大豆携带菜豆晕疫病菌PCR检测技术研究

晕疫病是豆科作物上重要的检疫性细菌病害。本研究在传统 PCR 检测技术的基础上，分析了细菌洗涤液、洗涤时间以及洗涤液容量对一粒带菌大豆检出率的影响，以及有效检出不同带菌率大豆的最佳检测时间。结果表明，洗涤液种类、洗涤时间以及洗涤液容量对检测结果影响不大，但对不同带菌率大豆洗涤时间的长短直接影响病菌的检出率，实验表明振荡洗涤时间8 h，可检测到的大豆种子最低带菌率为0.0625%。本研究所建立的检测方法简便易行，可有效应用于口岸检测进口大豆中的菜豆晕疫病菌。     

泡桐丛枝植原体抗原膜蛋白抗血清的制备及应用

 根据报道的泡桐丛枝植原体(Paulownia witches’-broom phytoplasma,PaWB)抗原膜蛋白(antigenic membrane pro-tein,AMP)基因的核苷酸序列设计引物,提取发病泡桐总DNA,经PCR扩增并成功克隆泡桐丛枝植原体amp基因。序列分析表明,amp基因由696个核苷酸组成,编码231个氨基酸残基,与GenBank中登录的2个泡桐丛枝植原体的膜蛋白核苷酸序列同源性为100%。将amp基因91-604 nt部分序列(命名为ampd)克隆到原核表达载体pGEX-4T-3,诱导后,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表明融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了高效表达。以纯化的带GST标签的AMPD融合蛋白为抗原免疫德国大白兔,制备了PaWB-AMPD抗血清。利用该血清,通过Western印迹、点印迹、ELISA、间接免疫荧光和免疫捕获PCR试验均能在发病泡桐组织中特异检测到泡桐丛枝植原体。     

番茄细菌性叶斑病菌RPA检测技术研究

青枯菌为应对逆境胁迫,可进入活的但非可培养状态(viable but non-eulturable,VBNC).本文利用叠氮溴化丙锭(PMA)与PCR技术相结合,建立了一种快速有效区分青枯菌死活细胞的分子检测方法.基于hrcS基因序列,设计了一对青枯菌种特异性检测引物hrcSf/hrcSr;利用PMA对青枯菌Po82菌株的细胞悬浮液样品进行预处理,随后进行常规PCR扩增.结果表明,当样品中PMA质量浓度为3 μg/mL、曝光时间大于5 min时,PMA可有效抑制死亡菌体细胞中的DNA扩增;且对可培养和VBNC状态细胞中的DNA扩增没有影响;本试验建立的PMA-PCR方法能有效对包括VBNC状态在内的青枯菌活菌进行检测,避免了假阳性与假阴性结果的产生.     

土层置换对草甸土理化性状及作物产量的影响

研究旨在探讨土层置换对土壤物理性质和化学性质的变化及对作物产量的影响,这对作物高产具有重要意义。试验地点选在黑龙江省宝清县草甸土上,以玉米绥玉7、马铃薯克新13和甜菜德国KWS3418为材料,设置土层置换和浅翻深松2个处理,分析不同处理对土壤含水率、硬度、土壤三相、速效养分及产量的影响。结果表明:与浅翻深松处理相比,土层置换处理后2年内,明显改善土壤物理性质,0~40 cm土层土壤含水率分别提高3.7%和3.0%;土壤硬度分别下降17.6%和21.6%。20~40 cm土壤固相分别降低0.3%和0.7%;液相分别提高3.7%和1.1%;气相分别提高2.0%和4.2%。进而容重降低,提高土壤通透性。土层置换处理改善20~40 cm土层土壤化学性质,提高土壤速效养分。20~40 cm土层平均养分变化为:碱解氮分别提高48.4%和46.0%;速效钾分别提高12.9%和38.9%;速效磷分别提高11.9%和15.6%。土壤不同层次物理和化学性质的改变能够提高作物产量,与浅翻深松处理相比,2011年、2012年玉米分别增产31.6%、17.9%,马铃薯分别增产70.5%、25.0%,甜菜分别增产12.4%和38.9%,差异达到显著水平。综合以上分析表明,土层置换处理后土壤2个作物生育期内能够改善心土层土壤物理性状、化学性状,从而提高作物产量。因此土层置换技术可为低产土壤改良及作物高产提供理论依据和技术支持。     

钾肥不同基追比对烤烟K326烟叶品质的影响

在钾肥用量不变的前提下,为明确钾肥的最佳基追比例,通过梯度对比试验,比较了钾肥不同基肥与追肥配比对K326烟叶的外观质量、内在化学成分及感官评吸的影响。结果表明:在钾肥的基肥与追肥配比为4︰6时,烤后烟叶的成熟度、颜色、叶片结构、油分及色度均有改善,烟叶的外观质量达到最优;烟叶的总糖和还原糖含量增加,总氮和烟碱含量有所增加但均处于合理范围,同时各项化学成分指标更趋于协调;增加了烟叶的香气质和香气量,减小了刺激性和杂气,改善烟叶吃味。综合考虑钾肥不同基追比对烟叶品质的影响,建议在生产中钾肥的基肥和追肥配比为4︰6,以提高烟叶工业可用性。     

PCR-DHPLC技术快速检测玉米细菌性枯萎病菌

本研究成功建立了玉米细菌性枯萎病菌的PCR检测方法.该方法根据细菌ITS序列的特异性,设计了对玉米细菌性枯萎病菌具有稳定性点突变的特异性引物及探针,并对5株玉米细菌性枯萎病菌及18种植物原性细菌的DNA进行了PCR、实时荧光PCR及PCR结合变性高效液相色谱技术(PCR-DHPLC)检测.结果表明,几种方法特异性强,检测灵敏度均为菌液浓度102 cfu/mL,PCR-DHPLC技术具有检测成本较低、高通量、自动化程度高、污染风险小及鉴定结果准确等特点,能够满足快速、准确诊断玉米细菌性枯萎病菌的要求.     

美国俄亥俄州保护性耕作体系情况与黑龙江省农业持续发展建议

2016年9月17日-11月17日,应美国俄亥俄州立大学南部中心菲克·伊斯兰姆博士邀请出访美国学习先进的保护性耕作技术。通过2个月的学习、培训、交流了解到美国俄亥俄州先进的保护性耕作模式主要有3种,第一种是大豆-冬小麦-玉米3年期的轮作,其中冬小麦收获后可引入大豆作为保护性覆盖作物;第二种是大豆-玉米的隔年轮作;第三种是大豆-玉米轮作中引入黑麦等覆盖作物。该保护性耕作技术体系十分成熟,处于世界领先地位,结合黑龙江省农业发展现状,3种先进的保护性耕作模式中,大豆-玉米隔年轮作的保护性耕作技术适宜在黑龙江省大面积推广。     

莫让山洪冲跑了天池游客

天池自然保护区位于天山博格达峰北麓 ,面积4 0 0 4 9公顷 ,举世闻名的天池就处在该保护区功能区天池风景区内 ,海拔 1910米 ,距乌鲁木齐 10 0公里。天池现已成为著名的风景名胜游览区 ,每年接纳中外游客 30余万人次 ,是新疆旅游的明珠 ,也是区外人士了解新疆的一个窗口。但是 ,近几年逐年暴发的山洪对天池及其源头生态环境造成了很大的破坏 ,应引起重视。天池是一个高山湖泊 ,面积 2 4 8公顷 ,它的形成与当地古地质构造运动有关。在江河流域第四纪时期古冰川的作用下 ,加上最新一次槽谷内经历的新构造运动 ,巨大冰川席卷巨石覆盖于坝体上 ,…     

黄瓜细菌性角斑病菌交叉引物恒温扩增检测技术

黄瓜细菌性角斑病是我国黄瓜生产上的重要病害之一,其病原菌为Pseudomonas syringae pv.lachrymans。根据该病原菌甘油醛-3-磷酸脱氢基因保守序列设计引物和探针,建立了交叉引物恒温扩增和核酸试纸条检测技术。菌体DNA检测灵敏度可达0.55 ng,纯菌直接检测灵敏度基本可达到单个细菌。所测试的5株黄瓜细菌性角斑病菌和染病黄瓜叶片均为阳性,其他13株对照菌株均为阴性。该方法灵敏度高,且操作简单,对设备要求低等,适合基层实验室应用。     

永城煤矿塌陷区水污染对鲫鱼外周血细胞数量的影响

选用鲫鱼(Carassius auratus)为研究对象,以相对无煤矿污染的商丘天沐湖为对照,以煤矿污染较严重的永城煤矿塌陷积水区为研究样地,研究永城煤矿塌陷区水质对鲫鱼外周血细胞数量的影响。结果表明:与对照天沐湖相比,永城煤矿塌陷区样地鲫鱼的红细胞数量极显著增加(P<0.01),但白细胞数量差异不显著(P>0.05);从白细胞分类计数统计结果看,淋巴细胞极显著增加(P<0.01),血栓细胞极显著减少(P<0.01),单核细胞显著减少(P<0.05);嗜中性粒细胞虽有减少,但两地差异不显著(P>0.05)。总之,永城煤矿塌陷区水污染已造成鲫鱼外周血细胞数量发生明显改变。