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为了获得兔抗鸡碱性氨基酸转运载体b0,+AT多克隆抗体,并对多克隆抗体进行特异性分析,本试验利用鸡b0,+AT cDNA全序列(GenBank登录号HQ338713)进行生物信息学分析,预测其蛋白质理化性质、跨膜区域、二级结构及抗原表位,并设计出1段抗原多肽;构建鸡pET-32a(+)-b0,+AT质粒,原核表达融合蛋白经纯化后,注射于新西兰大白兔,经3次加强免疫后,制备兔抗鸡b0,+AT多克隆抗体,并采用酶联免疫分析(ELISA)和蛋白质免疫印迹(Westernblot)技术分析其效价和特异性。结果如下:1)鸡肠道b0,+AT分子质量为53.8 ku,等电点为8.27,编码493个氨基酸,其中含33个强碱性氨基酸残基(K、R)、28个强酸性氨基酸残基(D、E)、235个疏水性氨基酸残基(A、I、L、F、W、V)、122个极性氨基酸残基(N、C、Q、S、T、Y);经推测,b0,+AT有12个跨膜螺旋结构,由32.05%α-螺旋、25.96%延伸链和41.99%无规则卷曲组成。2)成功构建了鸡pET-32a(+)-b0,+AT质粒并获得兔抗鸡b0,+AT多克隆抗体,抗体效价可达到1∶204 800,且特异性较好。3)利用制备的兔抗鸡b0,+AT多克隆抗体作为一抗,肠道组织膜蛋白为抗原,采用Western blot验证获得预期的特异性条带,一抗稀释比例为1∶4 000。结果提示,本试验成功制备了与膜蛋白b0,+AT特异性较好的多克隆抗体,同时其在鸡肠道组织中具有较好的应用效果。 相似文献
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通过对21日龄黄羽肉鸡器官指数和胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶以及血清中木糖水平进行检测,研究酶制剂对动物内脏器官所产生的影响,以及组合酶和单酶之间的差异。木聚糖酶在小麦型日粮中添加,降低了肝脏、肌胃、腺胃、十二指肠、空肠和回肠的器官指数,增加了胰腺的器官指数;降低了胃蛋白酶和胰蛋白酶的分泌水平;组合酶比单酶降低小肠器官指数更明显,单酶增加了胰脂肪酶的分泌水平,组合酶降低了胰脂肪酶的分泌水平,差异不显著(P>0.05)。小麦型日粮饲喂组血清中木糖的水平高于玉米型日粮组和加酶组,酶制剂的添加降低了血液中的木糖水平,各处理组之间差异不显著(P>0.05)。 相似文献
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生长猪对菜粕和豆粕中磷真消化率的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
选用6头健康大白×长白阉公猪为消化试验动物,采用6×6拉丁方设计,设6个磷水平(0.11%,0.22%,0.33%,0.44%,0.55%,0.53%),以豆粕、葡萄糖、玉米淀粉等为基础,以菜粕为待测植物性饲料,配制半纯合试验饲粮,其中菜粕和豆粕为磷唯一来源。日粮中添加0.35%Cr2O3作为外源指示剂。分6个试验期(每期8 d,6 d适应期,2d收粪期),测定了生长猪内源磷排泄量及菜粕和豆粕磷的真消化率。结果表明:生长猪内源磷的排泄量为0.210 8g/kg DMI,菜粕、豆粕及6个半纯合饲粮中磷表观消化率分别为-0.30%,25.77%,7.25%,16.29%,16.54%,23.62%,15.04%,28.97%,而其真消化率分别为10.21%,32.94%,26.22%,23.62%,22.95%,23.57%,22.81%,32.94%。说明饲料磷真消化率更能反映动物对饲料磷消化吸收的真实情况,具有相对较好的重演性。 相似文献
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喹赛多和喹乙醇对肉兔生产性能、肉品质及内分泌的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】比较喹赛多和喹乙醇对肉兔生产性能、肉品质及内分泌的影响。【方法】选择120只30日龄齐卡兔,随机分成5组,每组24只,单笼饲养,对照组饲喂基础日粮、试验组分别饲喂添加50,100 mg/kg喹赛多及50,100 mg/kg喹乙醇基础日粮,试验期60 d,试验结束时测定肉兔的生产性能、肉品质及内分泌指标。【结果】与对照组相比,各试验组肉兔的平均日增重,屠宰率和血清IGF-Ⅰ含量显著提高,料重比和腹泻率显著降低。各组胰腺指数、肝脏指数、肾脏指数和脾脏指数差异均不显著(P>0.05)。各组肉兔肌肉pH值、粗蛋白、粗脂肪(除100 mg/kg喹赛多处理组外)、水分和粗灰分含量差异均不显著(P>0.05)。试验组肉兔血清T3和T4含量均有提高,添加量为100 mg/kg时差异均显著(P<0.05)。【结论】肉兔饲粮中添加喹赛多效果优于喹乙醇,37~90日龄肉兔饲粮喹赛多适宜添加量为100 mg/kg。 相似文献