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为揭示ApoD对鸡成肌细胞增殖与分化的调控作用,研究在鸡原代成肌细胞中分别过表达和干扰ApoD基因,检测胞内活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量,同时通过流式细胞术、CCK-8、qRT-PCR及免疫印迹等试验探究其对细胞增殖和分化的影响。结果显示:ApoD降低胞内ROS和MDA含量,促进鸡原代成肌细胞增殖;同时,ApoD下调肌肉萎缩标志基因Atrogin1和MuRF1的表达,上调生肌因子MyoD、MyoG和MyHC的表达,从而促进鸡原代成肌细胞分化。研究结果提示ApoD通过降低胞内ROS含量、降低Atrogin1对MyoD的泛素化降解作用以及MuRF1对MyHC的抑制作用,促进鸡成肌细胞增殖与分化。 相似文献
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目的 探索circRIPK2在鸡骨骼肌生长发育中的功能及作用机制。方法 依据反向剪切位点设计收敛、发散引物,并结合Sanger测序验证circRIPK2的环形结构。利用RT-PCR探究不同发育时期circRIPK2的表达水平。通过构建过表达载体,结合EdU、流式细胞术和RT-PCR,探究circRIPK2对鸡原代成肌细胞增殖分化的影响。结果 PCR电泳结果及Sanger测序证明circRIPK2环化位点真实存在。RT-PCR结果表明,和对照组相比,过表达circRIPK2后,对细胞增殖有抑制作用的标记基因p21的mRNA表达上调20%,对细胞增殖有促进作用的标记基因Cyclin B2、Cyclin D1、Cyclin D2和PCNA的mRNA表达分别下调39%、22%、29%和45%;肌分化标记基因MyHC、MYOG和Myomaker的mRNA表达分别上调了39%、56%和25%。EdU检测细胞增殖和流式细胞术检测细胞周期变化的结果表明,circRIPK2抑制细胞增殖进程。结论 circRIPK2可能通过抑制成肌细胞增殖、促进成肌细胞分化,从而影响鸡骨骼肌的生长发育过程。 相似文献
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