云南省向日葵病害发生与控制途径

1999－2001年对云南省向日葵病害进行调查，初步查清了近几年向日葵病害发生的种类，并对病害发生特点、危害性进行研究，提出了较为适用的控制途径。     

云南省油葵生产概况与利用蜜蜂授粉提高产量的几项措施

油葵因具有适应性强、产量高、油质好、用途广等特点，近几年在我省迅速发展起来。我省油葵生产起步较晚，但发展很快。自１９９４年我省虹元科技开发公司引入美国迪卡遗传公司（ＤＥＫＡＬＢ）培育的三系油葵杂交种Ｇ１０１、Ｇ１０３、ＤＫ３７９０试种，并与省农科院油料所联合示范开发获得成功以后，１９９５年在昆明、楚雄等９个地县市进行试验示范，种植面积１３４．４ｈｍ２，平均每ｈｍ２产量达到２３６１．７５ｋｇ。１９９６年在昆明、楚雄、红河、丽江等１０个地州２９个县种植约３３３ｈｍ２，平均每ｈｍ２产量为２２２０ｋｇ。…     

基于PK15细胞的猪圆环病毒2型全悬浮培养工艺

【目的】筛选1株适合PCV2病毒生产的悬浮细胞株,摸索PCV2悬浮生产工艺（病毒种毒来源、MOI及收获时间）,为大规模悬浮培养技术制备疫苗提供试验依据。【方法】使用有限稀释法对PK15原细胞稀释后接种于96孔板,每2 d观察细胞生长和形态,待细胞90%长满后,将细胞从96孔板陆续扩至24孔板、12孔板、6孔板,最后到方瓶,筛选3株可贴壁生长的、形态较好的PK15克隆。3株克隆（PK15-1C8、2F11、1E5）按照1×10⁶细胞/mL的密度,直接接种在PK15的无血清培养基中,并置于37℃,5%二氧化碳,120 r/min的摇床培养箱中继续培养,每天监测细胞密度和活率,每3 d传代,使细胞逐渐适应悬浮环境,驯化为可全悬浮、无血清培养的悬浮细胞株;细胞传代稳定并建库后,接种PCV2病毒,通过对比3株悬浮克隆细胞培养PCV2病毒含量的差异,筛选1株克隆细胞,用于生产PCV2;针对不同种毒（来源于贴壁细胞或悬浮细胞）,摸索感染MOI（0.1、0.2、0.5）及收获时间（48、72、96、120h）,确定PCV2最佳生产工艺。【结果】（1）贴壁细胞置于无血清培养基中,适应至第2代时细胞即可呈悬浮生长,连续传至11代,细胞生长稳定,按照1×10⁶/mL接种细胞,细胞生长72h时细胞密度可达到10×10⁶/mL,活率在95%以上,倍增时间为20h左右;（2）3株悬浮细胞使用相同条件,分别接种PCV2病毒后,PK15-1C8克隆细胞的病毒含量可达到10^6.4TCID₅₀/mL,克隆PK15-2F11（10^5.5TCID₅₀/mL）、PK15-1E5（10^5.6TCID₅₀/mL）,3株克隆细胞病毒含量均高于原克隆（10^4.7TCID₅₀/mL）,但PK15-1C8克隆细胞的病毒含量更高且更稳定,确定为后续研究用细胞;（3）使用贴壁细胞来源的种毒（10^6.4TCID₅₀/mL）感染PK15-1C8克隆细胞后,最优工艺为接毒时细胞密度1×10⁶/mL,以0.1MOI接毒,接毒后72h收获,最高病毒含量为10^6.5TCID₅₀/mL。以来源于悬浮细胞的种毒（10^6.3TCID₅₀/mL）感染细胞后,病毒含量较贴壁细胞来源种毒更高,最高可达10^7.3TCID₅₀/mL,其最优工艺为接毒时细胞密度1×10⁶/mL,以0.2MOI接毒,接毒后72h收获。【结论】通过对PK15细胞进行单克隆筛选,驯化悬浮、3株悬浮细胞接种PCV2后病毒含量的对比,确定一株病毒含量最高的悬浮细胞,并以此悬浮细胞为基础进行PCV2生产工艺摸索,建立了全悬浮无血清培养的PK15-1C8细胞增殖PCV2工艺,该工艺首次使用悬浮细胞扩增PCV2病毒为种毒进行接毒,最高病毒含量可达10^7.3TCID₅₀/mL,可用于工厂化疫苗生产。     

杂交油葵的利用及高产栽培技术

油葵是近几年来迅速发展起来的一种新兴优质高产油料作物.1994年美国杂交油葵引入云南省种植以来,因其具有适应性广、抗逆性强、产量稳定、葵籽出油率高、油质好等特点,受到群众普遍欢迎.     

蚕豆叶片气孔及其抗锈病性研究

 对H2771,8833-4,H3130等15个蚕豆品种进行了抗锈病性鉴定, 并观察比较了这些品种1～3台叶上、下表皮气孔密度和开启度及其与抗锈病性的相关变化情况。结果表明：蚕豆叶片气孔密度下表皮明显高于上表皮;下表皮气孔密度第3台叶明显高于第1、第2台叶并且气孔密度与开启度呈极显著负相关。品种的抗锈病性随下表皮气孔密度的增加抗性减弱。     

滇大蓟种苗工厂化生产

以滇大蓟成熟叶片为外植体，在添加不同激素的MS培养基中，进行组织培养，建立了滇大蓟再生快繁工厂化生产技术体系。其结果表明：愈伤组织在MS 6-BA2mg／L NAA0．2mg／L上诱导；愈伤组织接种在MS 6-BA0．5mg／L NAA0．05mg／L上分化不定芽，继续继代进行芽苗生长并不断增殖；壮苗接于1／3MS基上生根，生根率为99％以上，这样完成植株再生。带根、茎、叶壮苗不必经过炼苗可直接移栽，成活率为89％以上。经研究，不同植物激素浓度配比组合、培养温度对芽苗增殖、生长有影响。