猕猴核移植研究进展及前景(续完)

3.5 卵母细胞、胚胎和体细胞的冻存超低温冷冻是体外保存体细胞、卵母细胞和胚胎的主要方法.体细胞冻存技术相对简单且复苏后具有较高的存活率,已有用体细胞冻存复苏后进行核移植产生存活哺乳动物的先例[24],猕猴核移植研究时,将经过短期传代的正常二倍体体细胞进行冻存,是解决供体细胞来源的可行方法之一.     

重复超数排卵获取家兔成熟卵母细胞的研究

采用重复手术方法 ,对经过激素刺激超数排卵的家兔成熟卵母细胞进行收集和筛选评价 ,探索不同组合激素处理对家兔进行超数排卵 ,获得大量的高质量卵母细胞简单有效的方法 ,为进行兔转基因、核移植等相关方面的研究奠定基础。采用FSH +HCG和FSH混合PVP(2 5 % )两种激素处理组合 ,并用正常排卵雌兔作对照 ,经过三次手术法取卵 (每次间隔至少 5 0d以上 )。经输卵管插管 ,由输卵管伞端收集卵母细胞并进行筛选。结果 ,采用激素处理的两组获取总卵母细胞数和可用卵数比对照组均高出 3倍以上 (P <0 0 5 ) ,两种超排方法之间超排效果无显著差异 (P >0 1) ;三次连续手术均成活的家兔中 ,对照组和FSH +HCG组三次取卵效果无显著差异 (P >0 0 5 ) ,FSH混合PVP(2 5 % )组首次手术与第三次手术出现显著差异 (P <0 0 1)。重复采用FSH +HCG和FSH混合PVP(2 5 % )两种激素处理组合超数排卵 ,手术法收集卵母细胞 ,简化超排程序 ,增加超排效果 ,提高实验动物利用率     

猕猴核移植研究进展及前景

本文回顾了弥猴核移植相关简史，介绍了猕猴核移植的技术路线，对限制猕猴体细胞核移植研究的因素：核供体的筛选、卵母细胞的获得、超数排卵的影响因素、重构胚的激活及体外培养体系等进行了综述，并展望猕猴核移植的应用前景。     

猕猴核移植研究进展及前景(待续)

本文回顾了猕猴核移植相关简史,介绍了猕猴核移植的技术路线,对限制猕猴体细胞核移植研究的因素:核供体的筛选、卵母细胞的获得、超数排卵的影响因素、重构胚的激活及体外培养体系等进行了综述,并展望猕猴核移植的应用前景.     

重复手术法收集超数排卵后的家兔卵母细胞

采用促卵泡素(FSH)和FSH混合25%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)两种方法进行超数排卵,以正常排卵母兔作对照,经过3次重复剖腹手术(每次间隔至少50天以上)收集家兔卵母细胞,旨在探索大量获取家兔成熟卵母细胞简单有效的方法。结果超数排卵的两组获取总卵母细胞数和可用卵数比对照组均高出3倍以上(P=0.001),两种超数排卵效果无显著差异(P>0.1)。3次连续手术均成活的家兔中,对照组和FSH组3次取卵效果无显著差异(P>0.05),FSH混合25%PVP组首次手术与第三次手术卵母细胞数出现显著差异(P<0.01)。本方法可有效获取大量家兔卵母细胞,并提高实验动物利用率。     

重复超数排卵获取兔成熟卵母细胞的研究

采用重复剖腹的手术方法，收集经过激素刺激超数排卵兔的成熟卵母细胞，分为垂体促卵泡素（FSH）组（3d分6次注射）和FSH与250mg/L聚乙烯吡咯烷酮（PVP）混合组，用正常排卵雌兔作对照。结果，经3次手术取卵（每次手术间隔至少50d以上），由输卵插管冲出卵母细胞，收集并筛选，用激素处理的2组获取总卵母细胞数和可用卵数比对照组均高出3倍以上（P＜0．01），两种超排方法之间超排效果无显著差异（P＞0．05），连续3次手术均成活兔中，对照组和FSH组3次聚卵效果无显著差异（P＞0．05），FSH与PVP混合组次手术与第3次手术出现显著差异（P＜0．01）。