血小板衍生生长因子和表皮生长因子对山羊SSCs凋亡相关基因的影响

为了研究表皮生长因子和血小板衍生生长因子-BB对山羊SSCs中凋亡相关基因的影响,本研究将60~75日龄的山羊睾丸(n=6)剪碎后,利用两步酶消化法得到睾丸单细胞悬液,然后通过两次差速贴壁法分离纯化山羊SSCs,并采用免疫荧光染色法对山羊SSCs进行鉴定。随后,单独或联合添加EGF和PDGF-BB,体外培养山羊SSCs 6d,运用real time PCR技术检测不同处理组中BAD、BCL2和BAX基因的相对表达量。结果表明,睾丸单细胞悬液经两次差速贴壁纯化后,能够获得纯度较高的SSCs。染色结果显示,纯化后的细胞大量表达SSCs的标记分子THY1和PLZF。与对照组相比,3个试验组的BCL2基因表达量均上调。其中,联合添加20ng/mL PDGF-BB+25ng/mL EGF处理组的中细胞的抗凋亡能力显著高于其他组(P0.05),25ng/mL EGF组的BCL2表达水平显著高于对照组(P0.05),然而20ng/mL PDGF-BB组中的抗凋亡基因BCL2表达水平与对照组相比差异不显著(P0.05);与其他所有试验组相比,对照组的促凋亡基因BAX和BAD的表达水平显著升高(P0.05),而试验组之间差异均不显著(P0.05)。     

山羊精液冷冻保存研究进展

精液的冷冻保存可使精液长期保存和运输,扩大精液的使用范围,使配种不受时间、地域、种畜生命的限制。充分利用优秀种公畜的遗传资源,加快育种工作进程,提高优良公畜的配种效率和种用价值。随着养羊业的迅速发展,冷冻山羊精液亟待应用于生产。山羊精液的冷冻保存是一个复杂的过程,为了获得理想的保存效果,需要平衡多种因素。从山羊精液冷冻保存剂成分、冷冻解冻的过程、冷冻过程的影响因素等方面予以综述,旨在为今后的精液冷冻保存研究工作提供一定的参考依据。     

枸杞多糖对山羊精原细胞体外增殖的影响

为研究枸杞多糖对山羊精原干细胞体外增殖的影响,使用机械分离法、两步酶解法及差速贴壁获取纯度较高的山羊精原干细胞,使用碱性磷酸酶(AKP)染色法及免疫荧光染色法对山羊SSCs进行鉴定;通过添加不同浓度的LBP培养山羊精原干细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖数量,筛选最佳体外培养浓度;分别测试细胞丙二醛(MDA)、超氧化物...     

表皮调节素、上皮有丝分裂原和干细胞因子对山羊精原干细胞增殖的影响

为了揭示表皮调节素(Epiregulin/EREG)、上皮有丝分裂原(Epigen/EPG)和干细胞因子(SCF)对山羊精原干细胞(SSCs)增殖的影响,改进SSCs体外培养体系。在含有胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和白细胞抑制因子(LIF)的SSCs培养基基础上,分别添加20 ng/mL干细胞因子、20 ng/mL表皮调节素、20 ng/mL和100 ng/mL上皮有丝分裂原。对富集后山羊SSCs进行12 d的培养,测定培养过程中山羊SSCs生长曲线和细胞活性。结果表明:添加100 ng/mL上皮有丝分裂原和20 ng/mL的表皮调节素相比其他组能够显著促进山羊SSCs的体外增殖和细胞活力(P0.05);其中培养12 d后添加20 ng/mL表皮调节素的细胞活力显著高于其他组,但细胞数量与100 ng/mL上皮有丝分裂原组无显著差异。20 ng/mL SCF相比对照组能够显著提高体外增殖和细胞活力(P0.05),但低于100 ng/mL上皮有丝分裂原和20 ng/mL表皮调节素组(P0.05)。因此,添加100 ng/mL上皮有丝分裂原、20 ng/mL干细胞因子和20 ng/mL表皮调节素能够提高山羊SSCs的增殖,其中添加20 ng/mL表皮调节素效果最佳。