棉开放花蕾品系E-81的遗传鉴定

从 90年代开始 ,我国先后从海岛棉 ( Gossypi-um barbadense L.)与陆地棉 ( G.hirsutum L.)杂种后代中发现了开放花蕾变异株 ,并开展了用于杂交种种子生产的研究。遗传学研究证明这些品系的开放花蕾性状受 1对隐性基因所控制 (肖杰华 1 991 ;张天真 1 992 ;纪家华等 1 992 ) ,它们的产生是由于具有不同的单节显性基因的海岛棉和陆地棉杂交后 ,由于基因重组所产生的 (张天真1 992 )。湖南省棉花研究所把隐性无腺体基因gl2 gl3 导入到开放花蕾品系 ,培育出无腺体指示性状标记的开放花蕾品系 E- 81用于制种 (李育强等 1 996 ) ,而 E- 81品系…     

一种高通量提取棉花BAC-DNA的方法

从文库中筛选目标克隆组成重叠克隆群(contigs)是利用 BAC ( bacterial artificial chro mosome)文库构建物理图谱,进一步进行图位克隆的重要步骤。文库的筛选按原理可分为探针杂交法和PCR法两种。与探针杂交法相比 PCR法具有周期短,灵敏度高,操作简单的特点,因此得到广泛应用。但是,即使利用各种混合策略,相对于数万的文库克隆来说,BAC DNA 的提取仍是PCR法筛选文库不可避免的问题。因此,我们开发了一种高通量的 BAC DNA提取方法,实现在8 h内完成多达 960 个样品的高通量提取,DNA产量达到4~6μg,样品无交叉污染并且避免了…     

遗传工程法改造绒毡层的遗传组成定向培育植物雄性不育系的现状及展望

植物的雄性不育系在品种的群体改良及杂种优势的利用户具有重要的应用价值。随着分子生物学研究的不断深入，现在不仅从拟南芥植物克隆了雄性不育基因（Aarts等，1993），并且通过遗传工程法改造花药绒毡层的遗传组成，定向培育出了油菜、”玉米、棉花等多种重要农作物的核雄性不育系，为雄性不育系的产生提供了一条新途径。1绒毡层提早解离与雄性不育1.1雄性不育系的培育实验证明，花药中的绒毡层对小孢子的发育起了很大的作用。绒毡层的提早或延迟解体往往导致小孢子不正常发育而表现雄性不育。为此，比利时植物遗传系统公司（PlantGene…     

插皮接技术在棉花再生植株嫁接中的应用

首次将插皮接技术用于棉花再生植株的嫁接,详细介绍了它的操作过程和实用技巧,该法要求简单,操作方便,成活率高;成活后砧芽枝摘心留叶有利于接穗良好生长发育。在砧木适合的嫁接时期、成活率和生长速率等方面与劈接法作了比较。结果表明:插皮接对砧木和接穗粗细比例无严格要求,从而延长了砧木可使用的时期,砧木生长过程中适合劈接的时间有一周左右(3~5片真叶),而在此以后的较长时间内均适合于插皮接(4~5片真叶直到开花期);由于形成层吻合好,使用的砧木较大,有较发达的根系,在高成活率的前提下相对缩短了再生植株成活的时间。再生植株嫁接前不练苗,在嫁接后采取新的保湿和透气策略,使练苗和嫁接同期进行,有效缩短了再生植株缓苗时间。     

分子标记辅助选择的修饰回交聚合育种方法及其在棉花上的应用

修饰回交育种法是将杂种品系间杂交和回交方法结合起来，用于棉花多个优良性状聚合的育种改良方法。随着分子标记技术日益完善地用于育种的选择中，我们提出了分子标记辅助选择的修饰回交聚合育种方法。它以生产上推广或即将推广的品种为轮回亲本，将修饰回交育种法和分子标记辅助选择育种相结合，同时对轮回亲本的遗传背景和     

高产棉花品种泗棉3号的遗传机制研究Ⅰ.产量及其产量构成因素的遗传分析

利用泗棉3号和CARMEN构建的RIL及其F₂、B₁、B₂、P₁、P₂、F₁两套群体，同时在3个环境中，采用各自的联合世代分析方法，研究了我国长江流域棉区广泛种植的优良品种泗棉3号高产性状的遗传规律。遗传模型分析揭示泗棉3号×Carmen组合的产量及其产量构成因素的最适遗传模型符合主基因+多基因混合遗传模型，说明存在控制这些性状的主基因。所有性状在不同环境中的遗传模型不同。同时，各性状在不同环境中的主基因遗传率变化较大，而多基因遗传率在不同环境中变化相对较小，表明环境对数量性状主基因的表达影响大，对多基因的表达也存在影响。对环境间差异较大性状的研究和选育，要在多个特定的环境中进行，才能提高效率。     

棉纤维发育相关基因时空表达与纤维品质的关联分析

以14个纤维品质差异的棉花品种(或品系)为材料,研究10个纤维发育相关基因时空表达变化与纤维品质的关系,为阐明棉纤维发育相关基因与纤维品质形成关系提供理论基础。利用实时荧光定量PCR技术检测10个基因在14个供试品种(或品系)不同纤维发育时期的相对表达量,结果表明,虽然遗传背景完全不同,但它们具有某些共同表达特征。GhExp1、GhCIPK1、GhSus1、GhSusA1和GhPL这5个基因都是在纤维伸长期优势表达;GhACT1、GhRacA和GhRacB是在纤维伸长前期和次生壁加厚期高表达;而GhCelA1和GhcelA3是在纤维伸长后期和次生壁加厚期优势表达。这些基因表达谱与纤维品质关联分析显示,GhRacA在23DPA高表达且表达量与纤维品质显著正相关,其余基因在低表达时其表达量与纤维品质呈显著性相关,而在高表达时其表达量与纤维品质无相关性。GhExp1在20DPA的表达量与纤维比强度和整齐度呈显著负相关,与伸长率呈极显著正相关;GhPL在23DPA的表达量与纤维长度呈显著负相关;GhRacA在5DPA和23DPA的表达量均与伸长率呈极显著正相关;GhRacB在10DPA的表达量与长度和整齐度呈显著负相关;GhCelA1基因在5DPA的表达量与纤维长度呈显著正相关,与马克隆值呈显著负相关,在10DPA的表达量与马克隆值呈显著正相关,与伸长率达到极显著正相关,与比强度呈显著负相关,与长度和整齐度呈极显著负相关;GhCIPK1、GhACT1、GhSus1、GhSusA1和GhCelA3 这5个基因在纤维发育各时期的表达量与纤维品质各指标未检测到相关性。     

利用农杆菌介导法转化泗棉3号的研究

泗棉3号农艺性状优良，是20世纪90年代长江流域棉区的主栽品种，利用基因工程导入外源基因进行直接改良，可以迅速获得新的品种或育种材料。以陆地棉泗棉3号的下胚轴为外植体，建立了高效的转化体系，得到了大量的转基因植株。泗棉3号的出愈率和分化率显著高于模式品种Coker 312，同时它出现分化中心的主要形态不同于Coker 312，其胚性愈伤组织主要来源于两类初生愈伤组织。对泗棉3号的胚性愈伤组织进行GUS检测，以及对再生植株叶片进行PCR检测后，阳性植株嫁接于温室。在温室用2 063.98 μmol L^-1的卡那霉素点涂叶片检测nptⅡ基因的表达和取叶片进行gus基因的组织化学检测，同时通过Southern blot分析检测，证明目的基因成功地整合到泗棉3号基因组中。