雾霾天气下车辆制动过程的应用研究

雾霾降低道路的能见度,降低了道路行驶安全性,导致车辆易发生侧滑漂移。通过分析研究车辆制动过程的重要组成部分,以及汽车的制动性能状况,明确雾霾天气影响车辆制动,并以图表的形式直观清晰地展现雾霾对制动过程的影响。通过对雾霾进行影响交通行驶安全等级划分,将雾霾各项参数具体化,并采用控制变量方法对各个影响因素分别进行数据计算分析,最终得出汽车综合制动过程曲线,用计算机仿真实验模拟雾霾天气下车辆实际行驶状况,可降低交通事故的发生概率。     

安徽省农村居民人均生活消费支出计量分析

参考凯恩斯的消费理论建立函数模型,运用阿尔蒙估计法对安徽省农民纯收入及农民价格消费指数与消费支出进行估计分析,并就扩大农村居民消费给出建议。     

生长因子和体细胞共培养对牛体外受精的影响

为研究表皮生长因子（EGF）和胰岛素（Insulin）对牛卵母细胞体外发育的影响以及体细胞共培养对体外受精胚胎体外发育的影响，将获取的牛卵泡卵母细胞在含有30μg，LEGF或50mg／L Insulin或30μg／LEGF＋50mg／L Insulin的成熟培养液中进行成熟培养，比较不同生长因子对牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响；将受精卵用颗粒细胞单层培养系统或牛输卵管上皮细胞单层培养系统进行体外培养，比较体细胞共培养系统对体外受精胚胎体外发育的影响。结果表明，成熟培养液中添加30μg／LEGF或者30μg／LEGF＋50mg／L Insulin可以显著提高卵母细胞的成熟率和受精后的卵裂率（P〈0．05）；输卵管上皮细胞共培养系统可以显著提高受精后的囊胚发育率（P〈0．05），可以用于牛体外受精胚胎的体外培养。     

山羊转t-PA突变体基因的体细胞核移植研究

比较了用转t-PA突变体基因的胎儿成纤维细胞和卵丘细胞作供体时核移胚的发育情况。结果表明：卵丘细胞作供体时，核移胚的卵裂率（82.9%）和桑葚胚率（55.9%）均高于胎儿成纤维细胞卵裂率（75.7%）和桑葚胚率（48.7%），但差异不显著（P＞0.05）；卵丘细胞作供体时的囊胚率（19.7%）则高于胎儿成纤维细胞（11.0%），差异显著。(P<0.05)。比较了饥饿处理与否对胎儿成纤维细胞作供体时转基因核移胚的发育情况。结果表明：供体细胞饥饿后，其核移胚的卵裂率（75.6%）与供体不饥饿的卵裂率（75.8%）差异不显著；供体细胞饥饿后，其核移胚的桑葚胚率（46.5%）和囊胚率（11.0%）高于供体不饥饿的桑葚胚率（39.3%）和囊胚率（9.0%），但差异不显著。比较了SOFaa和CR1aa分别添加10%FBS和bFF后，转基因核移胚的发育情况。结果表明：用CR1aa液培养时，添加10%bFF，其囊胚率（9.1%）高于添加10%FBS（4.2%）（P＞0.05）；用SOF液培养时，添加10%bFF，其囊胚率（11.2%）高于添加10%FBS（5.5%）（P＞0.05）。说明用SOF液优于CR1aa液。     

山羊基因组文库的构建研究

构建了山羊基因组文库，为筛选山羊乳蛋白基因，构建山羊乳蛋白基因定点整合的转基因敲入载体奠定基础。全血提取基因组DNA，Sau3AΙ部分酶切，分级分离回收15~23 kb片段，将片段插入Lambda BlueSTAR BamHΙ vector，连接并包装后，NotI酶切鉴定。结果表明，文库滴度为3.4×106；共得到1.7×106个有效克隆，插入片断长度在15~23kb范围，成功构建了西农萨能奶山羊基因组文库。     

LIF与心肌条件液在小鼠ES细胞分离中的差异比较

通过比较LIF和大鼠心肌条件液在小鼠ES细胞分离培养过程中的差异, 从而选择较为合适的培养液用于小鼠ES细胞的分离培养与深入研究。取怀孕3.5 d小鼠囊胚, 培养于小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上, 然后根据ES细胞培养液的不同分成2组,一组添加LIF的ES细胞培养液，另一组添加由大鼠心肌条件液组成的ES细胞培养液。结果显示，小鼠ICM的孵出率在心肌条件液中为76.30 %, LIF条件液中为59.35 %,两者差异极显著(p＜0.01)))))) ; 在LIF条件液中比心肌条件液中能较早地分离出ICM，时间差分别为11、11、12、10和12 h，平均为11.2 h; 对传代的ES细胞集落，培养48 h时周边出现分化现象的ES细胞集落所占的比例在心肌条件液中为51.55%, LIF条件液中为31.69 %，两者差异显著(p＜0.05); 第五代小鼠ES细胞核型正常率在心肌细胞条件液中为78.6 %， 稍高于LIF条件液中的76 %，差异不显著。     

小鼠卵母细胞去核时间对卵丘细胞核移植的影响

对超数排卵的小鼠分别在注射HCG后14~16, 16~18, 18~20和20~22 h采小鼠卵母细胞用于 核移植, 观察小鼠卵母细胞的去核时间在体细胞核移植中的作用。结果显示, 在注射hCG后14~16, 16~18, 18~20和20~22 h, 小鼠卵母细胞去核效率分别为80.09 %(338/422), 73.12 %(283/387), 55.02 %(230/418)和48.74 %(193/396); 重构胚激活率分别为 66.20 %(190/287), 75.43 %(175/232), 84.78 %(156/184)和85.14 %(126/ 148); 重构胚的囊胚发育率分别为13.94 %(40/287), 7.33 %(17/232), 3.80 %(7/184)和1.35 %(2/148)。试验证实小鼠卵母细胞在注射hCG后14~16 h进行去核较为适宜。     

山羊乳腺上皮细胞的培养及EGFP基因转化

用组织块培养法获得山羊乳腺细胞原代培养物，并根据山羊乳腺成纤维细胞与上皮细胞对胰蛋白酶的敏感性不同将二者分离纯化。对细胞形态进行光镜观察发现：纯化的山羊乳腺上皮细胞传代至第15代时其生长仍正常。纯化的乳腺上皮细胞增殖可形成圆顶型结构，呈乳头状，称之为乳球体；乳腺上皮细胞可产生并分泌乳汁。山羊乳腺上皮细胞含不同的细胞类型，大多数上皮细胞呈短梭形或多角形，呈蜂窝状；部分细胞呈圆饼状，体积较大；部分细胞呈长形。采用电穿孔法将绿色荧光蛋白（EGFP）基因转化体外培养的山羊乳腺上皮细胞，荧光显微镜下观察到EGFP基因的表达。     

山羊卵母细胞无血清体外成熟培养

为研究无血清培养系统对山羊卵母细胞体外成熟及孤雌激活胚胎早期发育力的影响,分别以0.3%牛血清蛋白(BSA)(mV)、1%聚乙烯醇(PVA)(mV)和1%胰岛素转铁蛋白亚硒酸钠(ITS)(VV)代替成熟培养液中胎牛血清(FBS),以添加5?S的OM为对照组,对来源于屠宰场的卵巢卵母细胞复合体(COCs)进行体外培养。成熟率PVA添加组(50.00%)显著低于FBS组(83.23%)(P<0.01)、BSA组(71.19%)和ITS组(76.79%),与FBS组无显著差异(P>0.05);成熟卵母细胞用离子霉素联合6-DMAP激活,在SOFaa中进行孤雌胚培养,BSA、PVA、ITS及FBS各组的卵裂率依次为61.90%、46.97%、79.07%和83.58%,囊胚率分别为25.00%、19.70%、55.81%和60.45%。结果表明:在OM基础培养液中添加BSA或PVA,卵母细胞的成熟率明显低于添加FBS,且卵裂率和囊胚发育率也低于对照组(P<0.05或P<0.01);添加ITS,卵母细胞成熟率虽低于对照组,但孤雌胚卵裂率和囊胚发育率与对照组接近(P>0.05)。表明以ITS代替FBS,可用于山羊卵母细胞体外成熟培养。     

山羊-绵羊异质体细胞克隆胚中线粒体DNA的杂合性分析

摘要：线粒体是哺乳动物细胞中唯一存在有核外遗传物质的细胞器，其功能的正常表达需要核与线粒体的相互作用。线粒体 DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)编码电子传递链所需酶中的一些多肽亚基及多种 tRNA 和 rRNA，其余的亚基由核基因编码。异种体细胞核移植可能导致重构胚中 mtDNA 的杂合现象。本实验采用 PCR-限制性片段长度多态性（PCR-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP）的方法分析以山羊胎儿成纤维细胞为核供体，以去核的绵羊 MⅡ 期卵母细胞为核受体构建的异质克隆胚中线粒体的来源及组成比例。结果表明： 8-cell之前的异质克隆胚中供受体 mtDNA 的比例变化不大，1-cell、2-cell、4-cell、8-cel异质克隆胚中核供体细胞 mtDNA 占受体细胞 mtDNA 的比例分别为2.5±0.8 %；2.8±0.6 %；1.9±0.4 %；1.7±0.6 %， 彼此之间差异不显著（P>0.05）；然而，异质克隆囊胚中核供体细胞 mtDNA 的比例下降为0.3±0.1 %，与前四者相比差异显著（P<0.05）。